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《抗煙草花葉病毒天然產(chǎn)物篩選及其作用機制初步研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、ScreeningofAnti-·TMVSubstanceandItsInhibitingMechanismonTMVADissertationSubmittedasFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterByZhenxingYangSupervisedbyZhongkaiZhangSchoolofLifeScienceYtmnanUniversityKunming650091ChinaMay2013獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特別加以標注和致謝的地
2、方外，論文中不包含其他人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，對本文的研究做出貢獻的集體和個人均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名：燃日期：2芝堡笙壟絲，礦論文使用和授權說明本人完全了解云南大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即：學校有權保留并向國家有關部門或機構送交學位論文和論文電子版；允許論文被查閱或借閱；學?？梢怨颊撐牡娜炕虿糠謨?nèi)容，可以采用影印、縮印或其他復制手段保存論文。(保密的論文在解密后應遵循此規(guī)定)研究生簽名：—終址導師簽名：種日本人及導師同意將學位論文提交至清華大學“中國學術期刊(光盤版)電子雜志社”進行電子和網(wǎng)絡出版，并編入CNKI
3、系列數(shù)據(jù)庫，傳播本學位論文的全部或部分內(nèi)容，同意按《中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫出版章程》規(guī)定享受相關權益。研究生簽名：——導師簽名：——日期：抗煙草花葉病毒天然產(chǎn)物篩選及其作用機制初步研究摘要植物病毒是危害農(nóng)作物的一類重要病原，因其危害大、防治困難、素有“植物癌癥”之稱。近年來，國內(nèi)外有關抗病毒天然產(chǎn)物的研究日益增多，從中篩選出有效成分已成為當前抗病毒新藥研究的一個熱點，但由于植物病毒對植物細胞的寄生性，病毒能夠脅迫寄主細胞的生化機理，所以藥物難以對病毒進行選擇性攻擊而不傷害宿主細胞，導致研究高選擇性的化學抗病毒制劑面臨極大的困難，至今仍未取得重大突破。本論
4、文以迄今煙草花葉病毒(Tobaccomosaicvirus，n爪，)為靶標病毒，首先用先施用化合物再接種病毒及化合物和病毒混合接種兩種處理方式，在心葉煙上通過半葉枯斑法篩選有活性的抗病毒化合物。發(fā)現(xiàn)化合物A1、A3、A4、D4、D6在兩種處理方式下均對抑制病毒有較好活性，抑制率在35％．55％之間；而化合物A2、C1、C2、D2在先施用化合物再接種病毒處理方式下對抑制病毒有較好活性；化合物B1、B2、B3、B5、C3、C4、C5、D1、D5在混合接種處理方式下對抑制病毒有較好活性。為了進一步明確化合物對病毒外殼表達的影響，在TMV專性寄主普通煙K326上對活性化合
5、物進行抑制TMV的研究。首先進行葉圓片試驗，結果表明在半葉枯斑法中抑制病毒有較好活性的化合物A1、A3、A4，其抑制病毒在體內(nèi)增殖的活性有所下降，化合物B1、B5、B3對抑制病毒體內(nèi)增殖活性降幅較大，說明這些化合物對病毒的作用機理可能是和病毒混合后使病毒鈍化失去活性。最后在活體植株上用化合物A1、A3進行抗TMV增殖試驗，Westernblot檢測表明兩種化合物均能抑制TMV外殼蛋白在植物體內(nèi)的表達，且和化合物濃度顯現(xiàn)相關性。本文還對TMV在寄主植物體內(nèi)復制周期進行了初步的研究，發(fā)現(xiàn)在接種TMV的葉片中病毒在2．5天之間大量復制；對于未接種TMV的新葉，在處理后的
6、3-6天之間病毒大量復制。同時用AHO(3．丙酮基．3．羥基羥吲哚)，跟抗病毒藥劑寧南霉素、幾丁聚糖進行了抗病毒活性對比試驗，水處理作對照，發(fā)現(xiàn)3天后AHO處理組植株中病毒增殖較慢，5天后有所上升但也比另兩個處理組低。關鍵詞：煙草花葉病毒；普通煙；抗病毒化合物；抑制率抗煙草花葉病毒天然產(chǎn)物篩選及其作用機制初步研究AbstractPlantvirusesareimportantpathogensofmanycrops．Theyarecalled”plantcancer”becauseofseriousdamagescausedanddi伍cultiesofpreve
7、ntion．Inrecentyears．studiesofanti-viralnaturalproductsareincreased，andscreeninge伍cacious．compoundforanti-virusdrugsbecomeahottopic．However,duetothedependenceofvirustohostplantcellsandthestresscausedbyviruseson也ebiochemicalmechanismof也ehostcells．itisverydi伍culttoinhibitorvirusselective
8、lywit
