GB7918.2-1987 化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法 細(xì)菌總數(shù)測定 - 下載地址.pdf

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1、中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)UDC668.58:576化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法.85.07細(xì)菌總數(shù)測定GB7918.2一87StandardmethodsofmicrobiologicalexaminationforcosmeticsStandardnlatecount細(xì)菌總數(shù)系指18或1ml化妝品中所含的活菌數(shù)量。測定細(xì)菌總數(shù)可用來判明化妝品被細(xì)菌污染的程度，以及生產(chǎn)單位所用的原料、工具設(shè)備、工藝流程、操作者的衛(wèi)生狀況，是對化妝品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評價的綜合依據(jù).本標(biāo)準(zhǔn)采用標(biāo)準(zhǔn)平板計數(shù)法。1方法提要化妝品中污染的細(xì)菌種類不同.每種細(xì)菌都有它

2、一定的生理特性，培養(yǎng)時對營養(yǎng)要求.培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時間、pH值、需氧性質(zhì)等均有所不同。在實際工作中，不可能做到滿足所有菌的要求，因此所測定的結(jié)果，只包括在本方法所使用的條件下(在卵磷脂、吐溫80營養(yǎng)瓊脂上，于37℃培養(yǎng)48h)生長的一群嗜中溫的需氧及兼性厭氧的細(xì)菌總數(shù)。2培養(yǎng)基和試荊2.1生理鹽水:見GB7918.1-87《化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法總則》。2.2卵磷脂、吐溫80一營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基成分:蛋白陳20g牛肉膏3g氯化鈉5g瓊脂15g卵磷月旨1g吐溫807g蒸餾水1000m1制法:先將卵磷脂加到少量蒸餾水中，加熱溶解，加入吐

3、溫80將其他成分(除瓊脂外)加到其余的蒸餾水中，溶解.加入已溶解的卵磷脂、吐溫80,混勻，調(diào)pH值為7.17.4，加入瓊脂，121'C(151b)20min高壓滅菌，儲存于冷暗處備用。3儀器3.1錐形燒瓶。3。2量筒。3.3pH計或精密pH試紙。3.4高壓消毒鍋。中華人民共和國衛(wèi)生部1987一05一28批準(zhǔn)1987一10一01實施.www.bzxzk.com.GB7918.2一873.5試管。3.6滅菌平皿:直徑9cm,3.7滅菌刻度吸管:10ml,2m1,lml,3.8酒精燈。3.9恒溫培養(yǎng)箱。3.10放大鏡。4操作步軟4.1

4、用滅菌吸管吸取I:10稀釋的檢樣2ml，分別注入到兩個滅菌平皿內(nèi)，每皿]ml。另取lml注入到9m1滅菌生理鹽水試管中(注意勿使吸管接觸液面).更換一支吸管，并充分混勻，使成I:100稀釋液。吸取2ml，分別注入到兩個滅菌平皿內(nèi).每皿lml。如樣品含菌量高.還可再稀釋成1:1000,1:10000,?等.每種稀釋度應(yīng)換1支吸管.4.2將熔化并冷至45^50℃的卵磷脂、吐溫80、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾注平皿內(nèi)，每皿約15ml，另傾注一個不加樣品的滅菌空平皿，作空白對照。隨即轉(zhuǎn)動平皿，使樣品與培養(yǎng)荃充分混合均勻，待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平皿，置

5、37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h,5菌落計數(shù)方法先用肉眼觀察，點數(shù)菌落數(shù)，然后再用放大5^-10倍的放大鏡檢查，以防遺漏。記下各平皿的菌落數(shù)后。求出同一稀釋度各平皿生長的平均菌落數(shù)。若平皿中有連成片狀的菌落或花點樣菌落蔓延生長時，該平皿不宜計數(shù)。若片狀菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落數(shù)分布又很均勻，則可將此半個平皿菌落計數(shù)后乘2，以代表全皿菌落數(shù).6菌落計擻及報告方法6.1首先選取平均菌落數(shù)在30-300之間的平皿，作為菌落總數(shù)側(cè)定的范圍。當(dāng)只有一個稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍時.即以該平皿菌落數(shù)乘其稀釋倍數(shù)(見表中例1),6.2

6、若有兩個稀釋度，其平均菌落數(shù)均在30-300個之間，則應(yīng)求出兩者菌落總數(shù)之比值來決定。若其比值小于或等于2，應(yīng)報告其平均數(shù)，若大于2則報告其中較小的菌落數(shù)(見表中例2及例3),6.3若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300個，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表中例4).6.4若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均少于30個，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表中例5),6.5若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30^-300個之間，其中一個稀釋度大于300個，而相鄰的另一稀釋度小于30個時，則以接近30或300的平均

7、菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表中例6),6.6若所有的稀釋度均無菌生長，報告數(shù)為每克或每毫升小于10個.6.7菌落計數(shù)的報告，菌落數(shù)在10以內(nèi)時，按實有數(shù)值報告之，大于100時.采用二位有效數(shù)字，在二位有效數(shù)字后面的數(shù)值，應(yīng)以四舍五入法計算。為了縮短數(shù)字后面零的個數(shù)，可用10的指數(shù)來表示(見下表報告方式欄)。在報告菌落數(shù)為“不可計”時，應(yīng)注明樣品的稀釋度。.www.bzxzk.com.GB7918.2一87細(xì)菌計數(shù)結(jié)果及報告方法不同稀釋度的平兩稀釋例曲落總數(shù)報告方式均菌落數(shù)度菌致次個/9或個/ml個/9或個/m1之比10-'10

8、-110-'11365164201640016000或1.6X10'22760295463800038000或3.8X10'3289027160;.:2710027000或2.7X10'4不可計4650513513000510000或5.1X10'5271152