磁珠法細(xì)菌DNA提取試劑盒

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1、TMMagDNA磁珠細(xì)菌DNA提取試劑盒(磁珠型)適合：G+,G-細(xì)菌，酵母，真菌，乳酸菌，霉菌等Cat.#504001（50preps）504002（100preps）504003（200preps）Note:forlaboratoryresearchuseonly.TMMagDNA磁珠細(xì)菌DNA提取試劑盒(磁珠型)?適用范圍：適用于手動(dòng)快速提取各種細(xì)菌基因組DNA，無(wú)需蛋白酶消化，也適用于SPRI-TE；雅培m2000；MagNAPureLC2.0System；BioRobotMDxWorkstation；KingFisher（ml)；KingFisher96proc

2、ess，ABIgenMagstation等系列核酸提取儀，適合大規(guī)模提??！?試劑盒組成、儲(chǔ)存、穩(wěn)定性：試劑盒組成保存50次100次200次LysisBufferA室溫25ml50ml100mlSolutionAB室溫12ml22ml44mlBindingBufferPQ室溫25ml50ml100ml15ml30ml60mlWashBufferB室溫第一次使用前按說(shuō)明加指定量乙醇10ml20ml30mlWashBufferC室溫第一次使用前按說(shuō)明加指定量乙醇（3倍）10ml20ml30mlWashBufferD室溫第一次使用前按說(shuō)明加指定量乙醇（3倍）ElutionBuff

3、erE室溫10ml15ml25mlMagDNA磁珠室溫1.2ml1.2mlX21.2mlX4本試劑盒在室溫儲(chǔ)存12個(gè)月不影響使用效果。儲(chǔ)存事項(xiàng):1.LysisBufferA或者WashBufferB低溫時(shí)可能出現(xiàn)析出和沉淀，可以在37℃水浴幾分鐘幫助重新溶解，恢復(fù)澄清透明后冷卻到室溫即可使用。2.避免試劑長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中發(fā)生揮發(fā)、氧化、pH值變化，各溶液使用后應(yīng)及時(shí)蓋緊蓋子。3.加入MagDNA磁珠前，請(qǐng)漩渦混勻，以免影響濃度的均一性。-1-?產(chǎn)品介紹：本試劑盒采用國(guó)內(nèi)領(lǐng)先的專利技術(shù)合成的高度分散均一的納米磁珠顆粒，表面修飾高效核酸結(jié)合基團(tuán)，能最大限度的吸附DNA和RN

4、A，博凌科為經(jīng)過(guò)多次實(shí)驗(yàn)優(yōu)化緩沖液體系，開(kāi)發(fā)出一系列高效核酸純化試劑盒。獨(dú)特的裂解液迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶，然后基因組DNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于MagDNA?D-BeadsDNA磁珠，再通過(guò)一系列快速的漂洗除雜的步驟，將細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除，最后低鹽高pH值的洗脫緩沖液將純凈基因組DNA從磁珠上洗脫。適合多種核酸純化儀器，可以實(shí)現(xiàn)核酸的自動(dòng)化快速分離。為您的科研工作帶來(lái)方便！?產(chǎn)品特點(diǎn)：1.不需要使用有毒的苯酚等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。2.快速，簡(jiǎn)捷，單個(gè)樣品操作一般可在30分鐘內(nèi)完成。3.多次漂洗確保高純度，典型的產(chǎn)量200μl全血可提取出5

5、-15μg，OD260/OD280典型的比值達(dá)1.7～1.9，長(zhǎng)度可達(dá)30kb-50kb，可直接用于PCR、Southern-blot和各種酶切反應(yīng)。4.一般加入結(jié)合液和磁珠，由于DNA濃度較大會(huì)析出，會(huì)和磁珠纏繞在一起，形成一團(tuán)黑色螺旋裝物質(zhì)，請(qǐng)緩慢顛倒，團(tuán)狀即是DNA和磁珠的復(fù)合體。5.洗脫液ElutionBufferE不含有螯合劑EDTA，不影響下游酶切、連接等反應(yīng)。也可以使用水洗脫，但應(yīng)該確保批pH大于8.5，pH過(guò)低影響洗脫效率。用水洗脫DNA應(yīng)該保存在－20℃。DNA如果需要長(zhǎng)期保存，可以用TE緩沖液洗脫（30mMTris-HCl，1mMEDTA，pH8.5）

6、，但是EDTA可能影響下游酶切反應(yīng)，使用時(shí)可以適當(dāng)稀釋。?注意事項(xiàng)：1.需要自備異丙醇和無(wú)水乙醇。2.開(kāi)始實(shí)驗(yàn)前將需要的水浴先預(yù)熱到70℃?zhèn)溆谩?2-?操作步驟：（實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)先閱讀注意事項(xiàng)）提示：第一次使用前請(qǐng)先在WashBufferB/C/D中加入指定量無(wú)水乙醇，充分混勻，加入后請(qǐng)及時(shí)在方框打鉤標(biāo)記已加入乙醇，以免多次加入!1.收集1毫升過(guò)夜培養(yǎng)細(xì)菌加入1.5毫升離心管。可以觀察菌液濃度，自行調(diào)整菌體多少！2.9,000rpm離心30秒，使細(xì)胞沉淀下來(lái)，棄上清，渦旋或輕彈打散細(xì)胞沉淀。渦旋振蕩直到細(xì)胞團(tuán)充分重懸、分散。細(xì)胞的重懸分散對(duì)下一步裂解非常重要，細(xì)胞未打散就加入裂

7、解液，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞不能充分裂解，形成肉眼可見(jiàn)團(tuán)塊。3.加入350μlLysisBufferA重懸的細(xì)胞，上下吹打裂解細(xì)胞，或者劇烈渦旋10秒幫助裂解細(xì)胞，70℃水浴10min。4.可選步驟:在裂解物中加入RNaseA（10mg/ml）至終濃度10μg/ml，顛倒25次混勻，37℃溫育15分鐘去除殘留RNA，然后冷卻回室溫。5.加入冰冷的150μlSolutionAB后，在渦旋振蕩器上高速連續(xù)振蕩混勻25秒?；靹蚝罂赡芤?jiàn)到一些小的蛋白團(tuán)塊。6.12，000rpm(可根據(jù)需要調(diào)整加大離心力)離心5分鐘。這時(shí)候應(yīng)該可以見(jiàn)到管底暗褐色或