實(shí)驗(yàn)1果蠅形態(tài)觀察

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1、實(shí)驗(yàn)一果蠅的性狀觀察和飼養(yǎng)管理一、目的和要求了解果蠅的生活習(xí)慣，掌握果蠅飼養(yǎng)管理的方法，學(xué)習(xí)鑒定果蠅的雌雄性別和某些遺傳性狀。二、預(yù)備知識(shí)果蠅（fruitfly，vinegarfly），廣泛存在于全球溫帶及熱帶氣候區(qū)，且由于其主食為腐爛水果，在人類的棲息地如果園、菜市場(chǎng)等地皆可見其蹤跡。目前已發(fā)現(xiàn)1000多種果蠅，果蠅以酵母菌為主要食料，能發(fā)酵的水果或植物基質(zhì)，都可用作果蠅的飼料。黑腹果蠅(Drosophila)：雙翅目，果蠅屬。特點(diǎn)：生活史短，每12天左右即可完成一個(gè)世代；飼養(yǎng)容易，以玉米粉等做飼

2、料就可以生長(zhǎng)繁殖；繁殖能力強(qiáng)，每只受精的雌蠅可以產(chǎn)卵500個(gè)左右；突變型多，突變性狀多，多數(shù)是形態(tài)變異，容易觀察；染色體少、個(gè)體小，是一種很好的遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)材料，是一種模式生物。1908年，遺傳學(xué)家摩爾根把它帶上了遺傳學(xué)研究的歷史舞臺(tái)，約在此后30年的時(shí)間中，果蠅成為經(jīng)典遺傳學(xué)的“主角”。Morgan(1866-1945)摩爾根提出了基因在染色體上直線排列以及連鎖交換定律，并于1933年被授予諾貝爾獎(jiǎng)。1946年，摩爾根的學(xué)生，被譽(yù)為“果蠅的突變大師”的米勒，證明X射線能使果蠅的突變率提高150倍，因

3、而成為諾貝爾獎(jiǎng)獲得者。在近代發(fā)育生物學(xué)研究領(lǐng)域中，果蠅的發(fā)生遺傳學(xué)獨(dú)領(lǐng)風(fēng)騷。1995年，諾貝爾獎(jiǎng)再次授予三位在果蠅研究中辛勤耕耘的科學(xué)家。果蠅的生活史1.卵2.一齡幼蟲3.二齡幼蟲4.三齡幼蟲5.蛹6.成蟲25℃時(shí)，從卵至成蠅需10天左右。果蠅是完全變態(tài)昆蟲，生活周期可分為4個(gè)時(shí)期：卵、幼蟲、蛹和成蟲。最適培養(yǎng)溫度20～25℃，溫度越高，生長(zhǎng)越快，但高于30℃不育甚至死亡。卵：白色，橢圓形，長(zhǎng)約0.5mm，前端背面伸出一觸絲，附著在食物上。幼蟲：一齡——二齡——三齡，三齡體長(zhǎng)4-5mm，幼蟲頭尖尾鈍

4、，頭上有一黑色鉤狀口器。蛹：化蛹前三齡幼蟲停止攝食，爬到相對(duì)干燥的瓶壁上，形成菱形的蛹，形狀由淡黃、柔軟逐漸硬化為深褐色。成蟲：剛羽化的果蠅蟲體較肥大，體表呈半透明，顏色逐漸加深，硬化。三、實(shí)驗(yàn)材料野生型果蠅及幾種常見的突變型果蠅。四、實(shí)驗(yàn)器具和藥品試劑培養(yǎng)箱、鑷子、搪瓷杯、電爐、高壓滅菌器、培養(yǎng)瓶、棉花塞、燒杯、玻棒、濾紙、酒精棉球、解剖鏡、毛筆、麻醉瓶、白瓷板。乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、瓊脂、玉米粉、白糖。果蠅培養(yǎng)基配制清潔指管，蓋上適當(dāng)大小的棉塞，置高壓滅菌鍋內(nèi)，以121℃，1.5大氣壓消毒1

