HIV實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及規(guī)范操作

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1、HIV實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及規(guī)范操作xxx艾滋病檢測(cè)的方法HIV抗體檢測(cè)HIV抗體初篩檢測(cè)HIV抗體確認(rèn)檢測(cè)（免疫印跡試驗(yàn)）HIV核酸檢測(cè)?核酸序列依賴性擴(kuò)增（NASBA）?HIV定量逆轉(zhuǎn)錄PCR系統(tǒng)（RT－PCR）?HIVRNA定量檢測(cè)的分支測(cè)定法（bDNA)艾滋病檢測(cè)方法的意義HIV抗體檢測(cè)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)?間接法?直接法（雙抗原夾心法）?抗體競(jìng)爭(zhēng)法明膠顆粒凝集試驗(yàn)（PA）快速法HIV/AIDS的篩查，但初篩陽性結(jié)果不能做為艾滋病診斷依據(jù)，需將該標(biāo)本送地區(qū)篩查中心實(shí)驗(yàn)室用兩種方法進(jìn)行復(fù)核，仍為陽性或一陰一陽則須送省確認(rèn)中心。艾滋病檢測(cè)方法的意義HIV抗體確認(rèn)檢測(cè)（免疫印跡試驗(yàn)）H

2、IV/AIDS診斷的唯一依據(jù),省CDC確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)全省監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)以及常規(guī)檢測(cè)中陽性及可疑標(biāo)本的確認(rèn)和省內(nèi)HIV初篩實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理.另外,省檢疫系統(tǒng)有一個(gè)確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室,設(shè)在省檢疫局保健中心.艾滋病檢測(cè)方法的意義HIV核酸檢測(cè)?輔助診斷：在特殊情況下，如出現(xiàn)某些非典型的抗體反應(yīng)，特別是不確定反應(yīng)時(shí)，RNA的測(cè)定可提供有用的證據(jù)。?感染早期：在HIV感染的窗口期，無法使用抗體檢測(cè)進(jìn)行診斷，此時(shí)RNA的測(cè)定具有特殊的意義，提示是否有感染的可能，但仍需追蹤檢測(cè)HIV抗體，最終根據(jù)抗體的檢測(cè)情況做出診斷。?病程監(jiān)控：幫助確定疾病發(fā)展的階段。?指導(dǎo)治療方案及療效測(cè)定?預(yù)測(cè)疾病進(jìn)程我國(guó)常用

3、的HIV抗體檢測(cè)試劑?HIV抗體篩查試劑?酶聯(lián)免疫：初篩實(shí)驗(yàn)室的常用基本試劑。?明膠顆粒凝集?其它快速診斷試劑：在尚未建立艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室的偏遠(yuǎn)地區(qū)由經(jīng)過培訓(xùn)的技術(shù)人員在規(guī)定的場(chǎng)所使用。?HIV抗體確認(rèn)試劑?免疫印跡試劑快速檢測(cè)試劑的優(yōu)缺點(diǎn)硒標(biāo)記法和金標(biāo)記法與ELISA相比?優(yōu)點(diǎn)所需時(shí)間短操作簡(jiǎn)便，不需特殊設(shè)備。試劑貯存于室溫。?缺點(diǎn)特異性和敏感性與ELISA有差距。費(fèi)用較高。HIV抗體檢測(cè)程序及流程圖1、篩查試驗(yàn)標(biāo)本驗(yàn)收合格后，用篩查試劑進(jìn)行檢測(cè)，如呈陰性反應(yīng)，報(bào)告為HIV抗體陰性；對(duì)呈陽性反應(yīng)的標(biāo)本須進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)。2、重復(fù)檢測(cè)用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的試劑

