資源描述：
《茶葉中總黃酮含量測定方法的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、第35卷分析化學(xué)(FENXIHUAXUE)研究簡報第9期2007年9月ChineseJournalofAnalyticalChemistry1365~1368茶葉中總黃酮含量測定方法的研究*何書美劉敬蘭(河北師范大學(xué)實驗中心,石家莊050016)摘要茶葉中富含羥基苯甲酸類、肉桂酸類及原花色素等多酚類物質(zhì),這些物質(zhì)都具有鄰苯二羥基結(jié)構(gòu),堿性環(huán)境下與鋁離子形成絡(luò)合物,影響總黃酮的測定。本實驗用亞硝酸鈉硝酸鋁法和三氯化鋁法測定茶葉總黃酮含量的結(jié)果作了比較。實驗結(jié)果表明,亞硝酸鈉硝酸
2、鋁法的測定結(jié)果比三氯化鋁法約高60mg/g,三氯化鋁法在酸性環(huán)境下進行,酸度實驗顯示,適宜酸度為pH5.0。鞣酸干擾實驗表明,平均誤差為0.017mg,隨著鞣酸量的增加,測得值無上升趨勢。三氯化鋁法的線性方程:y=0.000638+0.8623x,相關(guān)系數(shù):r=0.9998;樣品加標回收率為98.05%。因此,對含酚類較多的植物應(yīng)采用三氯化鋁法測定其總黃酮的含量。關(guān)鍵詞亞硝酸鈉硝酸鋁法,三氯化鋁法,總黃酮,茶多酚,茶葉1引言茶葉作為中華民族的傳統(tǒng)保健飲料已有四五千年的歷史,開發(fā)茶葉的新用途,開展茶葉的綜合利用,尤其是利用
3、低檔茶葉或茶葉加工的下腳料來生產(chǎn)高附加值的精細化學(xué)品,是一個具有重要意義的研[1~3][4][5]究課題。黃酮含量測定的方法有多種,如紫外區(qū)直接測定法(不同峰位)、可見區(qū)絡(luò)合法、液相[6,7][8][9]色譜法、熒光法、化學(xué)發(fā)光法等。用于測定總黃酮的方法常見的是前兩種,液相色譜主要應(yīng)用于單一黃酮化合物的測定。紫外區(qū)直接測定總黃酮的方法與被測液的基底(苯類,共軛烯烴等)有很大關(guān)系,因此容易產(chǎn)生誤差。絡(luò)合法與直接測定法不同,其化學(xué)原理為,金屬離子與酮羰基、鄰位羥基形成配位化合物,使吸收帶發(fā)生位移,從而克服了被測液基底的影響,可見區(qū)絡(luò)合
4、法與被測液的成分也有很大關(guān)系,絡(luò)合劑及酸度的選擇非常重要。由于茶湯的顏色較重,茶多酚含量高,因此,不適宜的測定方法會造成較大的誤差。本研究對最常見的可見區(qū)亞硝酸鈉硝酸鋁法與可見區(qū)三氯化鋁法進行了比較,方法偏差約為60mg/g,亞硝酸鈉硝酸鋁法產(chǎn)生偏差的因素系茶多酚中鄰位二羥基。我國茶區(qū)遼闊,茶產(chǎn)量亦逐年增加且品種繁多。碎末茶以及副茶、邊茶、材茶、茶梗等茶葉下腳料數(shù)量較大,利用茶葉下腳料提取黃酮,開發(fā)前景十分廣闊。適宜的測定方法則更為重要。2實驗部分2.1儀器與試劑M1730型傅立葉變換紅外光譜儀和17型紫外可見分光
5、光度計(美國PE公司);PHS3C11A型精密PH計(中國上海雷磁新涇儀器公司)。蕓香葉苷(蘆丁):(標準試劑)北京化學(xué)試劑公司。實驗用茶葉均為市售:碧螺春產(chǎn)地江蘇;龍井產(chǎn)地杭州;鐵觀音產(chǎn)地福建;大紅袍產(chǎn)地武夷山;白毫產(chǎn)地福建。2.2兩種黃酮的測定方法2.2.1亞硝酸鈉硝酸鋁法精密稱取105下干燥恒重的蘆丁純品0.1000g,用50%的乙醇溶解,搖勻,定容至100mL,再取10mL此標準液于100mL容量瓶中,稀釋、定容為0.1g/L的蘆丁標準品溶液,作為貯備液備用。分別吸取上述蘆丁標準液0.00,0.25,0.5
6、,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mL于10mL比色管中,用50%乙醇稀釋至5.00mL,分別加入5%(g/L)NaNO2試液0.3mL,搖勻,靜置6min。再加5%(g/L)Al(NO3)3試液0.3mL,搖勻,靜置6min,再加4%NaOH4mL,并用50%乙醇水溶液定容至刻度,搖勻,靜置12min。于504nm處測試,以吸光度值為縱坐標,以顯色液中蘆丁的質(zhì)量(mg)為橫坐20060914收稿;20070421接受本文系河北省教育廳(No.2004325)和河北師范大學(xué)(No.L2005Y13)基金資助項目*E
7、mai:lhsm63@163.com1366分析化學(xué)第35卷-2標,用最小二乘法進行回歸,線性方程:Y=4.07110+0.1159X,相關(guān)系數(shù)r=0.9992。2.2.2三氯化鋁法分別精密吸取上述蘆丁標準液0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL于25mL的比色管中,加入1.5%AlCl38mL和醋酸醋酸鈉的緩沖液(pH5.5)4mL,并用50%乙醇水溶液定容至刻度,搖勻,靜置0.5h。于415nm下測試,以吸光度值為縱坐標,以顯色液中蘆丁的質(zhì)量(mg)為橫坐標,用最小二乘法進行回歸,線性方程為Y=0
8、.000638+0.8623X,r=0.9998。2.3茶葉樣品處理茶葉:碧螺春,市售,產(chǎn)地江蘇;龍井,市售,產(chǎn)地杭州;鐵觀音市售,產(chǎn)地福建。準確稱取1.0000g干燥并研碎的茶葉于錐形瓶中,按170的固液比,加入50%乙醇溶液,80水浴提取
