《發(fā)酵過(guò)程工藝》PPT課件

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1、第六章發(fā)酵工藝過(guò)程控制發(fā)酵,原本是指在厭氧條件下葡萄糖通過(guò)酵解途徑生成乳酸或乙醇等的分解代謝過(guò)程。在廣義的工藝上,則把發(fā)酵看做是微生物把一些原料養(yǎng)分在合適的條件下(通常是需氧)經(jīng)特定的代謝轉(zhuǎn)變成產(chǎn)物的過(guò)程。發(fā)酵是一種很復(fù)雜的生化過(guò)程,發(fā)酵生產(chǎn)受許多因素的影響和工藝條件的制約。需要多年的經(jīng)驗(yàn)才能掌握。生產(chǎn)菌種的代謝規(guī)律和發(fā)酵調(diào)控的基本知識(shí)對(duì)穩(wěn)定生產(chǎn),提高產(chǎn)量意義重大。微生物發(fā)酵的生產(chǎn)水平不僅取決于生產(chǎn)菌種本身的性能,而且要賦以合適的環(huán)境條件才能使它的生產(chǎn)能力充分表達(dá)出來(lái);必須了解有關(guān)生產(chǎn)菌種對(duì)環(huán)境條件的要求,如培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度、pH、氧的

2、需求等,并深入了解生產(chǎn)菌在合成產(chǎn)物過(guò)程中的代謝調(diào)控機(jī)制以及可能的代謝途徑,為設(shè)計(jì)合理的生產(chǎn)工藝提供理論基礎(chǔ);通過(guò)各種監(jiān)測(cè)手段如取樣測(cè)定隨時(shí)間變化的菌體濃度,糖、氮消耗及產(chǎn)物,以及采用傳感器測(cè)定發(fā)酵罐中的培養(yǎng)溫度、pH、溶解氧等參數(shù)情況,并予以有效地控制,使生產(chǎn)菌種處于產(chǎn)物合成的優(yōu)化環(huán)境中。第一節(jié)發(fā)酵過(guò)程中的代謝變化與控制參數(shù)一、發(fā)酵工藝過(guò)程控制的重要性從產(chǎn)物形成來(lái)說(shuō),代謝變化就是反映發(fā)酵中的菌體生長(zhǎng)、發(fā)酵參數(shù)的變化(培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件)和產(chǎn)物形成速率這三者之間的關(guān)系。二、發(fā)酵過(guò)程的代謝變化規(guī)律一般來(lái)說(shuō),微生物的培養(yǎng)方式分為分批發(fā)酵、補(bǔ)料分

3、批發(fā)酵、半連續(xù)發(fā)酵及連續(xù)發(fā)酵四種類型的操作方式。1、分批發(fā)酵指在一個(gè)封閉的培養(yǎng)系統(tǒng)內(nèi)投入有限數(shù)量的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(基質(zhì))后接入種子進(jìn)行培養(yǎng)的發(fā)酵方式。即一次性投料,一次性收獲產(chǎn)品的發(fā)酵方式。在該系統(tǒng)里種子接種到培養(yǎng)基后,除了氣體流通外,發(fā)酵液始終留在生物反應(yīng)器內(nèi)。延滯期指數(shù)期穩(wěn)定期衰亡期時(shí)間(t)菌體濃度分批培養(yǎng)條件下的典型生長(zhǎng)曲線分批培養(yǎng)過(guò)程中隨著培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不斷減少,微生物生長(zhǎng)的環(huán)境條件也不斷變化,因此,微生物分批培養(yǎng)是一種非穩(wěn)態(tài)的培養(yǎng)方法。生長(zhǎng)階段細(xì)胞特征停滯期為適應(yīng)新環(huán)境的需要,細(xì)胞個(gè)體增大,合成新的酶及細(xì)胞物質(zhì),細(xì)胞數(shù)量增加很

4、少,微生物對(duì)不良環(huán)境的抵抗力下降。當(dāng)接種的是老齡化的或饑餓的細(xì)胞時(shí),停滯期將延長(zhǎng)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞活力很強(qiáng),生長(zhǎng)速率達(dá)到最大值且保持穩(wěn)定、速率大小取決于培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境穩(wěn)定期隨著營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗和產(chǎn)物的積累,微生物的生長(zhǎng)速率下降等于死亡速率,系統(tǒng)中活微生物數(shù)保持穩(wěn)定衰亡期由于自溶酶的作用或有害物質(zhì)的積累,使細(xì)胞破裂死亡2、微生物分批培養(yǎng)生長(zhǎng)速度的動(dòng)力學(xué)方程1942年,Monod提出了在特定溫度、pH值、營(yíng)養(yǎng)物類型、營(yíng)養(yǎng)物濃度條件下,微生物細(xì)胞的比生長(zhǎng)速率與限制性營(yíng)養(yǎng)物濃度之間存在如下關(guān)系:μ=μmaxS/(Ka+S)μmax——微生物的最大