4、重復(fù)檢測(cè)，如兩種試劑復(fù)測(cè)均呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告HIV抗體陰性；如均呈陽性反應(yīng)，或一陰一陽，需送艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確認(rèn)。3、篩查試驗(yàn)的流程圖樣品篩查檢測(cè)篩查試劑陽性反應(yīng)重復(fù)檢測(cè)均陽性反應(yīng)一陰一陽送確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確認(rèn)均陰性反應(yīng)陰性報(bào)告陰性反應(yīng)原有試劑加另一種篩查試劑HIV抗體篩查結(jié)果的報(bào)告和處理?篩查試驗(yàn)呈陰性反應(yīng)，出具HIV抗體陰性報(bào)告（提示應(yīng)考慮窗口期的可能）。?篩查試驗(yàn)呈陽性反應(yīng)，可出具“HIV待復(fù)查”報(bào)告，不能出陽性報(bào)告。同時(shí)盡快進(jìn)行以下處理：?填寫HIV陽性標(biāo)本送檢單，并隨標(biāo)本送至當(dāng)?shù)睾Y查中心實(shí)驗(yàn)室，或直接送確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室。?篩查中心實(shí)驗(yàn)室應(yīng)盡快用兩種試劑進(jìn)行復(fù)測(cè)，如結(jié)果

5、均陽性或一陰一陽，則應(yīng)將該標(biāo)本和送檢單一并送至省艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)。?陽性標(biāo)本必須送省確認(rèn)中心，篩查實(shí)驗(yàn)室不能隨意處理。?做好檢測(cè)后的咨詢結(jié)果的解釋問題:HIV抗體檢測(cè)結(jié)果陰性是否表明未感染?對(duì)不確定結(jié)果如何解釋?怎么樣知道嬰兒是否感染了HIV?HIV抗體初篩檢測(cè)結(jié)果解釋?陰性(1)未感染HIV(2)可能感染了HIV,但處于窗口期,或HIV-1/2抗體和HIV-1O亞型抗體低于檢測(cè)下限。(3)疾病晚期,免疫功能缺損,抗體可能呈陰性.?確認(rèn)陽性感染了HIV,樣品含有HIV-1/2抗體和HIV-1O亞型抗體(未滿18個(gè)月的嬰兒除外).?不確定:建議追蹤檢測(cè).HIV抗體初篩檢測(cè)

6、結(jié)果解釋?什么是不確定結(jié)果？HIV抗體確認(rèn)試驗(yàn)時(shí),試驗(yàn)條帶上出現(xiàn)的蛋白帶型不足以判斷為HIV抗體陽性,應(yīng)建議其3個(gè)月后復(fù)查.?如果復(fù)查結(jié)果陽轉(zhuǎn),表明受檢者已感染HIV;?如復(fù)查時(shí)條帶全部消失,則為陰性結(jié)果;?如復(fù)查時(shí)條帶沒有變化或有變化但仍不足以判斷為陽性,則應(yīng)建議其3個(gè)月后再復(fù)查一次,如還不能判斷為陽性結(jié)果,則應(yīng)作為陰性對(duì)待.HIV抗體初篩檢測(cè)結(jié)果解釋造成檢測(cè)結(jié)果不確定的原因(1)處于窗口期,血清中還沒有形成典型的HIV抗體。(2)艾滋病進(jìn)展到終末期,人體免疫力缺陷,抗體水平下降。(3)與其他非病毒蛋白抗體有交叉反應(yīng).自身免疫性疾病、惡性腫瘤、懷孕、輸血或器官移殖等，此時(shí)

7、，身體產(chǎn)生的一些抗體與Ｐ２４核心蛋白抗體相似。(4)以前接種過HIV疫苗。HIV抗體初篩檢測(cè)結(jié)果解釋如何判斷嬰兒是否感染了HIV？通過胎盤，感染了HIV的母親所生的嬰兒可能帶有來自母體的HIV抗體，此時(shí)HIV抗體檢測(cè)陽性并不意味著已被感染。?建議在嬰兒9個(gè)月時(shí)進(jìn)行HIV初篩檢測(cè)如陰性，則判定為未感染HIV。如陽性，則應(yīng)在嬰兒18個(gè)月時(shí)進(jìn)行復(fù)檢陰性：判定為未感染。陽性：則將血樣送至省CDC確認(rèn)中心進(jìn)行HIV抗體的確認(rèn)試驗(yàn)。HIV抗體初篩檢測(cè)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzymelinkedimmunosorbentassay