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《黑曲霉胺氧化酶的制備及降解生物胺的研究》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、本論文以黑曲霉誘導(dǎo)產(chǎn)生胺氧化酶的提取條件、酶學(xué)性質(zhì)和對生物胺降解為主要研究內(nèi)容。胺氧化酶屬于胞內(nèi)酶,細(xì)胞破碎優(yōu)化條件為:破碎總時間7min,功率為180w,間隔時間為15s,菌絲濃度為10%o采用硫酸鍍鹽析的飽和度為55%,并透析獲得粗酶液。研究了黑曲霉胺氧化酶粗酶液的酶學(xué)性質(zhì):最適溫度為30°C,最適pH為7.0;酶穩(wěn)定性為:在20°C?30°C條件下有良好的穩(wěn)定性,30°C以上穩(wěn)定性較差;在pH6.3?7.8之間范圍內(nèi)具有良好的pH穩(wěn)定性(殘余酶活在83%以上)。黑曲霉胺氧化酶對8種生物胺(尸胺,腐胺,酪胺,苯乙胺,組胺,色胺,精胺,亞精胺)的降解特異行為
2、:腐胺的降解率達(dá)到了95%,其次是酪胺,達(dá)到了73%;對醬油樣品中總生物胺的降解率達(dá)到了69.50%。關(guān)鍵詞:黑曲霉;胺氧化酶;酶學(xué)性質(zhì);生物胺AbstractThispaperresearchedtheoptimumconditionofextraction,enzymaticpropertiesandsubstratespecificityofAspergillusNiger.Dueingtothattheamineoxidaseisintracellularenzyme,wefoundtheconditioncelldisruptortobe:theto
3、taltime7min,thedisruptionpower180w,theintervaltimeofdisruptionprocesswas15s,mycelialconcentrationis10%.theconcentrationofammoniumsulfateusingforsalting-outwas55%..TheCrudeamineoxidasefromA.Nigerwasobtairi?Enzymologypropertiesasfollows:theoptimumtemperaturewas30°C,theoptimumpHwas7.0;
4、Theenzymewasstablein20°C?30°Candunstableintheconditionofover30°C;thisenzymehadbetterpHstabilitybetweenpH6.3-7.8(residualenzymeactivityinmorethan83%).AccordingtotheresultofexperimentwefindthattheamineoxidasethatinducesA.Nigerhasabetterdegradatingabilityto8kindsofbiogenicaminesamongth
5、efbod(putrescine,cadaverine,tyramine,phenethylamine,histamine,tryptamine,spermine,spermidine).thedegradatingabilitytoputrescinereaches95%,thesecondwastotyramine,reaches73%,thedegradationabilitytothecadaverinewasmostweak,only17%.Thedegradatingabilitytotherestoffivekindsofbiogenicamin
6、eswerebetween33%and45%.Keywords:AspergillusNiger;Amineoxidase;Enzymaticproperty;biogenicaminesAbstractIII1.1生物胺的簡述11.1.1生物胺的理化性質(zhì)11.1.2生物胺的形成11」?3生物胺的毒性11.2食品中的生物胺21.2.1肉及肉制品21.2.2水產(chǎn)品及其希1J品41.3生物胺的消除41.4研究目的和意義5二材料與方法62.1實驗材料62.1.1材料與試劑62.1.2儀器與設(shè)備62.2實驗方法62.2.1黑曲霉培養(yǎng)62.2.2酶活測定62.2.3酶提
7、取條件的優(yōu)化72.2.4胺氧化酶酶學(xué)性質(zhì)研究82.2.5底物特異性和醬油生物胺降解92.2.6高效液相色譜(HPLC)分析9三結(jié)果與分析113.1酶提取條件的優(yōu)化113.1.1超聲提取吋間的影響113.1.2超聲提取功率的影響113.1.3超聲頻率對酶活的影響123.1.4菌絲濃度的影響133.1.5粗酶液的鹽析133.2胺氧化酶粗酶液酶學(xué)性質(zhì)143.2.1胺氧化酶粗酶液最適溫度143.2.2胺氧化酶的最適pH143.2.3胺氧化酶溫度穩(wěn)定性153.2.4胺氧化酶pH穩(wěn)定性153.2.5金屬離子對胺氧化酶酶活的影響163.2.6酶抑制劑對胺氧化酶酶活的影響17
8、3.2.7鹽水濃度對胺氧化酶酶活的影響