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《球孢白僵菌分生孢子乳懸劑的配方篩選》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、維普資訊http://www.cqvip.com第28卷第4期植物保護(hù)學(xué)報(bào)Ⅷ,28No.4200112月ACrAPIT,HYL^Ⅱ(SI~ICADee2001球孢白僵茵分生孢子乳懸劑的配方篩選應(yīng)盛華馮明光(浙江大學(xué)微生物研究所,杭州310029)摘要從6種常用的食品乳化劑中,篩選適合于球袍白僵茵(Beuatcr~bass/aaa)分生孢子粉使用的乳化劑。除單二甘醋外,其余5種乳化劑的乳化性能與孢子濃度呈正相關(guān)。除十二烷基硫酸鈉外,各種乳化劑均能與孢子極好地相吝。綜合乳化性、生物相吝性、濕潤力和其它理化特性,蔗糖脂肪酸酯S.1可作為白僵茵孢子粉較為理想的乳化劑,使用
2、濃度為02%。以0.3%的羧甲基纖維素鈉為穩(wěn)定劑和0.1%的抗壞血酸作為紫外線保護(hù)劑,能顯著提高袍子懸液在2h內(nèi)的穩(wěn)定性,并能較好地保護(hù)孢子免受紫外線損傷關(guān)鍵詞珠孢白僵茵,袍子乳懸劑,生物相吝性乳化劑,穩(wěn)定劑,紫外線保護(hù)劑球孢白僵菌(Beautcdahm)在害蟲的可持續(xù)控制和生態(tài)平衡的維護(hù)方面起著重要的作用,一直是國內(nèi)外生物防治的研究熱點(diǎn),在國外已被開發(fā)成多種商品制劑_]·。該菌在我國雖有多年的研究及應(yīng)用歷史,但迄今仍未有正式的商品制劑問世。其主要技術(shù)難點(diǎn)之一是尚未確定合適的白僵菌劑型l3J。在實(shí)際應(yīng)用中,白僵菌孢子粉劑的防蟲效果不夠穩(wěn)定L4j。由于乳懸劑以水作為
3、稀釋載體,近年白僵菌劑型有向乳懸劑或油劑方向發(fā)展的趨勢。在白僵菌乳懸劑研制中,篩選生物學(xué)相容的乳化劑至關(guān)重要。我國在用白僵菌孢子乳懸劑防治馬尾松毛蟲的實(shí)踐中,已研制出適于超低容量噴霧的乳化劑l4-。美國近年開發(fā)了以醇烷氧基化合物為乳化劑的白僵菌分生孢子乳懸劑_6j。為防止紫外線對白僵菌孢子的損傷J,常在菌劑中加入與孢子相容的保護(hù)劑J。作者通過篩選與球孢白僵菌孢子相容的乳化劑、穩(wěn)定劑及紫外線保護(hù)劑,為設(shè)計(jì)適合新型實(shí)用的白僵菌孢子乳懸劑配方提供科學(xué)依據(jù)。1材料與方法1.1材料乳化劑均為食品級,包括吐溫一8O(Tween-80)、聚甘油酯(polyglycvzolest
4、ersoffattyacid,PEFA)、單二甘酯(Ⅱ.oIanddi-glycefides,rC,DG)、十二烷基硫酸鈉(dodeeylsodiumsulfate,SDS)、蔗糖脂肪酸酯(~lleI136eeslersoffattyacids)S-1及s_ll;穩(wěn)定劑為羧甲基纖維素鈉(sodiuInearboxymethyleelhlose,cM一№)和海藻酸鈉(sodiumalginate,Atg.Na);紫外線保國家杰出青年科學(xué)基金(3952soo4)和國家自然科學(xué)基金(35g70513)資助。通訊作者(BⅡ:~a,g@ds日u.edum)維普資訊http:
5、//www.cqvip.com植物保護(hù)學(xué)報(bào)28卷護(hù)劑為對氨基苯甲酸(p-aminobenzoieacid,PAP,)、抗壞血酸(Vjta盯IfmC)、熒光素鈉(fluores—eeinscdium,F(xiàn)lu.Na)和茶多酚(teapolyphenols,1胛)。1.2乳化劑篩選①孢子密度測定:將高純度孢子粉配制的孢子懸液滴于血球計(jì)數(shù)板上,量出50個(gè)孢子的直徑。按1200億/g的含孢量計(jì)算出白僵菌分生孢子的密度。②乳化劑濕潤力測定:先將乳化劑配成0.05%、0.1%、0.2%和0.5%的溶液,分別吸取10于50的燒杯中。在500r/rain的磁力攪拌下,將l0嘩孢子粉
6、迅速倒人燒杯,繼續(xù)攪拌5s后,從懸液中部取樣測定孢子濃度,每濃度重復(fù)3次,以蒸餾水作對照。③懸浮穩(wěn)定性測定:用上述不同濃度的各種乳化劑溶液配制成lo9個(gè)孢子/ml的高濃度孢子懸液,分別取2ml加入比色杯(1cm×1cm×4.5cm),在752光柵紫外分光光度儀(上海精密科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn))的470【町J處(湯堅(jiān)等,1997),靜置0、3、5、l0、l5、30、45、60、9o及120min后記錄孢子懸液的吸光度。重復(fù)3次,以不加乳化劑的孢子水懸液作為對照。④乳化劑與孢子的相容性:用上述不同濃度的乳化劑溶液配制濃度為lo6個(gè)孢子/ml的懸液.分別在25±1℃下振蕩
7、(100r/m_m)培養(yǎng),24h后取樣計(jì)數(shù)培養(yǎng)液中萌發(fā)與未萌發(fā)的孢子數(shù),并計(jì)算孢子萌發(fā)率。重復(fù)3次,孢子水懸液作為對照1.3穩(wěn)定劑篩選按0.05%、0.10%、0.30%及0.50%的濃度將不同穩(wěn)定劑加人選出的0.2%S-1乳化劑溶液中,然后按前述方法分別測定加人穩(wěn)定劑后乳化劑的濕潤力、高濃度孢子懸液的穩(wěn)定性及穩(wěn)定劑與孢子的相容性。各穩(wěn)定劑每濃度重復(fù)3次,以不加穩(wěn)定劑的乳化劑溶液為對照。1.4紫外線保護(hù)劑篩選將孢子粉加入含0.2%S-1乳化劑和篩選而得的0.3%cM.Na穩(wěn)定劑溶液中,配成濃度為lo6個(gè)孢子/ml的孢子液。然后按0.05%、0.10%、0.15%及
8、0.20%