【精品】山羊痘的分離與鑒定

【精品】山羊痘的分離與鑒定

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1、中英文摘耍1綜述2一.病原學(xué)2—.流行特點(diǎn)2三?癥狀類型2四?臨床癥狀以及病理剖檢變化3五?組織學(xué)檢查3正文41?病例背景41.1病變圖片42.實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)52」實(shí)驗(yàn)材料52.2實(shí)驗(yàn)方法5221病料處理52.2.2病毒培養(yǎng)62.2.3電鏡觀察6224病毒滴度測定62.2.5瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散(AGID)試驗(yàn)62.2.5」AGID抗原制備62.2.5.2瓊脂平板的制備62.2.5.3制備抗原的特異性測定62.3結(jié)果72.3.1細(xì)胞培養(yǎng)病變觀察72.3.2細(xì)胞病變形成特性的觀察72.3.3病毒形態(tài)的電鏡觀察82.3.4病毒滴度測定82.3.5瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散(AGID)試驗(yàn)93.小結(jié)與討

2、論9致謝10參考文獻(xiàn)10山羊痘病毒的分離與鑒定撰寫人:譚賢魁指導(dǎo)老師:孟霞甘軍紀(jì)摘要:本研究從可疑感染病料中分離到一株山羊痘病毒(GTPV)。取山羊痘痂皮和皮膚組織磨碎,加含抗生素的PBS制成1:4的懸液,經(jīng)離心后,取上清接種veio細(xì)胞。每天觀察檢查細(xì)胞病變(CPE),如沒有病變,一周盲傳一次。盲傳2代培養(yǎng)5天后,在vero細(xì)胞上觀察到明顯細(xì)胞病變。CPE的病毒特異性通過山羊痘陽性血清的瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)(AGID)證明。當(dāng)有50%細(xì)胞出現(xiàn)CPE時,收獲細(xì)胞,制備超薄切片,置透射電鏡下觀察,在vero細(xì)胞中觀察到不同成熟階段的病毒粒子,成熟病毒粒子大小約260x320nmo關(guān)

3、鍵詞:山羊痘病毒;vero細(xì)胞;病毒分離;電鏡;鑒定IsolationandIdentificationofGoatPoxvirusAuthor:TanXiankuiAdvisors:MengXiaGanJunjiAbstract:Goatpoxvirus(GTPV)wasisolatedfromskinandscabsamplesthatweresuspectedofbeinginfectedwiththevirus.Skinandcrustedscablesionsweregrindedandphosphatebufferedsaline(PBS)withantibiotic

4、smakingupa1:4(w/v)solutionwasadded.Thesuspensionswerecentrifugedandthesupernatantsinoculatedintoverocells.Cellcultureswereexamineddailyforthepresenceofcytopathiceffect(CPE),andpassedblindlyonceaweek.CPEwasevidentafter5daysofthesecondblindpassage.ThespecificityoftheCPEwasconfirmedfurtherbythea

5、gargelimmunodiffusion(AGID)withpositiveserumofgoatpoxvirus?When50%CPEwasobserved,cellswereharvestedandmadeultra-thinsections?Undertransmissionelectronmicroscope,numeroustypicalgoatpoxvirusindifferentmaturestageswerefoundinthecytoplasmaoftheinfectedverocells.Thematurevirusparticlesare260by320n

6、m..Keywords:Goatpoxvirus;Verocells;Isolation;electronmicroscopeidentification綜述山'C痘病毒(GTPV)為痘病毒科山'C痘病毒屬的成員山。該病毒是一種親上皮性的病毒,大量存在丁病羊的皮膚、黏膜的丘殄、膿瘡及痂皮內(nèi)。鼻黏膜分泌物也含有病毒,發(fā)病初期血液屮也有病毒存在。—.病原學(xué)GTPV是痘病毒科(Poxviridae)羊痘病毒屬(Capripoxvirus)成員之一,其基因組為人小約150kb的線性雙股DNA,包括中間編碼區(qū)和兩端反向末端重復(fù)序列,共含147個開放閱讀框(ORF)。從實(shí)驗(yàn)上表明山羊痘病毒地

7、方流行毒株在DNA分子結(jié)構(gòu)上已發(fā)生了某些細(xì)微的變化,如堿基突變等。這些酶切圖譜的差異是否與山羊痘病毒的毒力存在一定的相關(guān)性,有待進(jìn)一步研究⑵。痘病毒對熱的抵抗力不強(qiáng),55°C20分鐘或37°C24小時均可使病毒滅活;病毒對寒冷及干燥的抵抗力較強(qiáng),凍干的至少可保存3個月以上;在毛中保持活力達(dá)2個刀,在開放羊欄屮達(dá)6個月⑶。二?流行特點(diǎn)潛伏期平均為6?8天。羊痘廣泛流行于養(yǎng)羊地區(qū),傳播快,發(fā)病率高。不同品種、性別和年齡的羊均可感染,但細(xì)毛羊較粗毛羊、羔羊較成年羊有更高的易感性,病情亦

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