基因工程(所有章節(jié)及答案)

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1、基因工程(所有章節(jié)及答案)最新版————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期：59第一章緒論一、填空題1．基因工程是70年代發(fā)展起來(lái)的遺傳學(xué)的一個(gè)分支學(xué)科?；蚬こ碳夹g(shù)的誕生，使人們從簡(jiǎn)單地利用現(xiàn)存的生物資源進(jìn)行諸如發(fā)酵、釀酒、制醋和醬油等傳統(tǒng)的生物技術(shù)時(shí)代，走向按人們的需要而定向地改造和創(chuàng)造具有新的遺傳性品種的時(shí)代。2．隨著基因工程技術(shù)的誕生和發(fā)展，人類可以通過(guò)細(xì)菌發(fā)酵、真核細(xì)胞培養(yǎng)和乳腺生物反應(yīng)器等三種主要生產(chǎn)方式，大量取得過(guò)去只能從組織中提取的珍稀蛋白，用于

2、研究或治病。3．Cohen等在1973年構(gòu)建了第一個(gè)有功能的重組DNA分子。4．基因工程的兩個(gè)基本特點(diǎn)是：(1)分子水平上的操作，(2)細(xì)胞水平上的表達(dá)。5．基因克隆中三個(gè)基本要點(diǎn)是：克隆基因的類型；受體的選擇和載體的選擇。6．1972年，美國(guó)斯坦福大學(xué)P．Berg等在Proc．Natl．Acad．Sci．USA上發(fā)表了題為：“將新的遺傳信息插入SV40病毒DNA的生物化學(xué)方法：含有λ噬菌體基因和E．coli半乳糖操縱子的環(huán)狀SV40DNA”的論文，標(biāo)志著基因工程技術(shù)的誕生。這一工作具有劃時(shí)代的意義，但是他們并沒(méi)有證明體外重組的DNA分子具有生物學(xué)功能。7

3、．克隆基因的主要目的有四個(gè)：(1)擴(kuò)增DNA；(2)獲得基因產(chǎn)物；(3)研究基因表達(dá)調(diào)控；(4)改良生物的遺傳性。二、選擇題(單選或多選)1．因研究重組DNA技術(shù)而獲得諾貝爾獎(jiǎng)的科學(xué)家是(C)(a)A．Komberg(b)W．Gilbert(c)P．Berg(d)B．McClintock2．第一個(gè)作為重組DNA載體的質(zhì)粒是(C)(a)pBR322(b)ColEl(c)pSCl01(d)pUCl83．第一個(gè)用于構(gòu)建重組體的限制性內(nèi)切核酸酶是(A)(a)EcoRI(b)EcoB(c)EcoC(d)EcoRⅡ4．PBerg構(gòu)建SV40二聚體時(shí)用了幾種不同的酶，其

4、中(B)的作用是制造隱蔽的5’端。(a)末端轉(zhuǎn)移酶(b)λ外切核酸酶(c)外切酶Ⅲ(d)DNA連接酶三、簡(jiǎn)答題1．為什么說(shuō)基因工程技術(shù)是60年代末70年代初發(fā)展起來(lái)的?答：這是因?yàn)椋?1)1967年發(fā)現(xiàn)了連接酶；(2)大腸桿菌的轉(zhuǎn)化技術(shù)是1970年獲得突破；(3)限制性內(nèi)切核酸酶的分離始于1970年；(4)Berg在1972年構(gòu)建了第一個(gè)重組的DNA分子。2．重組DNA的含義是什么?答：將一個(gè)生物的DNA片段插入到一個(gè)載體中，并引入到另一生物體中進(jìn)行繁殖。3．如何理解基因工程的兩個(gè)特點(diǎn)?答：基因工程的兩個(gè)基本特點(diǎn)是分子水平的操作和細(xì)胞水平的表達(dá)。分子水平的

5、操作包括DNA分離、切割和連接(還有其他一些DNA的修飾等)。由于體外重組DNA的最終目的是要改變生物的遺傳性，所以分子水平的操作和細(xì)胞水平的表達(dá)是基因工程的兩個(gè)最基本的特點(diǎn)。4．在Cohen構(gòu)建有生物功能重組體的第一步實(shí)驗(yàn)中，用EcoRI切割了R6-5質(zhì)粒，然后轉(zhuǎn)化E．coliC600，在卡那霉素抗性子板上篩選到了pSCl02，它是由R6-5的三個(gè)EcoRI片段組成，請(qǐng)推測(cè)這個(gè)質(zhì)粒具有什么遺傳特性?答：至少可說(shuō)明兩點(diǎn)：(1)pSC102含有復(fù)制起點(diǎn)，是一個(gè)獨(dú)立的復(fù)制子；(2)重組DNA分子中的卡那霉素抗性基因得到了表達(dá)。5．什么是動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器?答：

6、夠分泌乳汁的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)其他來(lái)源的基因產(chǎn)品，并通過(guò)乳腺分泌出來(lái)。59四、問(wèn)答題1．S．NCohen于1973年構(gòu)建了三個(gè)重組體，pSCl02，pSCl05，pSCl09請(qǐng)說(shuō)明這三個(gè)重組體是如何獲得的?各說(shuō)明了什么?答：pSCl02：用EcoRI切割R6-5，混合轉(zhuǎn)化大腸桿菌，在卡那霉素抗性平板上選擇了一個(gè)克隆，并從該克隆中分離了重組質(zhì)粒DNA，命名為pSCl02。該質(zhì)粒是由質(zhì)粒R6-5的EcoRI酶切片段Ⅲ、V和Ⅷ在體內(nèi)連接的，說(shuō)明可以利用體內(nèi)連接構(gòu)建重組體。pSCl05：作者分別用EcoRI切割質(zhì)粒pSC101、pSC102,然后加入DNA連接酶進(jìn)行連

7、接后轉(zhuǎn)化大腸桿菌，在四環(huán)素和卡那霉素雙抗性的平板上篩選到pSC105。說(shuō)明用質(zhì)粒作為載體，體外連接可得到有功能的重組體。pSCl09：pSC101與RSF1010的共整合，即用EcoRl分別切割這兩個(gè)質(zhì)粒，然后在體外進(jìn)行重組。說(shuō)明兩個(gè)獨(dú)立的復(fù)制子體外重組后仍具有生物功能。2．基因克隆是如何使含有單個(gè)基因的DNA片段得到純化的?答：大分子量的DNA會(huì)含有許多特殊限制性內(nèi)切核酸酶的限制位點(diǎn)，因此用一種限制酶處理一完整染色體或整個(gè)基因組會(huì)產(chǎn)生許多不同的DNA片段，每一個(gè)片段帶有基因組的一個(gè)不同的基因或一個(gè)不同的小片段。當(dāng)全部片段與用同種限制酶處理過(guò)的載體分子混合

8、時(shí)(圖A14.1)，每個(gè)片段將插入一個(gè)不同的載體分子(比如一個(gè)質(zhì)粒