胸腺素α原在正常組織與腫瘤組織中的定位研究

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1、第54卷第4期廈門大學學報(自然科學版)Vo1.54NO.42015年7月JournalofXiamenUniversity(NaturalScience)Ju1.2Ol5胸腺素I】‘原在正常組織與腫瘤組織中的定位研究崔若辰,蔡報偉,蘇勁紅,胡鑫炎,孫雨涵,郭權,周克夫(廈門大學環(huán)境與生態(tài)學院,福建廈f136l102)摘要:檢測并分析胸腺素原(prothymosin,ProT)在小鼠正常肝組織與肝腫瘤組織中表達、分布的情況.取2o只昆明雄性小鼠隨機分為對照組和移植性肝癌模型組,每組1o只,模型組接種H。。肝癌組織,建立移植性肝癌模型.7d后將模型組肝癌組織和對照組正常肝的組織取出,部分組織按常

2、規(guī)石蠟包埋方法制片,免疫組織化學法分別檢測肝癌組織與正常肝組織中ProTa的表達分布情況;部分組織按提取胞質蛋白的方法獲得蛋白用于Western—blot分析.在Westernblot中,ProTa在肝癌組織細胞質的表達量明顯低于正常肝組織;在免疫組織化學法中,正常肝組織的細胞核呈陰性,胞質呈強陽性;而在肝癌組織中胞核呈強陽性,胞質呈弱陽性.ProTa在正常組織與腫瘤組織中的表達分布有明顯差異.由于在Western—blot中所提的蛋白主要為胞質蛋白,在癌變的組織中,ProTa主要集中在細胞核中,因此推測,當胞質中的ProTa大量表達時對于肝細胞穩(wěn)定、抑制細胞發(fā)生癌變有重要功能,此結果為進一步

3、研究ProT在腫瘤發(fā)生和診斷中的作用提供了重要的理論依據(jù).關鍵詞:胸腺素a原;H細胞株;肝癌;定位中圖分類號:R73文獻標志碼:A文章編號:0438—0479(2015)04—0474—04原發(fā)性肝癌(primaryhepaticcancer)簡稱肝癌,核轉移到胞質和胞外,由于ProT不能在核內積聚而是肝臟的惡性腫瘤,也是世界十大惡性腫瘤之一[1].削弱了其核內與增殖相關的功能,這種現(xiàn)象并不見于肝癌起病比較隱匿,早期癥狀不明顯,中期甚至部分正常細胞;而且,胞核和胞質定位的ProT~衍生物對晚期患者癥狀仍不明顯,一旦出現(xiàn)比較典型的癥狀,腫瘤壞死因子誘導的Hela細胞凋亡L6]均有抵抗作到醫(yī)院就診

4、已多屬晚期,錯過最佳治療時期.根據(jù)最用,所以,研究ProTa在癌變過程中的定位有助于揭新統(tǒng)計],全世界每年新發(fā)肝癌患者約78萬,居惡性示細胞癌變的發(fā)生機理.目前國內外有關移植性肝癌腫瘤的第五位,因此,揭示肝腫瘤的癌變機理以及早和正常肝組織中ProTa水平和定位的研究還未見報期診斷是目前醫(yī)學研究的熱點.道.我們應用本課題組克隆表達的重組人ProTal7制胸腺素0:原(prothymosina,ProTa)是一種天然備了多克隆抗體],采用Western—blot和免疫組織化無二級結構、強酸性小分子蛋白,其功能與細胞免疫學的方法對小鼠正常肝組織和腫瘤組織中的ProTa調節(jié)、細胞增殖l_3]、凋亡有著

5、密切關系.作為一種典型進行了分析,其結果將對研究ProTa在腫瘤發(fā)生和治的腫瘤相關蛋白,在細胞增殖和凋亡調控方面的深入療中的作用以及腫瘤臨床醫(yī)學的診斷預測有重要價值.研究有助于發(fā)現(xiàn)細胞癌變的發(fā)生機理,曾在多種癌癥中檢測到了ProT~水平的升高;這種在癌細胞中高水平的ProTa蛋白產(chǎn)物不僅維持細胞處于高度增殖1材料與方法狀態(tài),還保護細胞避免進入凋亡途徑.體外實驗,在凋亡過程中,ProT~被caspase一3切割而發(fā)生斷裂],導1.1材料致核定位信號遭到破壞,進而使斷裂的ProTa從細胞實驗動物:SPF級昆明小鼠2O只,雄性,質量22收稿日期:201409—22錄用日期:2Ol5一O211基金項目

6、:福建省自然科學基金(2013J01383)*通信作者:zhkefu@xmu.edu.cn引文格式:崔若辰,蔡報偉,蘇勁紅,等.胸腺素a原在正常組織與腫瘤組織中的定位研究[J].廈門大學學報:自然科學版,2ol554(4):474—477.Citation:CuiRuochen,CaiBaowei,SuJinhong,eta1.Studyonthelocalizationofprothymosindinnormalandtumortissues[J~JournalofXiamenUniversity:NaturalScience,2015,54(4):474~477.(inChinese)ht

7、tp×}xleduCtl第4期崔若辰等:胸腺素“原在正常組織與腫瘤組織中的定位研究-30g,6-8周齡,購自廈門大學實驗動物中心,置于化物酶)各10min并洗片后就可以進行染色;用新制溫度20℃左右,濕度65左右的室內,以普通小鼠飼備好的DAB試劑進行顯色,蘇木精復染,梯度脫水及料喂養(yǎng).透明后,用中性樹脂進行封片.肝癌細胞株:小鼠H腹水型肝癌細胞株由廈門1.2.4HE染色法檢測肝組織的形態(tài)結構大學

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