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《CD34陽性細(xì)胞絕對計(jì)數(shù)的流式細(xì)胞術(shù)測定指南》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)蟲堡魚絲堂苤盍2Q!』生Z爿筮3§鲞箍!翦￡bj!』旦!坐!!Q!：血!Y2Q!§：!型：3§：盟Q：ZCD34陽性細(xì)胞絕對計(jì)數(shù)的流式細(xì)胞術(shù)測定指南中國免疫學(xué)會血液免疫分會，】盞床流式細(xì)胞術(shù)學(xué)組TheguidelinesforabsolutecountofCD34+celldeterminationbyflowcytometryBloodImmuneCommittee,ChineseSocietyofImmunology,ClinicalFlowCytometryGroupCorrespondingauthor：LiuYanrong,PekingUniversit
2、yPeople’SHospital,Beo'ing100044，China，Email：yrliul63@163．corn；ShaoZonghong,DepartmentofHematology,GeneralHospital,TianjinMedicalUniversity,Tiat驢in300052，China，Email．"shaozonghong@sina．com，’WanSuigui,DepartmentofHematology,XuanwuHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100053，China，Email．Ⅵ
3、，以咒s“j岔uigDhotmail．COrn造血干細(xì)胞移植(HSCT)是治療血液系統(tǒng)疾病、自身免疫性疾病、某些實(shí)體瘤和基因缺陷疾病的重要手段之一。在HSCT的過程中，采集足夠數(shù)量的造血干細(xì)BB(Hsc)是HSCT成功的關(guān)鍵。但至今為止，尚無一個(gè)與體內(nèi)重建造血完全吻合的HSC體外檢測法。早期，人們通過有核細(xì)胞計(jì)數(shù)、集落形成單位(CFU)來計(jì)算移植物中HSC／造血祖細(xì)胞(HPC)數(shù)量，但前者與HSC數(shù)量一致性差，后者實(shí)驗(yàn)變異性大、耗時(shí)長，其臨床實(shí)用性大大減弱。20世紀(jì)80年代，CD34分子在造血祖細(xì)胞上表達(dá)的發(fā)現(xiàn)，為臨床HSCT提供了可評估植入最低閾值的強(qiáng)有力工具。盡管近年
4、來體外研究表明，人類CD34陰性臍血組分也有造血活性，然而大量的臨床研究證實(shí)用富含CD34+細(xì)胞組分移植可安全、持久地獲得多系造血重建o。2。。因此，目前臨床及實(shí)驗(yàn)室仍然是應(yīng)用CD34+細(xì)胞進(jìn)行HSCT、基因轉(zhuǎn)染和HPC擴(kuò)增，而流式細(xì)胞術(shù)計(jì)數(shù)CD34+細(xì)胞因具有快速、簡便、可定量等特點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于移植物中HSC／HPC數(shù)量的檢測及確定采集時(shí)機(jī)等D-5】。流式細(xì)胞DOI：1O．3760／cma,jissn．0253—2727．201507．002通信作者：劉艷榮，Email：yrliul63@163corn；邵宗鴻，Ernailshaozonghong@sinacorn；
5、7穢桂．Email：wansuigui@hotmailtom·標(biāo)準(zhǔn)與討論·術(shù)計(jì)數(shù)CD34+細(xì)胞經(jīng)歷了從單參數(shù)到多參數(shù)分析、從雙平臺到單平臺計(jì)數(shù)、從各實(shí)驗(yàn)室自由抗體組合到商業(yè)化試劑盒應(yīng)用等一系列的演變。1995年血液病治療與移植國際聯(lián)合會(InternationalSocietyofHematotherapyandGraftEngineering，ISHAGE)成立了干細(xì)胞計(jì)數(shù)小組，致力于尋求一種快速、簡便、敏感、對不同的流式細(xì)胞儀都有效的流式細(xì)胞術(shù)CD34+細(xì)胞計(jì)數(shù)方法。1996年ISHAGE采納了Sutherland等提出的CD45／CD34雙色標(biāo)記多參數(shù)累積設(shè)門的方法
6、，被命名為ISHAGE方案b]。ISHAGE方案等雙平臺計(jì)數(shù)法先通過流式細(xì)胞術(shù)分析得出CD34+細(xì)胞百分比，再結(jié)合血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)的白細(xì)胞數(shù)得出CD34+細(xì)胞絕對數(shù)。不同實(shí)驗(yàn)室間的血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀可能存在一定的系統(tǒng)誤差，洗滌過程中易造成某些細(xì)胞成分的丟失，因此雙平臺CD34+細(xì)胞計(jì)數(shù)法在不同實(shí)驗(yàn)室間存在很大的變異性¨：。單平臺CD34+細(xì)胞計(jì)數(shù)法是在計(jì)數(shù)管中加入已知數(shù)量的熒光微球，采用流式細(xì)胞術(shù)獲取CD34+細(xì)胞百分比的同時(shí)，根據(jù)獲取的已知密度的熒光微球數(shù)來計(jì)算出CD34+細(xì)胞絕對數(shù)。單平臺計(jì)數(shù)法裂解紅細(xì)胞后不需洗滌，不需要采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)白細(xì)胞，因此系統(tǒng)誤差小，被認(rèn)為是
7、首選的CD34+細(xì)胞計(jì)數(shù)方法b。?。元論是ISHAGE方案還是單平臺流式細(xì)胞術(shù)CD34+細(xì)胞計(jì)數(shù)法都需要多參數(shù)累積設(shè)門，技術(shù)要求高。國外室間質(zhì)量評估資料顯示各實(shí)驗(yàn)室間的CD34+細(xì)胞計(jì)數(shù)仍存在很大的差異，分析其原因包括未按照要求設(shè)置各散點(diǎn)圖窗口；隨意增減散點(diǎn)圖的數(shù)量和改變散點(diǎn)圖的分析參數(shù)；未注意設(shè)定閾值的參數(shù)等。?。不同廠家的試劑盒、不同的分析方案、單平臺還是雙平臺、溶血洗滌法還是溶血免洗法以及流式細(xì)胞儀的型號等對CD34+細(xì)胞計(jì)數(shù)的結(jié)果可能會有一定的影響”0：。為保證各實(shí)驗(yàn)室CD34+細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果的可靠性和可比性，中國免疫學(xué)
