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《銨態(tài)氮消態(tài)氮測定》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、6.1.3土壤中銨態(tài)氮的測定6.1.3.1靛酚藍比色法1.方法選擇測定土壤銨態(tài)氮，主要有直接蒸餾法、浸提后測定法和擴散吸收法等。直接蒸餾法是在氧化鎂存在下直接蒸餾土壤，但此法在弱堿蒸餾時仍可能使一些簡單的有機氮微弱水解成氨氣蒸出，易使結(jié)果偏高。浸提后測定法多采用中性鹽(硫酸鉀、氯化鉀、氯化鈉等)浸提土壤，土壤溶液中的NH4+，可選用蒸餾、比色、或氨電極法測定。浸提蒸餾法的操作簡便，易于控制條件，適合于NH4+含量較多的土壤。氨氣敏電極法測定土壤中的NH4+，操作簡便，快速，靈敏度高，重復性和測定范圍后很好，但儀器的質(zhì)量必須可靠。在這里我們詳細介紹浸提比色法和擴散吸收法。比
2、色法有多種，這里介紹靛酚藍比色法。靛酚藍比色法的靈敏度和準確度高，適用于大批樣品自動化分析（本法測定范圍0.05~0.5mg·L-1銨態(tài)氮）。擴散吸收法利用氧化鎂水懸液的弱堿性，交換吸附在土壤膠體上的銨態(tài)氮，不致破壞土壤礦質(zhì)部分。此法適用于各種類型土壤樣品的測定，特別是對于還原性強的沼澤土和潛育土，可省去消除還原性物質(zhì)的手續(xù)，同時，由于擴散吸收法不須蒸餾裝置，設備簡單，適用于大批樣品的分析（本法測定范圍50~300μg銨態(tài)氮）。2.基本原理土壤浸出液中的NH4+在強堿性介質(zhì)中與次氯酸鹽和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚藍，溶液的藍色很穩(wěn)定，在NH4+濃度為0.05~0.5mg
3、·L-1范圍內(nèi)，其深淺與NH4+含量成正比。3.主要儀器及試劑主要儀器：振蕩機；分光光度計。主要試劑：（1）2mol·L-1KCl溶液：稱取149.1g氯化鉀（KCl，化學純）溶于水中，稀釋至1L。（2）苯酚溶液：稱取10g苯酚（C6H5OH，化學純）和100mg硝基鐵氰化鈉（硝普鈉）[Na2Fe（CN）5NO·2H2O]稀釋至1L【1】。此試劑不穩(wěn)定，須貯于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。（3）次氯酸鈉堿性溶液：稱取10g氫氧化鈉（NaOH，化學純），7.06g磷酸氫二鈉（Na2HPO4·7H2O，化學純），31.8g磷酸鈉（Na3PO4·12H2O，化學純）和52.5g·
4、L-1次氯酸鈉（NaOCl，化學純，即含5%有效氯的漂白粉溶液）10mL溶于水中，稀釋至1L，貯于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。（4）掩蔽劑：將400g·L-1的酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O6·4H2O，化學純）與100g·L-1的EDTA二鈉鹽（C10H14O8N2Na2，化學純）溶液等體積混合。每100mL混合液中加入0.5mL10mol·L-1氫氧化鈉，即得清亮的掩蔽劑溶液。（5）5μg·mL-1銨態(tài)氮（NH4+-N）標準溶液：稱取0.4717g干燥的硫酸銨[(NH4)2SO4，分析純]溶于水中，定容至1L，制備成含銨態(tài)氮（N）100μg·mL–1的貯存溶液；使用前將
5、其加水稀釋20倍，即配制成含銨態(tài)氮（N）5μg·mL–1的標準溶液備用。4.操作步驟（1）NH4+浸提【2】：稱取10.00g新鮮土樣（若是風干土，過10號篩）準確到0.01g【3】，置于200mL三角瓶中，加入2mol·L-1氯化鉀溶液100mL，塞緊塞子，在振蕩機上振蕩1h。取出靜置過濾，待土壤—氯化鉀懸濁液澄清后，吸取一定量上層清液進行分析。如果不能在24h內(nèi)進行，用濾紙過濾懸濁液，將濾液儲存在冰箱中備用。同時測定土壤水分含量。（2）比色：吸取土壤浸出液1，2mL~10mL（含NH4+-N2μg～25μg）放入50mL容量瓶中，用氯化鉀溶液補充至10mL，用水稀釋至
6、30mL，然后依次加入苯酚溶液5mL和次氯酸鈉堿性溶液5mL，搖勻。在室溫（20℃左右【4】）下放置1h后【5】，加掩蔽劑1mL以溶解可能產(chǎn)生的沉淀物，然后用水定容至刻度。2h后，用1cm比色槽在625nm波長處進行比色，讀取吸光度。同時做兩個試劑空白試驗。（3）工作曲線的繪制：分別吸取0，0.5，1，2，3，4，5mLNH4+-N標準液于50mL容量瓶中，各加10mL氯化鈉溶液，同（2）步驟進行比色測定。得到濃度為0，0.05，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5mg·L-1NH4+-N溶液。5.結(jié)果計算W（N）式中：W（N）——土壤中NH4+-N的含量，mg·kg-
7、1；c——顯色液銨態(tài)氮的質(zhì)量濃度，μg·mL–1；V——顯色液的體積，mL；ts——分取倍數(shù)，[ts]；m——樣品質(zhì)量，g；K2——土樣換算為烘干土樣的水分換算系數(shù)。6.注意事項【1】硝普鈉是顯色反應的催化劑，能加速顯色，并增強藍色及顏色的穩(wěn)定性，但硝普鈉是劇毒藥品，使用時應注意安全?！?】靛酚藍比色法測定NH4+，也可用測定NO3-時的土壤浸出液，從而節(jié)省操作步驟，測定結(jié)果可能稍有差異?！?】土樣經(jīng)風干或烘干后可能引起NH4+含量的變化，所以，稱樣以新鮮土樣為好。若以干土計算，應同時測定含水量后換算?！?】顯色后在20℃左右
