資源描述：
《富集孕婦外周血中胎兒細胞行胎兒性別診斷》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、富集孕婦外周血中胎兒細胞行胎兒性別診斷中華婦產(chǎn)科雜志1998年第2期第33卷論著作者：宋杰 李守柔 張愛臣 黃冰玉 何為公 龐傳超單位：130041長春，白求恩醫(yī)科大學第二臨床學院婦產(chǎn)科關鍵詞：性決定；產(chǎn)前診斷；聚合酶鏈反應 【摘要】 目的 探討對孕婦外周血中胎兒細胞進行非侵入性產(chǎn)前診斷的可行性。方法 對64例孕8～40周孕婦外周血進行密度梯度離心法，富集胎兒細胞，并經(jīng)顯微鏡下觀察計數(shù)各種細胞所占百分比。同時，對所富集細胞經(jīng)提取DNA進行人Y染色體特異DNA擴增，判定胎兒性別并與新生兒性別進行對照。結(jié)果 64例孕婦外周血中，25例
2、觀察到有核紅細胞，占39.06%。64例孕婦分娩33例男性嬰兒，其中28例擴增出Y特異帶；另外31例分娩女性嬰兒，除1例出現(xiàn)Y特異帶，其余未見特異帶。診斷的靈敏度為84.85%，特異度為96.77%，總符合率為90.63%。結(jié)論 密度梯度離心法可從孕婦血中富集胎兒細胞，且所獲得細胞已基本滿足體外擴增Y染色體基因所需要的模板量?！ etectionandEnrichmentofFetalCellsinMaternalCirculationforPrenatalDiagnosisofFetalSex SongJie,LiShouro
3、u,ZhangAichen,etal.SecondClinicalHospital,NormanBethuneUniversityofMedicalScience,Changchun130041 【Abstract】 Objective Tostudyfetalcellsfrommaternalperipheralbloodforprenataldiagnosisoffetalsex.Methods Samplesofperipheralbloodin64womenof8～40gestationalweekswerecollect
4、edtoenrichthefetalnucleatedredbloodcellsbydensitygradientcentrifugation.DNAwasextractedfromeachsamplesofenrichedfetalcellforPCRamplificationofYchromosomespecificDNAtodeterminefetalsex.Results Fetalnucleatedredcellswerefoundin25outof64maternalsamples(39.06%).Ychromosome
5、149bpwasfoundin28casesofthe33mothersgivenbirthtomalebabies.OneYspecificDNAsequencewasdetectedin31womenhadfemalebabies.Thesensitivitywas84.85%andspecificity96.77%.Theoverallagreementofthediagnosiswas90.63%.Conclusion Densitygradientcentrifugationcanenrichfetalnucleatedr
6、edbloodcellsfrommaternalperipheralblood.FetalsexcanbedeterminedbyPCRamplificationofYchromosomespecificDNAwiththesefetalcells. 【Keywords】 Sexdetermination Prenataldiagnosis Polymerasechainreaction 胎兒細胞存在于孕婦血循環(huán)內(nèi)已被許多學者證實［1～3］，但數(shù)量極少且在不同孕周及不同個體之間存在很大差異。胎兒細胞包括胎兒有核紅細胞、胎兒淋
7、巴細胞、胎兒滋養(yǎng)細胞。如何對上述細胞加以富集、分離并進行胎兒基因診斷，是目前產(chǎn)前診斷研究的一個熱點。國外學者大多利用各種胎兒細胞表面特異抗原的單克隆抗體，經(jīng)流式細胞計數(shù)儀分離純化胎兒細胞［4，5］，但價格昂貴，技術(shù)復雜，不適合臨床一般實驗條件下開展此項研究工作。為了探討利用孕婦血中胎兒細胞進行產(chǎn)前診斷的可能性，建立無創(chuàng)傷性且準確可靠的產(chǎn)前診斷新途徑，我們設計了密度梯度離心法富集孕婦血中胎兒細胞，并經(jīng)顯微鏡下觀察，證實了孕婦血中胎兒細胞的存在，用聚合酶鏈反應(PCR)擴增Y染色體特異DNA序列進行胎兒性別判定?，F(xiàn)將結(jié)果報道如下。資料與
8、方法 一、標本來源 外周血采自孕齡為8～40周的妊娠婦女，共64例，均為第一次妊娠，無貧血等合并癥。每次采血為10ml，放入盛有2ml0.1%肝素的無菌瓶中，并用磷酸鹽緩沖液(PBS)行1∶1稀釋后混合備用?！ 《⒎椒ā ?.密