5、比生長(zhǎng)速率S——限制性營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)的濃度Ks——飽和常數(shù)Monod方程的幾點(diǎn)說(shuō)明a:分批培養(yǎng)過(guò)程的經(jīng)驗(yàn)方程,在純培養(yǎng)情況下,只有當(dāng)微生物細(xì)胞生長(zhǎng)受一種限制性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)制約時(shí),與實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)相一致。b:Ks反映了微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收的親和力的大小,數(shù)值越小,表明微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的親和力大。反之則親和力小。一般微生物的Ks值為0.1—120mg/L,是很小的。c:μmax隨微生物的種類和培養(yǎng)條件不同,一般來(lái)說(shuō)細(xì)菌的μmax大于霉菌,就同種微生物來(lái)說(shuō),培養(yǎng)溫度升高,μmax增大。3、分批培養(yǎng)時(shí)微生物細(xì)胞的生長(zhǎng)與產(chǎn)物形成的動(dòng)力學(xué)在發(fā)酵過(guò)程中,常用得率系

6、數(shù)來(lái)描述微生物生長(zhǎng)過(guò)程的特征,即生成的細(xì)胞或產(chǎn)物與消耗的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之間的關(guān)系。在實(shí)際中,最常用的是細(xì)胞得率系數(shù)(Yx/s)和產(chǎn)物得率系數(shù)(Yp/s),分別定義為消耗1g營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)生成的細(xì)胞的克數(shù)和生成產(chǎn)物的克數(shù)。工業(yè)生產(chǎn)中可通過(guò)測(cè)定一定時(shí)間內(nèi)細(xì)胞和產(chǎn)物的生成量及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗量來(lái)進(jìn)行計(jì)算。在分批培養(yǎng)過(guò)程中根據(jù)產(chǎn)物生成是否與菌體生長(zhǎng)同步的關(guān)系,將微生物產(chǎn)物形成動(dòng)力學(xué)分為①生長(zhǎng)關(guān)聯(lián)型和②非生長(zhǎng)關(guān)聯(lián)型。A(葡萄糖異構(gòu)酶)B(菌體濃度)B(菌體濃度)A(殺念珠菌素)生長(zhǎng)關(guān)聯(lián)型非生長(zhǎng)關(guān)聯(lián)型產(chǎn)物的生成速率與菌體生長(zhǎng)速率成正比。這種產(chǎn)物通常是微生物分解基

7、質(zhì)的直接產(chǎn)物,如酒精,但也有某些酶類,如脂肪酶和葡萄糖異構(gòu)酶產(chǎn)物的生成速率與菌體生長(zhǎng)速率成無(wú)關(guān),而與菌體量的多少有關(guān)。對(duì)于生長(zhǎng)關(guān)聯(lián)型產(chǎn)品,可采用有利于細(xì)胞生長(zhǎng)的培養(yǎng)條件,延長(zhǎng)與產(chǎn)物合成有關(guān)的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。對(duì)于非生長(zhǎng)關(guān)聯(lián)型產(chǎn)品,則宜縮短菌體的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,并迅速獲得足夠量的菌體細(xì)胞后,延長(zhǎng)穩(wěn)定期,從而提高產(chǎn)量。(1)有關(guān)分批發(fā)酵的幾點(diǎn)討論生產(chǎn)的對(duì)象不同,掌握工藝的重點(diǎn)不同產(chǎn)物為細(xì)胞本身——采用能支持最高生長(zhǎng)量的培養(yǎng)條件產(chǎn)物為初級(jí)代謝物——延長(zhǎng)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期產(chǎn)物為次級(jí)代謝物——縮短對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,延長(zhǎng)穩(wěn)定期(2)分批發(fā)酵的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)單,周期短,

8、染菌的機(jī)會(huì)減少生產(chǎn)過(guò)程易于控制、產(chǎn)品質(zhì)量易掌握。x缺點(diǎn):分批發(fā)酵不適于測(cè)定過(guò)程動(dòng)力學(xué),存在基質(zhì)的抑制問(wèn)題,出現(xiàn)二次生長(zhǎng)現(xiàn)象,對(duì)與一些對(duì)基質(zhì)敏感的產(chǎn)物,由于養(yǎng)分易耗盡,產(chǎn)率較低。2、補(bǔ)料-分批發(fā)酵(fed-b

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