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1、無(wú)隔膜電解水應(yīng)用於蝴蝶蘭主要病原菌活性抑制之探討王奕程、康世緯、方煒國(guó)立臺(tái)灣大學(xué)生物產(chǎn)業(yè)機(jī)電工程所摘要肇因於細(xì)菌及真菌感染引致之植物病害問(wèn)題，向來(lái)為蘭花產(chǎn)業(yè)發(fā)展之重大限制因素，如能兼顧成本、環(huán)保及高效之病害防治技術(shù)自有高度研究?jī)r(jià)值。本研究以無(wú)隔膜電解水抑菌為基礎(chǔ)，針對(duì)白絹病、灰黴病、疫病、細(xì)菌性軟腐病、黃葉病等蝴蝶蘭主要微生物致病原，探討其活性抑制效力與操作參數(shù)。現(xiàn)有成果證實(shí)自由氯濃度200ppm的無(wú)隔膜電解水，對(duì)於上述五種致病原皆有抑制菌絲生長(zhǎng)、孢子發(fā)芽及細(xì)菌存活之效果。未來(lái)可望應(yīng)用於相關(guān)產(chǎn)業(yè)之競(jìng)爭(zhēng)力提升。關(guān)鍵詞：蘭花病原菌、無(wú)隔膜電解水、蘭花滅菌且操作與製備成
2、本經(jīng)濟(jì)之特性，因而廣泛被應(yīng)1.緒論用於醫(yī)療衛(wèi)生、食品衛(wèi)生、空氣滅菌、農(nóng)、漁、牧產(chǎn)業(yè)等多種領(lǐng)域。2006年臺(tái)灣蘭花出口金額約達(dá)4300萬(wàn)美電解水應(yīng)用在滅菌領(lǐng)域之相關(guān)基礎(chǔ)研究元。而蝴蝶蘭更是行政院農(nóng)委會(huì)所選定的四大與設(shè)備研發(fā)雖然已行之有年，而現(xiàn)有相關(guān)的研外銷(xiāo)旗艦農(nóng)產(chǎn)品之一，每年可創(chuàng)造約新臺(tái)幣二究大多以具隔膜的電解設(shè)備為主。含隔膜的電十億元的商機(jī)。蘭花相關(guān)病害之防治與管理，解水設(shè)備，雖然產(chǎn)製之電解水滅菌能力佳，但則是影響蘭花產(chǎn)業(yè)發(fā)展之關(guān)鍵因素。受限於設(shè)備成本較為昂貴，且陽(yáng)極側(cè)產(chǎn)生的電蘭花的病害，從細(xì)菌、真菌到病毒皆有，解水酸鹼值較低，具有保存不易和容易腐蝕管例如：白絹病
3、、灰黴病、疫病、細(xì)菌性軟腐病、路等缺點(diǎn)。黃葉病等等。其中又以細(xì)菌性軟腐病和黃葉病故本研究的目標(biāo)為經(jīng)由無(wú)隔膜的電解設(shè)最為嚴(yán)重。而傳統(tǒng)上針對(duì)上述病原菌採(cǎi)取的對(duì)備設(shè)計(jì)，製備出能夠針對(duì)蘭花相關(guān)菌種具備滅策通常為採(cǎi)用物理滅菌法：熱力滅菌。和化學(xué)菌效果之電解水，同時(shí)探討抑菌相關(guān)之參數(shù)與滅菌法：漂白水、四環(huán)黴素、氫氧化銅、銅快條件，包括自由氯濃度(FreeAvailableChlorine,得寧可濕性粉劑等多種化學(xué)藥劑(作物病蟲(chóng)害FAC)、接觸時(shí)間、有效病原菌濃度等。期望與肥料管理技術(shù)資料光碟)。物理滅菌法通常能以更經(jīng)濟(jì)的滅菌方式來(lái)改善蘭花的病害問(wèn)使用在器具滅菌之部分，雖可應(yīng)用
