ATP熒光檢測系統(tǒng)使用說明書

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1、ATP熒光法微生物（細(xì)菌總數(shù)）快速檢測系統(tǒng)使用說明書第一部分ATP熒光法微生物（細(xì)菌總數(shù)）快速檢測系統(tǒng)簡介1、系統(tǒng)原理32、組成部件及相關(guān)功能33、應(yīng)用領(lǐng)域、特點、效益44、檢測注意事項及操作步驟45、ATP快檢系統(tǒng)使用注意事項及故障排除76、對應(yīng)關(guān)系曲線87、有關(guān)食品安全和衛(wèi)生檢測的問答9第二部分ATP熒光法微生物（細(xì)菌總數(shù)）快速檢測系統(tǒng)使用說明1、技術(shù)參數(shù)及性能122、儀器操作說明132.1開機(jī)、初始化132.2參數(shù)設(shè)置132?2?1選擇RLU方式142.2.2選擇其它樣品名方式142.2.3設(shè)置文件類型152.2?4設(shè)置日期時間1

2、62.2.5設(shè)置檢測時間162.2.6U盤格式化162.3測試162.4查詢172.4.1查詢測試結(jié)果172.4.1.1刪除測試結(jié)果182.4.1.2刪除文件182.4.2查詢文件信息192.4.3查詢儀器信息192.4.4查詢電池電量192.4.5快速查詢192.5通訊213、上位機(jī)軟件223.1軟件安裝223?2驅(qū)動程序的安裝253?3軟件啟動273?4軟件運行283?5樣品及回歸方程設(shè)定292.6“文件名”說明302.7文件、記錄操作和數(shù)據(jù)庫314、電池充電325、保修32第一部分ATP熒光法微生物（細(xì)菌總數(shù)）快速檢測系統(tǒng)簡介1、

3、系統(tǒng)原理螢火蟲會發(fā)光是由于它能合成將化學(xué)物質(zhì)的化學(xué)能轉(zhuǎn)變?yōu)楣饽艿纳锎呋瘎灮鹣x熒光素酶(簡稱蟲光素酶，luciferase)、蟲熒光素(DJuciferin)以及所有細(xì)胞生物都產(chǎn)生的生物能量物質(zhì)一三磷酸腺昔(ATP)o在有氧的條件下，蟲光素酶催化蟲熒光素和ATPZ間發(fā)生氧化反應(yīng)，形成氧化熒光素并發(fā)出熒光，其生化反應(yīng)式如下：ATP+D-Luciferin+O2—>AMP+Oxyluciferin+PPi+C02+LightLuciferase上式表明，只要具備適當(dāng)條件，不僅螢火蟲，即使在試管中也能發(fā)出熒光。當(dāng)反應(yīng)系統(tǒng)屮，蟲光素酶和蟲熒

4、光素處于過量的情況下，熒光的強(qiáng)弱取決于ATP的數(shù)量。以檢測含細(xì)菌的樣品為例，細(xì)菌細(xì)胞越多，ATP量越高，發(fā)岀的熒光也就越強(qiáng)。由于蟲光素酶對ATP的反應(yīng)非常靈敏，熒光強(qiáng)弱可通過熒光儀10?15秒內(nèi)計量。所以，在排除樣品中非細(xì)菌ATP干擾的情況下，通過熒光值就能確定樣品中細(xì)菌ATP的含量，從而確定細(xì)胞數(shù)量，因此，此系統(tǒng)為半定量快速檢測系統(tǒng)。2、組成部件及相關(guān)功能2.1試劑組，按檢測操作順序分為：(1)體細(xì)胞裂解試劑(TRA),能專一而有效地裂解樣品中的非細(xì)菌細(xì)胞(體細(xì)胞)并釋出ATP,然后，通過過濾比色杯底部的濾膜將其排除。(2)細(xì)菌細(xì)胞裂

5、解試劑(XRA),能專一而有效地裂解樣品中細(xì)菌細(xì)胞并釋出ATPo(3)熒光反應(yīng)試劑組(LLR),能與樣品中的細(xì)菌ATP相互作用并有效地發(fā)出熒光。2.2微量熒光檢測儀(也稱微量光度計)，準(zhǔn)確計量檢樣的熒光值。2.3可供100次測定的樣品預(yù)處理耗材。(1)放置過濾比色杯的杯架一個。(2)加壓器一個，用于加壓、排出體細(xì)胞ATP和試劑組。(3)帶濾膜熒光反應(yīng)比色杯100個，為熒光反應(yīng)容器。(4)專用無菌吸水紙，置于過濾比色杯架，吸收加壓后流出的液體。(5)帶密封圈專用無菌濃縮器，用于濃縮樣品。（6）自備微生物學(xué)無菌操作所需常規(guī)用具、器皿，樣品采

6、集無菌、無ATP的容器、塑料袋、手套、銀子等。3、應(yīng)用領(lǐng)域、特點、效益使用ATP熒光法細(xì)菌快檢儀實施食品、飲料、乳品加工等全程衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測生產(chǎn)程序監(jiān)測內(nèi)容加工生產(chǎn)前生產(chǎn)設(shè)施清潔、消毒效果檢測，原、輔料細(xì)菌總數(shù)檢測，以保障原料質(zhì)量或明確原料品質(zhì)級別。加工生產(chǎn)過程中生產(chǎn)設(shè)備關(guān)鍵控制點（例如供水、通風(fēng)閥門）衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測，影響乳品發(fā)酵飲料、酒類特殊微牛物總數(shù)檢測。加工生產(chǎn)后制成品污染細(xì)菌總數(shù)檢測。廢棄物排放、環(huán)境、人員衛(wèi)生學(xué)及細(xì)菌總數(shù)檢測。4、檢測注意事項及操作步驟4.1試劑的準(zhǔn)備和注意事項：4.1.1本公司提供的“ATP熒光法細(xì)菌總數(shù)快檢系統(tǒng)”所

7、含試劑組和微量熒光檢測儀需匹配使用，不可用其它試劑替代。4.1.2LLR試劑（含螢火蟲熒光素酶和D■熒光素）應(yīng)在冰箱冷凍室?20°C中貯存,有效期6個月。LLR試劑組易變質(zhì)，室溫下不得超過8小時，在0?4°C有效期為3天。4」.3試劑（LLR）在用于檢測前按規(guī)定低溫存放，檢測前20分鐘取出平衡到室溫方可應(yīng)用。如果超過有效期，應(yīng)棄用，重新購置。體細(xì)胞裂解試劑（TRA）及細(xì)菌細(xì)胞裂解試劑（XRA）4°C保存。4.1.4檢測應(yīng)按微牛物學(xué)常規(guī)無菌操作程序進(jìn)行，并切實注意螢火蟲熒光素酶對ATP極其敏感，生物材料容易引起ATP交叉污染的特性，才能取

8、得準(zhǔn)確、真實的檢測數(shù)據(jù)。檢測樣品的預(yù)處理：（操作過程中需配戴一次性無菌手套）4.2.1固體樣品處理：無菌操作稱取25g被檢固體樣晶溶于225mlPBS溶液（磷酸鹽緩沖液，GB/T4789.28-2003中3