真核生物基因的轉(zhuǎn)錄

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資源描述:

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1、第三節(jié)真核生物基因的轉(zhuǎn)錄一、真核生物基因轉(zhuǎn)錄概述(一)真核生物的轉(zhuǎn)錄和原核生物轉(zhuǎn)錄的不同點(diǎn):1、原核細(xì)胞只有一種RNA聚合酶,而真核細(xì)胞有三種聚合酶;2、啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)不同,真核基因有三種不同的啟動(dòng)子和有關(guān)的元件;3、真核基因的轉(zhuǎn)錄有很多蛋白質(zhì)因子的介入。(二)真核生物RNA聚合酶(三種)類型ⅠⅡⅢ轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物rRNA:18s,5.8s,28stRNA,5srRNA,snRNAhnRNA對(duì)鵝膏蕈堿的反應(yīng)不敏感高度敏感不同物種敏感性不同(三)真核生物RNA聚合酶(RNAPolII)與模板結(jié)合;與轉(zhuǎn)錄起始、延伸有關(guān)與DNA、底物和新生的RNA結(jié)合負(fù)

2、責(zé)酶的裝配250KDa130KDa40KDa40KDa由8~14個(gè)亞基組成,分子質(zhì)量為500KDa附:真核基因在轉(zhuǎn)錄時(shí)RNA聚合酶需要多種轉(zhuǎn)錄因子的協(xié)助PolITBPTAFIs(四)轉(zhuǎn)錄因子1、通用因子(Generalfactor)(1)是所有啟動(dòng)子起始RNA合成所必須(2)與RNA聚合酶在起始位點(diǎn)周圍形成復(fù)合體,并決定起始的位置。PolITBPTAFIsPolIII(B’’,TBP,BRF)TFIIIB2、上游因子(Upstreamfactor)(1)識(shí)別并與啟動(dòng)子上游元件結(jié)合(2)與上游元件結(jié)合可增加轉(zhuǎn)錄起始的效率UBF1上游元件Star

3、tpoint(五)啟動(dòng)子RNA聚合酶Ⅰ的啟動(dòng)子:位于轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)上游RNA聚合酶Ⅱ的啟動(dòng)子:位于轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)上游RNA聚合酶III的啟動(dòng)子:位于轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)下游基因內(nèi)啟動(dòng)子二、RNA聚合酶I基因的轉(zhuǎn)錄(一)rRNA基因(RibosomalRNAGenes)多拷貝基因1、核心啟動(dòng)子(corepromoter)或核心元件:位于-45~+20,負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄的起始。2、上游控制元件(upstreamcontrolelement):位于-180~-107,可增加轉(zhuǎn)錄起始的效率。(二)RNA聚合酶Ⅰ啟動(dòng)子人類RNAPolI的啟動(dòng)子上游控制元件(UCE)startpoin

4、tCTCCGAGTCGNNNNNNTGGGCCGCCGG核心啟動(dòng)子(coreelement)+20-40-110-170(三)RNAPolI的輔助因子(UBF1&SL1)1、上游結(jié)合因子(UBF1)(1)可以與UCE結(jié)合(2)可與核心元件的一段序列結(jié)合(3)兩個(gè)UBF1通過(guò)蛋白-蛋白相互作用而相互結(jié)合,導(dǎo)致在兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)間的DNA形成一個(gè)環(huán)狀結(jié)構(gòu)。UBF1UBF12、選擇因子1(SL1)(1)組成:4個(gè)亞基a、TBP(TATA-bindingprotein):是保證RNApol準(zhǔn)確結(jié)合到起始位點(diǎn)的一個(gè)關(guān)鍵因子b、其他的三個(gè)亞基TAF:(TBP

5、相關(guān)因子)為RNApolI轉(zhuǎn)錄所需的亞基稱為TAFI(2)功能:是使RNA聚合酶正確的定位在起始位點(diǎn)。UBF1UBF1上游控制元件(UCE)startpointCTCCGAGTCGNNNNNNTGGGCCGCCGG核心啟動(dòng)子(coreelement)+20-40-110-170+1SL1TBPTAFIsPolITBPTAFIsRNA聚合酶I基因轉(zhuǎn)錄起始三、RNA聚合酶III基因的轉(zhuǎn)錄(一)tRNA基因的轉(zhuǎn)錄1、啟動(dòng)子----基因內(nèi)啟動(dòng)子(1)啟動(dòng)子的兩個(gè)保守序列:A框(5’-TGGCNNAGTGG-3’);B框(5’-GGTTCGANNCC-

6、3’)(2)A框和B框編碼的序列:A框----D-loop;B框----TψC-loop2、tRNA基因轉(zhuǎn)錄因子(1)TFⅢC:識(shí)別boxB(2)TFⅢB:與A框上游50kb上游序列結(jié)合a、組成:TBP、BRF、B”b、功能:是RNA聚合酶Ⅲ真正的起始因子PolIIITFIIICboxBboxATFIIIB3、tRNA基因轉(zhuǎn)錄的起始(二)5SrRNA基因的轉(zhuǎn)錄1、5SrRNA基因:特點(diǎn):串連排列,形成基因簇(是唯一單獨(dú)被轉(zhuǎn)錄的rRNA亞基)2、啟動(dòng)子:C框;A框3、轉(zhuǎn)錄因子:(1)TFIIIA:結(jié)合位點(diǎn)為Cbox。(2)TFIIIC(3)TF

7、IIIB:TBP+BRF+B//4、5srRNA基因轉(zhuǎn)錄的起始boxAboxCTFIIIATFIIICTFIIIBPolIII(B’’,TBP,BRF)四、RNA聚合酶II基因的轉(zhuǎn)錄(一)RNA聚合酶II的啟動(dòng)子1、組成:核心啟動(dòng)子(corepromoter):TATA盒(Hognessbox):-25~-35bp上游啟動(dòng)子(upstreampromoterelement,UPE)CAAT盒:-70~-80區(qū)GC盒:-80~-110區(qū)-20-40-60-80-100GCCACACCCGGCCAATCATATAAGCCAATTATA2、核心啟動(dòng)

8、子(corepromoter):(1)TATA盒(Hognessbox):a、位置:-25~-35bpb、序列特征:富含AT,5’-TATA(A/T)A(A/T)-

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