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《實驗三影響血液凝固的因素紅細胞脆性的測定血紅蛋白的測定》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、實驗三影響血液凝固的因素紅細胞脆性的測定血紅蛋白的測定影響血液凝固的因素1實驗?zāi)康囊阅獣r間為指標,了解影響凝血的因素,加深對生理止血過程的理解。2實驗原理血液凝固是一個酶解激活過程,有多種凝血因子參與。根據(jù)凝血過程起動時凝血因子來源不同,可將凝血分為內(nèi)源性激活途徑和外源性激活途徑。3實驗對象:家兔4方法與步驟4.1家兔的麻醉、保定與手術(shù)33%乙醇溶液,6mL/kg,耳緣靜脈注射。4.2頸動脈采血4.3試管準備4.4記錄凝血時間5實驗結(jié)果表1血液凝固及其影響因素試管號實驗處理凝血時間(秒)1空白2液體石蠟4滴3棉花少許4冰水環(huán)境5肝素4滴6草酸鉀
2、4滴7腦組織浸液4滴5號管加CaCl24滴6號管加CaCl24滴6注意事項6.1采血過程要盡量快,以減少計時誤差,對比實驗的采血時間要緊接著進行。6.2每支試管口徑大小及采血量要相對一致,不可相差太大。6.3判斷凝血的標準要一致,一般以傾斜試管達45°時試管內(nèi)血液不見流動為準。紅細胞脆性的測定1實驗?zāi)康膶W習測定紅細胞滲透脆性的方法,理解細胞外液滲透張力對維持細胞正常形態(tài)與功能的重要性。2實驗原理正常紅細胞懸浮于等滲的血漿中,著置于高滲溶液內(nèi),則紅細胞會因失水而皺縮;反之,置于低滲溶液內(nèi),則水進入紅細胞,使紅細胞膨脹。如環(huán)境滲透壓繼續(xù)下降,紅細胞會
3、因繼續(xù)膨脹而破裂,釋放血紅蛋白,稱之為溶血。紅細胞膜對低滲溶液有一定的抵抗力,這一特征稱為紅細胞的滲透脆性。3實驗對象:動物種類不限4方法與步驟4.1溶液配置表2不同濃度NaCl溶液配制管號123456789101%NaCl(mL)9.06.56.05.55.04.54.03.53.02.5蒸餾水(mL)1.03.54.04.55.05.56.06.57.07.5NaCl濃度(%)0.900.650.600.550.500.450.400.350.300.254.2制備抗凝血:檸檬酸鈉作抗凝劑。4.3加抗凝血:每只試管加1滴。4.4觀察結(jié)果①未溶
4、血試管:液體下層有大量紅細胞下沉,上層為無色透明,表明無紅細胞破裂。②不完全溶血試管:液體下層有紅細胞下沉,上層出現(xiàn)透明淡紅色,表明部分紅細胞已經(jīng)破裂,稱為不完全溶血。②完全溶血試管:液體完全變成透明紅色,管底無紅細胞下沉。5實驗結(jié)果表2家兔Hb含量及RBC脆性測定分組Hb測定(g/L)RBC脆性測定(NaCl%)最小抵抗力最大抵抗力實驗組對照組1230.60~0.550.40~0.356注意事項6.1試管要干凈;6.2配液要準確;6.3加血量要一致;6.4輕輕混勻,減少溶血機會;6.5靜置時間不少于30min。血紅蛋白的測定1實驗?zāi)康恼莆毡壬?/p>
5、測定動物血紅蛋白含量的方法。2實驗原理血紅蛋白的顏色與氧結(jié)合量有關(guān),當用一定的氧化劑將其氧化時,可使其轉(zhuǎn)變?yōu)榉€(wěn)定、棕色的高鐵血紅蛋白,而且顏色與血紅蛋白的濃度成正比。因此,可與標準色板進行對比,求出血紅蛋白的濃度,即每升血液中含血紅蛋白的克數(shù)(g.L-1)。3實驗對象:動物種類不限4方法與步驟:使用沙里氏血紅蛋白計測定。比色法是用HCl使血紅蛋白酸化形成粽色的高鐵血紅蛋白,然后和標準比色板進行比色。(1)血紅蛋白計由標準比色箱和測定管組成。測定管兩側(cè)有刻度,一側(cè)為血紅蛋白量的絕對值,以每100mL血液中所含血紅蛋白的克數(shù)表示;另一側(cè)為相對值,以%
6、(即相當于正常平均值的百分數(shù))來表示。(2)測定方法①血紅蛋白吸管清潔:自來水→蒸餾水→無水乙醇。②將0.1N鹽酸加入測定管中至刻度“2”處。③用血紅蛋白吸管吸取20μL血液,將血液吹入鹽酸中,并利用上層鹽酸將吸管反復洗滌多次(避免起泡)。④酸化10min后,逐滴加入蒸餾水,邊加邊混勻并與標準比色板比較,至二者顏色相同為止。⑤讀數(shù)即為每100mL血液中血紅蛋白的克數(shù)。【注意事項】(1)血紅蛋白吸管和比色管要清潔;(2)吸取血液要準確,避免起泡;(3)滴加蒸餾水要準確;(4)酸化時間不能少于10min;(5)在自然光下比色。3實驗結(jié)果3.1家兔Hb
7、含量及RBC脆性測定:見表1。表1家兔Hb含量及RBC脆性測定分組Hb測定含量(g/L)RBC脆性測定(NaCl%)最小抵抗最大抵抗實驗組對照組1230.60~0.550.40~0.353.2不同因素對血液凝固時間的影響表2血液凝固及其影響因素試管號實驗處理凝血時間(秒)1空白2液體石蠟4滴3棉花少許4冰水環(huán)境5肝素4滴6草酸鉀4滴7腦組織浸液4滴5號管加CaCl24滴6號管加CaCl24滴4分析與探討4.1本次實驗家兔Hb測定結(jié)果比對照高(或低、或基本一致),從操作過程方面說明原因:……。4.2本次實驗家兔RBC脆性測定結(jié)果,最小抵抗比對照組高
8、(或低、或基本一致),最大抵抗……,從操作過程方面說明原因:……。4.3家兔凝血時間測定結(jié)果表明,××處理能加快(抑制或不凝)血液凝固,