資源描述：
《放化療聯(lián)合對肺癌細胞凋亡影響的實驗研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、上海第二醫(yī)科大學碩士學位論文放化療聯(lián)合對肺癌細胞凋亡影響的實驗研究姓名：楊念欽申請學位級別：碩士專業(yè)：影像醫(yī)學與核醫(yī)學指導教師：黃鋼2003.5.1上海第二醫(yī)科大學碩士學位論文中文摘簧放化療聯(lián)合對肺癌細胞凋亡影響的實驗研究中文擦要薅癌邑成為發(fā)這鏊家瘸疰死亡瓣主要艨因l“。在歇潮集體薅梭，單撬痰襝及HCT聯(lián)合應用被推薦使用于肺癌的早期診斷【21。每年全世界大約有50多萬釋癌惠者竣診凝。手術、敝療、純療仍是三大主要方法，瞧NSCLC的大部分患者都無法手術，近40％表現(xiàn)為局部嚴重的難以切除的損害。若單獨使用放療，平均存
2、活約9．10月，5年存滔率約7％【3j，聯(lián)合放療化療可提高5年存滿率約3。4倍。選年來提勰局部控制的方法主要鴦：放療壤敏藥物約運展，許多獲辨瘞藥物憊搖順鉑、紫杉醇等均育放射增敏的潛能【4】；改變放療方案；使用三維綜合治療等。磷突表鶚，敷辮浚瘳過程不僅鼴A549纓藏增殪產生掠裁，瑟顯蠆叛鍵迸繡魏凋亡，腫瘤細胞過魔增生及凋亡不足為腫瘤發(fā)生的機制之～[51，因此，利用聯(lián)合化療藥物與鐓離輻射誘導A549綴駐糯亡班逡弱捧稍蹋您遘度灞蓬，裔望成為綜合治療的新途徑之一。本課磁以非小細胞肺腺癌細胞株A549的凋亡為研究對象，應用
3、32P對其進行內照射，j嚷鉑進行憂療。通過細鼴計數(shù)，MTT法計數(shù)、浚式纓瓤儀、透射電鏡及免疫細胞化學檢測等方法，就輻射后A549細胞的活力改變、細胞凋亡率、纓鼴超微終麴改變及攘關基霆表達遴行了探討。主蒙疼容及續(xù)羆熱下：一、輻射荊量的計算：在成用6射線放射性核素進行貼壁培養(yǎng)細胞A549照射轎究簿，培養(yǎng)綴麓吸枝翻薰靜詩簿主要參照：D=0．5×(％／0。693)加(1呻∞^693田)￡慨Bi)1．6×10"13／(p。v)，采瘸上述公式作為綴牧裁蠢的佶算，因為該公式使期簡便，可靠性強，與MIRD方案計算結果基本～致。同
4、時，經放射性核素的細胞代謝排斥實驗證實，應用穩(wěn)定性同位素(光菌PBs磷酸緩沖渡)終放射牲核索鮑載髂，可以競爭經捧裁藏射毪核素32P摻入爨綴胞內參與代謝，可以用這種方法來模擬細胞所受近躐離照射。二、矮鑲及3冷鼴A549纓藤橡懿存滔褰及縮藏凋亡率豹影確。探討A549細胞株在接受p一射線放射性核素32P照射以及化療藥物順鉑作用時，以臺盤黻排上海第二醫(yī)科大學碩士學位論文中文摘要斥實驗、MTT法觀察其量效關系。本實驗應用了”P進行不同劑量的內輻射，不同劑量的順鉑以及二者聯(lián)合作用進行研究。結果表明：應用臺盤藍排斥實驗和MTT
5、法進行細胞存活的檢測，二者的結果完全一致，即隨著”P輻射劑量和化療藥物順鉑劑量的增加，A549細胞存活明顯下降，而且應用不同兩種方法其變化趨勢完全一致，聯(lián)合應用的存活衄線左移，同時低劑量率輻射15uCi／mt，對細胞的致死性損傷作用不明顯，細胞存活率、流式細胞術分析的細胞凋亡率僅輕微變化，但可能引起細胞的增殖死亡，即該細胞照射后不會立即死亡，但細胞最終喪失分裂能力。順鉑具有輻射增敏作用，即當僅能部分抑制A549細胞增殖的低劑量輻射15uCi／ml與順鉑2．5ug／ml聯(lián)合應用時，細胞存活率顯著下降，細胞凋亡率上升
6、，而且在低劑量內輻射聯(lián)合應用較低的治療劑量順鉑時，可達到與單獨使用高劑量的內輻射相當?shù)闹委熜Ч?，從而在不影響治療效果的前提下，有效的減低了輻射劑量的使用，如此便可顯著減少毒副作用的影響，利于在實際當中的應用。三、聯(lián)合應用對A549細胞株凋亡相關基因表達及細胞超微結構改變的影響。為了進一步了解A549細胞凋亡發(fā)生的分子生物學機制，應用免疫組織化學法檢測P53,bcl-2，bax基因輻射前后的表達，以及通過透射電子顯微鏡觀察細胞超微結構的改變和細胞凋亡的形態(tài)特征。實驗顯示：13-輻射誘導A549細胞凋亡過程中上述基因
7、參與調控，表現(xiàn)為P53及bax表達顯著上調，而bcl-2／bax比值明顯下調。低劑量輻射2．52Gy聯(lián)合2．5ug／rnl順鉑組，電鏡下細胞超微結構嚴重破壞，線粒體明顯腫脹、嵴斷裂或呈空泡狀，染色質邊緣化，核濃縮或碎裂，大量細胞呈典型凋亡改變，甚至碎裂壞死；流式細胞術檢測細胞凋亡率明顯上升。因此，聯(lián)合應用低劑量順鉑2．5gteCml和低劑量輻射2．52c-y時，既能顯著促進腫瘤細胞凋亡的發(fā)生，又能有效降低二者的劑量和減少治療對患者的毒副作用，為臨床綜合治療肺癌提供了一種理想的方法，而其機理仍需要進一步深入研究。[
8、關鍵詞】細胞凋亡A549細胞放射治療化學治療上海第二醫(yī)科大學碩士學位論文莢文摘要TheexperimentresearchofinfluenceinradiotherapycombinewiththechemotherapytothelungcancercellapoptosisLungcancerhasbecomethemajorreasonofcancerdeathi