5、5分鐘，冷卻備用。按配方稱取培養(yǎng)基各組分。先取一半水加入瓊脂于電磁爐上加熱溶解，再加入蔗糖煮沸。取剩余的水將玉米粉調(diào)成糊狀邊攪拌邊加入到瓊脂糖溶液中，煮沸。待稍冷后加入酵母粉和丙酸，充分調(diào)勻、分裝（20ml/管）。果蠅培養(yǎng)基配方玉米粉11.2克蔗糖8.9克干燥酵母粉1克瓊脂1克水100毫升添加0.8ml丙酸作為防腐劑搬移果蠅至新培養(yǎng)瓶或麻醉瓶取新培養(yǎng)瓶一瓶，將棉塞略為松動(dòng)，放置于右手側(cè)，取欲轉(zhuǎn)移之果蠅培養(yǎng)瓶置于左手側(cè)，以左手握住瓶頸，兩指輕扣棉塞頂部，以右手輕拍瓶底使果蠅掉落于培養(yǎng)基表面，將培養(yǎng)瓶置

6、于左手側(cè)，拔起棉塞以左手兩指夾住棉塞外端，再將置于右手側(cè)之新培養(yǎng)瓶棉塞拔起，以右手兩指夾住棉塞外端，再以右手將新培養(yǎng)瓶倒扣于舊培養(yǎng)瓶上，再以左手握住兩瓶口相接處，翻轉(zhuǎn)使新培養(yǎng)瓶位于下方，然后以右手掌心輕拍新培養(yǎng)瓶瓶底，使果蠅掉落于新培養(yǎng)瓶瓶底，然后迅速蓋上各瓶棉塞。果蠅操作方法果蠅操作方法果蠅可用乙醚麻醉，以方便實(shí)驗(yàn)操作。麻醉方法：取一麻醉瓶，瓶口應(yīng)與培養(yǎng)瓶大小相仿，使兩瓶口相對(duì)，培養(yǎng)瓶在上，用手拍擊培養(yǎng)瓶，使果蠅落入麻醉瓶?jī)?nèi)，迅速蓋上棉塞，滴加3滴乙醚于小管口中的棉花上，約一分鐘左右果蠅倒臥于瓶底

7、，即可將果蠅倒出進(jìn)行操作。注意：過度麻醉將導(dǎo)致果蠅死亡。如果果蠅的翅膀與身體呈45度角翹起，表明麻醉過度，不能復(fù)蘇。果蠅觀察、計(jì)數(shù)取白瓷板平置于桌面，將麻醉的果蠅倒于白瓷板上，解剖鏡或低倍顯微鏡下進(jìn)行性狀觀察，并將雌雄果蠅分開放置。接種觀察過的果蠅（2-3對(duì)）到新配置的培養(yǎng)瓶中，為避免麻醉的果蠅直接掉落于培養(yǎng)基表面而粘著于培養(yǎng)基表面致死，先將培養(yǎng)瓶橫放，將麻醉的果蠅用毛筆轉(zhuǎn)移到瓶壁，待其蘇醒后再將培養(yǎng)瓶正立。果蠅操作方法再麻醉觀察或計(jì)數(shù)過程中，果蠅可能蘇醒，可準(zhǔn)備一玻璃培養(yǎng)皿，內(nèi)以膠帶貼一小塊棉球，

8、滴入適量乙醚，培養(yǎng)皿口朝下置于一旁備用，如見果蠅翻身走動(dòng)可將培養(yǎng)皿口朝下，蓋于果蠅上方待其麻醉后再移開。果蠅形態(tài)觀察果蠅具有豐富的外表形態(tài)差異，包括眼色、眼形、翅形，剛毛形狀與數(shù)目等。進(jìn)行果蠅雜交實(shí)驗(yàn)時(shí)必須區(qū)分性別，務(wù)必熟悉雌雄果蠅的差異。雌雄果蠅主要特征雌果蠅個(gè)體較大腹部末端較尖腹部背面有五條黑條紋腹部腹面有6個(gè)腹片無性梳雄果蠅個(gè)體較小腹部末端較鈍腹部背面有三條黑條紋，最后一條極寬，并延伸到腹面腹部腹面有4個(gè)腹片前腿跗節(jié)上有性梳果蠅雌雄外形判別（體形大小）雌雄腹部體