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《基于微萃取技術的根系分泌物分析及其化感作用研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、博士學位論文基于微萃取技術的根系分泌物分析及其化感作用研究RESEARCHONROOTEXUDATEANALYSISBASEDONMICROEXTRACTIONANDALLELOPATHICEFFECT孫海燕哈爾濱工業(yè)大學2014年4月
國內(nèi)圖書分類號:O652.6國際圖書分類號:540學校代碼:10213密級:公開工學博士學位論文基于微萃取技術的根系分泌物分析及其化感作用研究博士研究生:孫海燕導師:王炎教授申請學位:工學博士學科:化學工程與技術所在單位:理學院答辯日期:2014年4月授予學位單位:哈爾濱工業(yè)大學
ClassifiedIndex:O652.6U.D.C:540Disserta
2、tionfortheDoctoralDegreeinEngineeringRESEARCHONROOTEXUDATEANALYSISBASEDONMICROEXTRACTIONANDALLELOPATHICEFFECTCandidate:Supervisor:SunHaiyanProf.WangYanAcademicDegreeAppliedfor:DoctorofEngineeringSpeciality:ChemicalEngineeringandTechnologyAffiliation:SchoolofScienceApril,2014DateofDefence:Degree-Con
3、ferring-Institution:HarbinInstituteofTechnology
摘要摘要根系分泌是化感物質釋放的重要途徑之一,根系分泌物一般濃度較低、不易溶于水、化學性質復雜,受外界因素影響較多,因此,根系分泌物的收集、分離、鑒定以及化感作用的研究始終是該領域研究的前沿和難點。因此,開發(fā)簡單、綠色、原位的微萃取方式,對于還原根系分泌化感物質的真實種類,有效地研究其化感作用是非常重要的。本文以辣椒作為模式植物,根據(jù)根系分泌物的性質,建立了不同形式的分離方法,比較開發(fā)的方法與固相萃?。⊿PE)、液液萃?。↙LE)的分析特性,研究了開發(fā)的方法在不同種類根系分泌物中的應用,并通過生物
4、測定方法研究了根系分泌物對不同受體植物的化感響應,確定出最合適的受體植物和潛在的化感物質,系統(tǒng)研究外源潛在化感物質單獨以及協(xié)同作用受體植物的化感作用。采用頂空固相微萃?。℉S-SPME)方法分析辣椒根系培養(yǎng)液中的鄰苯二甲酸二甲酯(DMP)、鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)、鄰苯二甲酸二異丁酯(DIBP)、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸二辛酯(DOP)等5種鄰苯二甲酸酯類物質。10mL的樣品溶液中加入18%的NaCl,在1000r·min-1的攪拌速度下,使用65μmPDMS/DVB的萃取纖維在80℃的溫度下萃取50min,5種分析物的萃取效率最大。將萃取纖維在250℃的GC進樣口溫度下解析
5、10min,萃取物被完全脫附。采用HS-SPME萃取根系分泌液中低濃度的鄰苯二甲酸酯類物質,5種分析物的回收率在83.4%~104.7%之間,相對標準差≤8.74%。因此,選擇HS-SPME分析鄰苯二甲酸酯類物質取得了較滿意的萃取效果。開發(fā)了衍生后PDMS管微萃取方法分析辣椒根系分泌的2,3-二甲基苯酚(2,3-DMBP),2,6-二叔丁基苯酚(2,6-DTBP)、4,4'-(1-甲基亞乙基)雙酚(4,4'-(1-M)BP)等3種酚類化合物,研究不同衍生試劑及衍生試劑體積對萃取效率的影響,200μL五氟吡啶作為衍生試劑可使3種分析物被完全衍生,采用PDMS管微萃取衍生產(chǎn)物,1.5mL異辛烷可
6、將PDMS微管吸附的分析物完全洗脫下來。在0.2~20μg·mL-1的線性濃度范圍內(nèi),比較衍生后PDMS管微萃取與SPE方法在回收率、相對標準差和檢出限等方面的萃取特性,結果表明,衍生后PDMS管微萃取根系分泌的3種酚類物質,均得到了低的檢出限、滿意的回收率和良好的重現(xiàn)性。建立3種不同衍生方式與中空纖維液相微萃?。℉F-LPME)聯(lián)用分析根系分泌的1-萘胺(1-NA),二苯胺(DPA)和N-苯基-2-萘胺(N-P-2-NA)3種胺-I-
哈爾濱工業(yè)大學工學博士學位論文類化合物,確定了原位衍生HF-LPME是最合適的萃取方法。研究了不同衍生試劑對原位衍生HF-LPME萃取效率的影響,15μL甲
7、苯與乙酸酐(80:20,v/v%)作為中空纖維的萃取劑,在pH=12,在50℃的溫度下萃取30min,3種分析物的萃取率達到最大。原位衍生HF-LPME在回收率、相對標準差和檢出限等方面的萃取特性明顯優(yōu)于LLE,采用原位衍生HF-LPME分析了根系分泌物中的3種胺類物質,回收率在90.2%~96.1%之間,相對標準差均小于9.1%。因此,原位衍生HF-LPME是一種操作方便、環(huán)境友好、富集倍數(shù)高的萃取方法,可