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《植物常用培養(yǎng)基附加配制說明》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、備注：培養(yǎng)基和激素母液配制方法（1）母液配制時，先向容量瓶中注入1/3定容體積的蒸餾水，再一一稱取各種鹽放入燒杯中溶解，裝入容量瓶，不得一次稱取所有鹽，混合溶解！在配制大量母液時，氯化鈣最后加入。（2）200×Fe鹽溶液稱取1.39gFeSO4?7H2O溶于水（A液）；稱取1.865gNa2?EDTA溶于熱水（B液）；將A液緩慢倒入正在加熱的B液中，加水接近250ml，煮沸，混合液顏色變深，冷卻到室溫，定容到250ml后,置于棕色試劑瓶內(nèi)4℃保存。?（3）0.5mg/ml2,4-D母液的配法稱取50mg2,4-D，置于小燒杯內(nèi)；加少量無水乙醇或95%乙醇使之完全溶解；加水定容至100m
2、l，4℃保存。如果出現(xiàn)沉淀，需要重新配置。?（4）0.5mg/mlα-NAA母液的配法稱取100mgNAA置于小燒杯內(nèi)；用1N的KOH溶液溶解NAA；用水定容至200ml，4℃保存。?（5）0.5mg/ml6-BA母液的配法稱取100mg6-BA置于小燒杯中；加少量的濃鹽酸，用玻棒研磨成糊狀，再加入少量濃鹽酸，使之完全溶解；用水稀釋并定容至200ml，4℃保存。?（6）100mM乙酰丁香酮（As）的配制稱取196.2mgAs，用5mlDMSO直接溶解，再加水定容至10ml，過濾滅菌后，分裝入無菌小管，-20℃冰凍保存。使用前加入滅菌培養(yǎng)基。?（7）0.5mg/mlKT和ABT的配法稱取
3、50mgkenetin或ABT生根粉，先用少量1NKOH溶解，再用水稀釋定容至100ml，4℃保存。（8）其他附加物的溶解及配制A、稱取嗎啉乙磺酸（MES）5g溶于水中，定容至10mL。4℃保存。B、稱取1gL-半胱氨酸(Cys)溶于2mL0.2mol/L或10%的NaOH溶液,用蒸餾水稀釋定容至10mL，現(xiàn)用配制。4℃保存。C、稱取850mg硝酸銀，用蒸餾水溶解后定容至100mL。4℃保存。D、頭孢霉素（cefotaxime）2500mg，用蒸餾水溶解后定容至10mL。4℃保存。E、潮霉素（HygB），商品已溶解，篩選時一般加5、8、12mg/L梯度濃度。植物培養(yǎng)的其他相關(guān)知識：培養(yǎng)
4、基culturemedium是植物組織培養(yǎng)的重要基質(zhì)。在離體培養(yǎng)條件下，不同種植物的組織對營養(yǎng)有不同的要求，甚至同一種植物不同部位的組織對營養(yǎng)的要求也不相同，只有滿足了它們各自的特殊要求，它們才能很好地生長。因此，沒有一種培養(yǎng)基能夠適合一切類型的植物組織或器官，在建立一項新的培養(yǎng)系統(tǒng)時，首先必須找到一合適的培養(yǎng)基，培養(yǎng)才有可能成功。在植物組織培養(yǎng)歷史進程中，事實上也緊密地伴隨著培養(yǎng)基的研制史。對植物的營養(yǎng)要求的不斷認識，對已有培養(yǎng)基的改進，或者將新發(fā)現(xiàn)的植物激素、新的有益成分應(yīng)用于培養(yǎng)基之中，都大大促進了組織培養(yǎng)研究的迅速發(fā)展，取得越來越多的成功。一、培養(yǎng)基的種類和成分（一）培養(yǎng)基的種
5、類培養(yǎng)基的名稱，一直根據(jù)沿用的習(xí)慣。多數(shù)以發(fā)明人的名字來命名，如White培養(yǎng)基，Murashige和Skoog培養(yǎng)基(簡稱MS培養(yǎng)基)，也有對某些成分進行改良稱作改良培養(yǎng)基，目前國際上流行的培養(yǎng)基有幾十種，常用的培養(yǎng)基及特點如下：(1)MS培養(yǎng)基它是1962年由Murashige和Skoog為培養(yǎng)煙草細胞而設(shè)計的。特點是無機鹽和離子濃度較高，為較穩(wěn)定的平衡溶液。其養(yǎng)分的數(shù)量和比例較合適，可滿足植物的營養(yǎng)和生理需要。它的硝酸鹽含量較其他培養(yǎng)基為高，廣泛地用于植物的器官、花藥、細胞和原生質(zhì)體培養(yǎng)，效果良好。有些培養(yǎng)基是由它演變而來的。(2)B5培養(yǎng)基是1968年由Gamborg等為培養(yǎng)大
6、豆根細胞而設(shè)計的。其主要特點是含有較低的銨，這可能對不少培養(yǎng)物的生長有抑制作用。從實踐得知有些植物在B5培養(yǎng)基上生長更適宜，如雙子葉植物特別是木本植物。(3)White培養(yǎng)基是1943年由White為培養(yǎng)番茄根尖而設(shè)計的。1963年又作了改良，稱作White改良培養(yǎng)基，提高了MgSO4的濃度和增加了硼素。其特點是無機鹽數(shù)量較低，適于生根培養(yǎng)。(4)N6培養(yǎng)基是1974年朱至清等為水稻等禾谷類作物花藥培養(yǎng)而設(shè)計的。其特點是成分較簡單，KN03和(NH4)2S04含量高。在國內(nèi)已廣泛應(yīng)用于小麥、水稻及其他植物的花藥培養(yǎng)和其他組織培養(yǎng)。(5)KM-8P培養(yǎng)基它是1974年為原生質(zhì)體培養(yǎng)而設(shè)計
7、的。其特點是有機成分較復(fù)雜，它包括了所有的單糖和維生素，廣泛用于原生質(zhì)融合的培養(yǎng)。常用培養(yǎng)配方見表3-1。（二）、培養(yǎng)基的成分培養(yǎng)基的成分主要可以分水、無機鹽、有機物、天然復(fù)合物、培養(yǎng)體的支持材料等五大類。1．水水是植物原生質(zhì)體的組成成分，也是一切代謝過程的介質(zhì)和溶媒。它是生命活動過程中不可缺少的物質(zhì)。配制培養(yǎng)基母液時要用蒸餾水，以保持母液及培養(yǎng)基成分的精確性，防止貯藏過程發(fā)霉變質(zhì)'大規(guī)模生產(chǎn)時可用自來水。但在少量研究上盡量用蒸餾水，以防成分的