4、於廣範(fàn)圍的題；並使用更安全的方式，減低其他有機(jī)消毒菌種滅菌，但不適用於植物體本身。而化學(xué)滅藥劑和漂白水對(duì)環(huán)境所造成的污染和危害。菌法雖可直接施用於植物體上，但通常一種藥2.實(shí)驗(yàn)設(shè)備與方法劑只針對(duì)少部分的菌種進(jìn)行防治，並無(wú)一種藥劑可廣效殺滅多種類(lèi)菌種。2.1.無(wú)隔膜電解水製備電解水(electrolyzedwater)近年來(lái)以其高本研究採(cǎi)用氯化鉀(KCl)0.5M作為實(shí)效對(duì)微生物活性抑制效力（Al-Haq,etal.,驗(yàn)用電解質(zhì)，電極採(cǎi)用碳電極(10×10×2002005），對(duì)人體或動(dòng)物健康影響較小（吳，2002），mm)，設(shè)定電解電壓為24V，電解時(shí)間為1853m
5、in，極距為2cm。電解完成後之產(chǎn)物，依照的顆數(shù)，並紀(jì)錄之。等比例稀釋並量測(cè)其自由氯(freeavailablechlorine)，作為有效殺菌力之評(píng)估指標(biāo)。隨後2.4.白絹病之滅菌測(cè)試並以每批樣本水樣與五種蘭花致病原進(jìn)行接在製備固態(tài)培養(yǎng)基時(shí)，以不同自由氯濃度觸滅菌測(cè)試，探討電解水滅菌之效力與作用條之電解水加入固態(tài)培養(yǎng)基當(dāng)中，製成含有不同件。自由氯濃度之固態(tài)培養(yǎng)基。將已活化完成之含有白絹病病原菌之培養(yǎng)皿取出，使用直徑為52.2.細(xì)菌性軟腐菌之滅菌測(cè)試步驟cm之打孔器將菌絲打成菌絲塊，並取出菌絲1.先調(diào)製濃度1.5％之固態(tài)培養(yǎng)基(LB塊放入固態(tài)培養(yǎng)基當(dāng)中。將培養(yǎng)基放
6、入26℃Agar)和濃度20g/L之液態(tài)培養(yǎng)基的培養(yǎng)箱中，觀察並紀(jì)錄四天內(nèi)其菌絲生長(zhǎng)情(LBborth)。待凝固後，每個(gè)培養(yǎng)皿中況為何。選用菌絲生長(zhǎng)作為其滅菌測(cè)試主要的放入100mL之混和溶液。原因在於白絹病病原菌常會(huì)以菌核的方式保2.將培養(yǎng)皿放入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)，以紫外光存，但其感染植株卻是以菌絲的方式感染，而(UV)滅菌30分鐘。本實(shí)驗(yàn)的目的就是要了解到無(wú)隔膜電解水是3.滅菌前先將微量吸管(pipet)等用具放否能抑制白絹病菌絲的生長(zhǎng)。2入滅菌釜內(nèi)，以121℃、壓力1.2kg/cm將所有器具做滅菌。2.5.蝴蝶蘭疫病之滅菌測(cè)試4.以0.01ml的菌液，加入0.99
7、ml電解水，由於疫病的孢子需要在高濕的環(huán)境下才放入震盪(vortex)三十秒。會(huì)生成，在人工的培養(yǎng)環(huán)境中不易產(chǎn)生，故對(duì)5.取0.1ml的樣本放入培養(yǎng)皿中抹盤(pán)，每於疫病的滅菌測(cè)試也是以測(cè)試其菌絲的生長(zhǎng)組三重複。率來(lái)判斷其是否具有滅菌效果。實(shí)驗(yàn)材料製備76.採(cǎi)序列稀釋法，分別稀釋10~10倍，方法同上節(jié)，將培養(yǎng)基放入26℃培養(yǎng)箱中，並各取稀釋後樣本之0.1ml抹盤(pán)。每隔2天記錄其菌絲生長(zhǎng)狀況，共記錄八天。7.放入36℃培養(yǎng)箱中24小時(shí)。8.24小時(shí)候，再取出培養(yǎng)皿，計(jì)算細(xì)菌所2.6.黃葉病之滅菌測(cè)試生成之菌落數(shù)。黃葉病之滅菌測(cè)試主要以孢子發(fā)芽率為主。先將8ml之無(wú)菌水
8、倒入含有黃
