產(chǎn)纖維素酶的海洋細(xì)菌的篩選及初步鑒定【畢業(yè)設(shè)計(jì)】

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1、本科畢業(yè)設(shè)計(jì)(20.-屆)產(chǎn)纖維素酶的海洋細(xì)菌的篩選及初步鑒定目錄中英文摘要1?引言11」纖維素梅研究簡(jiǎn)介11.2纖維素酶的應(yīng)用21.2.1在飼料工業(yè)上的應(yīng)川21.2.2在造紙業(yè)中的應(yīng)用21.3細(xì)菌纖維素酶的優(yōu)勢(shì)31.4海洋細(xì)菌纖維素酶的特性31.5課題意義32.材料與方法52」實(shí)驗(yàn)材料52」.1培養(yǎng)基52.1.2試齊IJ52.1.3弓I物52.1.4菌種52.2實(shí)驗(yàn)方法52.2.1初篩52.2.2復(fù)篩62.2.3鑒定63.結(jié)果與分析83.1初篩結(jié)果83.2復(fù)篩結(jié)果103.3菌株E-9和W-8的分子鑒定結(jié)果114.小結(jié)12致謝13參考文獻(xiàn)14摘要:為篩選

2、出纖維素酶禹產(chǎn)菌,從寧波人學(xué)實(shí)驗(yàn)室取得150株海洋細(xì)菌菌株,復(fù)蘇后在CMC-Na選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),經(jīng)剛果紅染色法,菌落周圍產(chǎn)生透明圈的有38株,透明圈與菌落直徑比(He)大于3的有9株,其屮編號(hào)為E-9和W-8的菌株He值最人都為4.25。用DNS法對(duì)這9株菌進(jìn)行復(fù)篩,篩選出CMC酶活和濾紙酶活都較高的菌株,仍為E-9和W-8,其屮菌株E-9的CMC卿活和FPA分別為11.5U和5.67U,菌株W-8的CMC酶活和FPA分別為11.1U和5.41U。經(jīng)16S1DNA法鑒定,菌株E-9和W-8分別與Thalassobacterstenotrophicus和

3、Maribacterdokdonensis的16St'DNA系列具有較島的相似性,相似度分別為95%和99%。關(guān)鍵詞:海洋細(xì)菌;纖維素酶;篩選;16SrDNAAbstract:Inordertoobtainthecellulaseproducingbacteria,150marinebacteriafromourlaboratorywerescreenedbasedontheCMC-Namediumplant.Theresultsshowed38of150strainscouldproducecellulase?Amongthem,9strainshav

4、ehigheractivity(Hc>3).TheHeofE-9andW-8wasthehighest(Hc=4.25).TheanalysisofE-9basedonCMCaseactivityandFPAwas11.5Uand5.67U,respectively.TheW-8was11.1Uand5.41U,respective1y.Molecularphylogeneticanalysisofmarinebacteriabaseon16SrDNAsequencesindicatedthattheyexhibitedthehightestsimila

5、rity(95%and99%,respectively)tothe16SrDNAfragmentsofThalassobacterstenotrophicusandMaribacterdokdonensisoKeywords:marinebacteria;cellulase;screening;16SrDNA1?引言1.1纖維素酶研究簡(jiǎn)介纖維素物質(zhì)是世界上最豐富的卻又未得到充分利用的可再生性物質(zhì)資源寶庫(kù),它將是人類未來的能量、食物和化工原料的主要來源。合理開發(fā)和科學(xué)利用這-豐厚天然資源是世界各國(guó)研究開發(fā)的重點(diǎn)領(lǐng)域C利用微生物生產(chǎn)的纖維素酶將其轉(zhuǎn)化為人類急

6、需的能源食物和化工原料,對(duì)于人類社會(huì)的可持續(xù)發(fā)展具有非常重要的意義。篩選出產(chǎn)同活性纖維素酶的菌株是開發(fā)利川纖維素資源的前提和關(guān)鍵。纖維素是綠色植物細(xì)胞壁的主要成份,是自然界中含量最豐富的有機(jī)碳水化A物,生物界最重要的碳源。纖維素屬于多糖,由毗喃葡萄糖分子通過卩(1-4)糖昔鍵縮合生成的線性大分子多聚物。纖維二糖是其基本單元。纖維素分子的大小由聚合度(DP)定義,EU:一個(gè)分子所含葡萄糖殘基數(shù)。植物纖維素DP?14000,微生物纖維素DP?350(),商品纖維素DP~5()一5000⑴。日前纖維索被徹底分解而乂無污染的一條有效途徑是利用纖維素酶的水解作川。

7、利用纖維素酶將纖維素水解成葡萄糖稱為纖維素的生物轉(zhuǎn)化工藝,生物轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵就是纖維素酶的生產(chǎn)。纖維素酶是一組能夠降解纖維素生成葡萄糖的酶的總稱,是一?個(gè)有多種水解酶組成的復(fù)合酶系。根據(jù)其作川方式一般可將纖維素酶分為內(nèi)切葡聚糖酶(EG)、外切葡聚糖酶(CHB)和0?葡萄糖疔酶(BG)f21o在這3種酶的協(xié)同作川F,纖維索最終被分解成葡萄糖。纖維素酶來源非常廣泛,如昆蟲、軟體動(dòng)物、原生動(dòng)物、細(xì)菌、放線菌、真菌等都能產(chǎn)生纖維素酶。目前用于牛產(chǎn)纖維素酶的微牛物大多屬于真菌,研究較多的有木霉屈、曲霉屬、根霉屬和漆斑霉屬?,其中絲狀貞菌木霉屬被公認(rèn)是產(chǎn)纖維索嗨最高的菌

8、種Z—同。有許多種木霉不但分泌的纖維素酶產(chǎn)暈高,而且纖維素酶系的三種組分(葡聚糖

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