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《一株焦化廢水降酚菌的質(zhì)粒初步研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、應用與環(huán)境生物學報C垴I．】．^p畦．／}nv／ron1099，5(smI)=55—58B娃?1999—10-05一株焦化廢水降酚菌的質(zhì)粒初步研究L．——一一一一趙立平肖虹(山西大學生物技術研究所李艷琴太原030006)摘要從處理焦化廢水的括性污扼池中，分離得到了一株具有陣酚能力的細菌，JAJA可以在合酚的HP復雜培養(yǎng)基中生長，也可以在以砑為唯一碳源的ttl3P培養(yǎng)基中生長，且冉有產(chǎn)黑色素的特點．用麓裂解提取質(zhì)粒的方琺發(fā)現(xiàn)它古有一千質(zhì)柱，定名為pxHl，并測定7茸十質(zhì)牲的太小約為26ida．用限村性內(nèi)留酵剜f和兩af進行取酶切，作出了初步的物理腳譜．pxrn經(jīng)過20次沒
2、有醣作為選擇壓傳代培養(yǎng)后仍然能loD％保留，同時，】^菌仍具有障酚能力。表明其具有很高的遺傳穩(wěn)定性．*t詞戽醣菌；質(zhì)粒；糖理圖譜；遺傳穩(wěn)定性帽鼢船唧“1q芒7過703CHARACTERIZATIoNoFpXttl。AND旺)IGENorosPLASM口DOFPHENOLDEGRADDqGSTRADgJAIsoLATEDFRoMTHEWASTEWATER0FACOKEPLANTZHAOLiping．XIAOHong＆LIYanqirt(B／oteehno／％,ylrⅡtltLae．Shattd曲mdT，Tniyttan030006)AbstractAbacterialst
3、zalnJAWaSis山tedanditwlfiehcouldgr“wonphend船B鯽lee盯bon舯眥∞inwa＆ewaterfromacokepl呲．Aninalgenr雌pl蛆midw蚰dlse州eredbyming出alllysism小}lodBndn8In亡dpXHlvi出asI僻about2．6kh．Ap兕H而naryp蛔啦札呲pw鷦衄如bydoul)lecut6唱誡thIe5dc由Ⅱenzymes強fI蚰dmⅡI．After缸丑II如rofculturewitll叫l(wèi)phenda8selectivepressurefor211li口瑚，100％0fpX
4、ttlm3s蝴Ⅲitl“nedinthelⅪeleriumandJA5tilllladthe”pac畸ofdeedingphen01．ne∞Ⅻ,dtssJ．。涮吐呲pxHJh鰣蠅b學口糟如出b講睜．The硝日·灑曲jPbehr蛐pbe蒯姆ad叩刪d
5、be姍dneedsfurthers山dy．Thisplas嘶dmaybeusefulin00瞄tn蛇d呻0fnewvec【o雌hgeneticen舀neoMl'qgofpllenol蛔diElg[meteria．Keywormphenoldegradalingbacterium；plosmid；physicalrap；目en
6、etiestability隨著我國工業(yè)建設的迅速發(fā)展，來自石油化工、煤炭焦化各種工業(yè)廢水的捧酚t日盎增加．嚴重地污染了環(huán)境．目前對含酚廢水的各種處理方瑩中，徽生物陣解方法顯示較多優(yōu)越性【l。1國內(nèi)外有^從酚庫髀基因的定位和結(jié)椅組成等角度凡手對降酹茵進行研究【4州】．研究表明，編碼陴解有毒有害物廟的基目～般位于質(zhì)粒上kII,”’我們從處理焦化廢水的活性污泥池中分離到一株能降解酚類物質(zhì)的細菌，車支對分離株質(zhì)艟進行研究，以期為梅建降酣工程菌．提高障酚能力奠定基礎．1材料與方法1．1培養(yǎng)基1．J1LB培養(yǎng)基100mL培養(yǎng)基中古胰蛋白胨Ig，酵母提取物05g，氯化鈉Ig，pH70
7、．i1．2I-IP培養(yǎng)基100mL培養(yǎng)基中含苯酚0．Ig，l”gS04005g，(N凰)2s04O．3g，KH2Pq0．2g，玉米漿0．02g，瓊脂2g，pH70—75．1．1．3ABP培養(yǎng)基100nlL培養(yǎng)基中含苯酚0．05g，MgS029mg，CaCl20．017755mg，F(xiàn)eS04·7H2005mg，MnS04‘H2001mg．(Nil,)2s0402g，KH2P04J．07g，pH70(過濾除菌)．收槁口崩：1999加5．r9接受日村：1999_05．3應用與環(huán)境生物學報5卷1．2降酚菌的篩選從處理焦化廢水的活性污泥池中取回的樣品中取1mL放入50ⅡIL液體L
8、8培養(yǎng)基中，28℃富集培養(yǎng)，轉(zhuǎn)速為170r／niln．培養(yǎng)過夜，取原液100口L在HP固體培養(yǎng)基上涂板，生長72h后出現(xiàn)菌落．從平板上挑取單茁落分別在ABP培養(yǎng)基和lip培養(yǎng)基上劃線，挑選單菌落．1．3質(zhì)粒的提取及其研究將挑選出的單菌落分剮接于5mLliP液體培養(yǎng)基中，28℃搖床上培養(yǎng)72h，將菌體收集于1．5mLEppcndorf管中．，用堿裂解的方法進行質(zhì)粒的小規(guī)模提取【l”．用0．8％瓊脂糖凝膠電誅，EB染色，在GDS8000凝膠圖像處理儀中觀察井記錄結(jié)果1．3．I降酚菌質(zhì)粒的單酶切試驗殛其大小的確定用19種限制性內(nèi)切醇卻aIBam
