基于分枝菌酸分析法鑒定分枝桿菌臨床株

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1、．4o．中閨防瘩攣志2011年1月第33卷第1期Eg]陳獻(xiàn)雄，楊倩婷，徐六妹，朱秀云，廖明風(fēng)，陳心眷．采用于擾素釋放反應(yīng)試驗(yàn)和PPD皮試對(duì)深圳市高校學(xué)生結(jié)核分枝桿菌潛伏感染篩查的研究[J]．臨床肺科雜志，2009，14(6)：737738．[10]HougardyJM，SchepersK，PlaceS，DrowartA，LechevinV，VerseheureV，DebrieAS，DohertyTM，VanVoorenjp，LochtC，MascartF．Heparin—bindinghemagglutinininducedIFN—gammareleaseasadiagnosti

2、ctoolforlatenttuberculosis[J]．PLoSOne，2007，3；2(1O)：e926．[11]LalvaniA，PathanAA，DurkanI{，WilkinsonKA，WhelanA，DeeksJJ，ReeceWH，LalifM，PasvolG，Hil1AV．En—hancedcontacttracingandspatialtrackingofMycobacterium￡-berculosisinfectionbyenumerationofantigen～specificTcellsEJ]．Lancet，2001，357(9273)：2017—202

3、1．(收稿日期：2010—09—30)[12]TanLH，Kamarulzaman．Preventingtuberculosisinhealthcare(本文編輯：范永德)·短篇論著·基于分枝菌酸分析法鑒定分枝桿菌臨床株～計(jì)一一_星王巨～m存～lHw北一n～趙一m鳳，～S儀一¨～一李一國(guó)利。王海英。景輝。王學(xué)謙白人驍陸蕓趙文君(1．天津市天津醫(yī)院天津300211；2．解放軍總醫(yī)院第二附屬醫(yī)院結(jié)核病研究所北京100091；3．山東省胸科醫(yī)院漢光國(guó)際感染性疾病研究中心濟(jì)南250013)非結(jié)核分枝桿菌(NTM)病具有與結(jié)核病臨床院漢光國(guó)際感染性疾病研究中心提供；18株由北京表現(xiàn)相似的全

4、身中毒癥狀和局部損害，在無(wú)菌種鑒市結(jié)核病胸部腫瘤研究所提供；25株由解放軍總醫(yī)定的情況下，與結(jié)核病難以區(qū)別。NTM與TB對(duì)抗院第二附屬醫(yī)院分枝桿菌專業(yè)實(shí)驗(yàn)室提供；23株由結(jié)核藥物的敏感性大不相同，不同的NTM對(duì)藥物天津市疾病預(yù)防控制中心結(jié)核病控制中心提供。儀的敏感性也不相同，根據(jù)不同菌種化療方案應(yīng)有所器與試劑同文獻(xiàn)心。不同[。因此，分枝桿菌菌種鑒定不僅在流行病學(xué)1．2實(shí)驗(yàn)方法，上，而～一且在～臨床～一診一斷一和治一療一上一均一有重要意義。本實(shí)1．2．1菌株的培養(yǎng)、分枝菌酸樣品的制備和色譜條驗(yàn)室建立了具有自己技術(shù)特點(diǎn)的～分枝菌酸(Mycolic件同文獻(xiàn)]。acids，MA)分析方法

5、]，構(gòu)建了50種分枝桿菌標(biāo)1．2．2鑒定步驟與依據(jù)第一步根據(jù)分離株譜峰準(zhǔn)菌株的MA指紋譜庫(kù)，特別是解決了文獻(xiàn)未能的族數(shù)進(jìn)行分類，確定單、雙、三族峰型。第二步根區(qū)分的8種分枝桿菌的種問(wèn)鑒定問(wèn)題。用該方法鑒據(jù)分離株圖譜的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰高特征與相定分枝桿菌臨床分離株國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)報(bào)道，為此我們應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)圖譜比對(duì)，最相似的標(biāo)準(zhǔn)圖譜所代表標(biāo)準(zhǔn)做了初步研究。菌株即為初步鑒定結(jié)果；第三步同時(shí)測(cè)定相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)菌株樣品，如二者圖形基本一致，得最終鑒定結(jié)果。l材料和方法在所涉及的l9種分枝桿菌中，膿腫分枝桿菌指紋圖1．1材料標(biāo)準(zhǔn)菌株：分枝桿菌標(biāo)準(zhǔn)株來(lái)源于譜在6～16min之間、偶然分枝桿菌指紋圖譜在5～

6、ATCC且由中國(guó)藥品生物制品檢定所分枝桿菌專16min之間、恥垢分枝桿菌指紋圖譜在4．5～業(yè)實(shí)驗(yàn)室提供。臨床分離株：26株由山東省胸科醫(yī)12min的圖譜是穩(wěn)定的，供比對(duì)用?；痦?xiàng)目：天津市應(yīng)用基礎(chǔ)研究計(jì)劃面上項(xiàng)目(O7JCYBJCo87oo)通訊作者：王巨存E—mail：wanucun2o0O@yahoo．Corn．cn中l(wèi)習(xí)防瘩梟恚2011年1月第33卷第1期·41·一●●●●●●=一=～牛分枝桿菌蟾蜍分枝桿菌jI戈登分枝桿菌堪薩斯分枝桿菌偶然分枝桿菌鳥(niǎo)分枝桿菌胞內(nèi)分枝桿菌瘰疬分枝桿菌愛(ài)知分枝桿菌一不產(chǎn)色分枝桿菌恥垢分枝桿菌副偶然分枝桿菌海分枝桿菌金色分枝桿菌淺黃分枝桿菌新金色

7、分枝桿菌圖1分枝桿菌分枝菌酸指紋圖譜(a為標(biāo)準(zhǔn)株圖譜b為臨床分離株圖譜Is為內(nèi)標(biāo))中l(wèi)習(xí)坊痔梟志2011年1月第33卷第1期指紋圖譜是基本一致的，92個(gè)臨床分離株都鑒定到2結(jié)果種，其中包括鳥(niǎo)和胞內(nèi)分枝桿菌。Joseph等采用山東省胸科醫(yī)院提供的臨床分離株，經(jīng)16SHPLC方法分析了3107個(gè)臨床分離株，經(jīng)與標(biāo)準(zhǔn)rRNA基因測(cè)序鑒定為胞內(nèi)(16株)、膿腫(3株)、戈株圖譜比對(duì)，99．5的臨床分離株得到鑒定，但登(2株)、瘰疬(1株)、偶然(1株)、堪薩斯(1株)、土MAC不能區(qū)分。