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《兩種方法分離小鼠脾原始T淋巴細胞效果比較》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、·540·ChinaTropicalMedicineMay2013Vol.13No.5中國熱帶醫(yī)學(xué)2013年第13卷第5期·論著·兩種方法分離小鼠脾原始T淋巴細胞效果比較*陳嶸祎，阿彩嶺，周英，樊翌明摘要：目的比較Ficoll-Paque梯度離心法與免疫磁珠法分離T淋巴細胞的效果差異，篩選有效的、優(yōu)異的分選小鼠脾原始T淋巴細胞方法。方法分別采用Ficoll-Paque梯度離心法及MiltenyiBiotec免疫磁珠進行小鼠淋巴細胞分離。血小板計數(shù)器統(tǒng)計單核淋巴細胞數(shù)，苔盼藍染色判斷細胞存活率，流式細胞術(shù)鑒定CD4+CD62
2、+T淋巴細胞純度，并進行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果免疫磁珠法CD4+CD62+T淋巴細胞純度較高為（66.27±3.52）%，F(xiàn)icoll-Paque梯度離心法細胞純度為（15.27±4.16）%，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）；但Ficoll-Paque梯度離心法獲取淋巴細胞數(shù)（1.47±0.35）×108較免疫磁珠法的（0.67±0.26）×108多，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=8.199，P<0.01），且Ficoll-Paque梯度離心法細胞存活率（93.9±2.6）%較免疫磁珠法的（89.9±2.9）%高，兩者
3、比較差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論免疫磁珠法適合分離小鼠脾原始T淋巴細胞并用于細胞純度要求高的免疫學(xué)實驗，但細胞得率需進一步優(yōu)化。關(guān)鍵詞：鼠；免疫磁珠；淋巴細胞分離；梯度離心中圖分類號：R332文獻標識碼：A文章編號：1009-9727（2013）5-540-04ComparisonofisolationofprimaryspleencellsinmicebyusingFicoll-Paquegradientcntrifugationandimmunomagneticbead.CHENRong-yi，ACai-l
4、ing，ZHOUYing，etal.（AffiliatedHospitalofGuangdongMedicalCollege，Zhanjiang524023，Guangdong，P.R.China；Correspondingauthor:FANYi-ming，Ymfan1963@163.com）Abstract：ObjectiveTocomparetheeffectofisolationofT-lymphocyteofmicebyFicoll-Paquegradientcentrifugationandimmunomagn
5、eticbeadmethod.MethodsFicoll-PaquegradientcentrifugationandMiltenyiBiotecimmunemagneticbeadswereusedforisolationofTlymphocyteinmice.Cellnumberwerecalculatedbyplateletcounter，cellsurvivalratewasjudgedbytrypanbluedyeing，CD4+CD62L+Tlymphocytepuritywasdetectedbyflowcy
6、tometry.ResultsThepurityofCD4+CD62L+Tlymphocyteintheimmunemagneticbeadmethodgroupwashigher（66.27±3.52%），andlowerinFicoll-Paquegradientcentrifugationgroup（15.27±4.16%），showingsignificantdifference（P<0.01），butlymphocytecountinFicoll-Paquegradientcentrifugationgroup（
7、1.47±0.35×108）wasmorethanimmunemagneticbeadgoup（0.67±0.26×108）showingsignificantdifference（t=8.199，P<0.001）.Inaddition，thecellsurvivalrateinFicoll-Paquegradientcentrifugationgroup（93.9±2.6%）washigherthanimmunomagneticbeadgroup（89.9±2.9%）alsoshowingsignificantdiffe
8、rence（P<0.05）.ConclusionsImmunomagneticbeadmethodissuitableforcellpuritydemandingimmunologicalexperimentonconditionthatfurtheroptimizationofthecellyield
