細胞凋亡論文

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1、深圳大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院創(chuàng)新實驗論文□基礎(chǔ)生物學(xué)創(chuàng)新實驗1.0學(xué)分課程名稱：□細胞與遺傳學(xué)創(chuàng)新實驗1.0學(xué)分□生化與分子生物學(xué)創(chuàng)新實驗□生物科學(xué)1.0學(xué)分□生物技術(shù)1?5學(xué)分實驗項目來源：□創(chuàng)新實驗課程指定實驗項目□課外科技創(chuàng)新實驗項目：資助單位項目編號實驗項目名稱:凋亡細胞的誘導(dǎo)和7實驗項目學(xué)分：05姓名:指導(dǎo)教師:專業(yè)：生物技術(shù)學(xué)號二實驗時間:2011年12月1日星期論文提交時間：2011年12月17日星期六牛?物科學(xué)教學(xué)實驗屮心制深圳大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院創(chuàng)新實驗論文評分表評價方面權(quán)重評分平時表現(xiàn)：（包括實驗態(tài)度

2、、實驗室常識、實驗習(xí)慣、實驗技能、原始記錄等方面）20分實驗方案設(shè)計：（包括開展本項實驗研究的理論基礎(chǔ)、研究目的、技術(shù)路線、研究方法、實驗進度安排、可行性分析等。）20分論文：（嚴格按照正規(guī)期刊要求的格式撰寫論文。主要評價指標：是否按照科學(xué)的研究方法完成實驗，實驗結(jié)果是否翔實、充足，論文撰寫是否規(guī)范，分析討論是否合理到位。）60分合計100分指導(dǎo)老師簽字：生物科學(xué)教學(xué)實驗屮心制鹽脅迫誘導(dǎo)的植物細胞凋亡摘要：以洋蔥內(nèi)表皮細胞為材料，分別以O(shè).lmol/L0.6mol/Ll.lmol/L的NaCl溶液處理2,4,

3、6h后進行染色觀察，以此來發(fā)現(xiàn)植物細胞在高鹽環(huán)境下的抗逆性，并H觀察細胞凋亡的典型特征。關(guān)鍵詞：堿性纖維素酶產(chǎn)生菌；分離；篩選；牛長曲線細胞凋亡或細胞程序性死亡是多細胞牛物甚至單細胞牛物體在內(nèi)外因子的誘導(dǎo)下,山基因控制的一種細胞主動性死亡途徑，是細胞生命活動的基本特征之一。近年來研究表明，植物的一些特定細胞除在止常牛長發(fā)育的特定期間能發(fā)牛細胞凋亡外，還能受理化或牛物等因子所誘導(dǎo)發(fā)生類似細胞凋亡的典型形態(tài)和生化特征。⑴木實驗旨在研究不同NaCl濃度對細胞凋亡的影響。鹽脅迫是植物的一種重要抗逆反應(yīng)，對植物的牛長具

4、有重要的牛理意義。鹽濃度達一定值時，會破壞細胞的正常生命活動，部分細胞甚至死亡。⑴高鹽脅迫下的洋蔥內(nèi)表皮細胞死亡也具有細胞凋亡典型的形態(tài)和?；卣?。細胞凋亡主要形態(tài)學(xué)特征有：細胞膜完整，細胞連接和微絨毛消失，細胞骨架紊亂，粘著力降低，單個細胞與臨近細胞脫離；核纖層蛋口降解，染色質(zhì)凝集和邊緣化，裂解為碎塊，細胞核最終裂解為市核膜包裹的碎塊,細胞器展木保持完整，細胞皺縮,細胞膜收縮并內(nèi)陷，將細胞自行分割為多個具有膜包圍、內(nèi)含各種細胞成分的凋亡小體。凋亡細胞不會發(fā)生細胞膜、溶酶體等膜結(jié)構(gòu)的破裂，不會引起細胞內(nèi)容物外

5、溢細胞凋亡可通過形態(tài)學(xué)觀察鑒定：改良苯酚品紅染色觀察，可觀察細胞核、染色體的形態(tài)，從而判斷細胞是否凋亡。1材料與方法1.1實驗材料普通洋蔥1個1.2實驗試劑1.2.1改良苯酚品紅染液：95%乙醇、1%醋酸、Na2HPO4、Na2HPO4、l%NaOH溶液、1%HC1、廿油、蘇木精、彼磯、碘酸鈉（NaIO3）、冰醋酸、Hanks染液、丙醇、二甲苯、中性甲醛1.2.2NaCl誘導(dǎo)溶液：0」mol/L：0.2922gNaC1定容至50ml0.6mol/L：1.7532gNaC1定容至50ml1.1mol/L：3.2

6、142gNaC1定容至50ml1.3實驗預(yù)處理取新鮮洋蔥于室溫下清水培養(yǎng)4小吋，使其活化1.4細胞誘導(dǎo)凋亡1.4.1鱗莖切取30cm2左右的內(nèi)表皮，任取1進行觀察記錄1.4.2將切片分成5組，每組6片，其中1、2組為對照組，1組放入去離子水中不做其他處理，2組則放入試管中煮沸5mino3-5組為實驗組，依次放入裝有l(wèi)mol/L.0.6mol/L.1.lmol/L濃度的NaCl溶液的培養(yǎng)皿中。1.4.3進行實驗處理后的2h、4h、6h在各組中任取一片做改良苯酚品紅的染色觀察并記錄。2結(jié)果與分析2.1誘導(dǎo)前染色觀

7、察結(jié)果細胞膜完整,細胞核呈球形，染色均勻，細胞質(zhì)均勻透明，從細胞核倚靠邊緣對推斷液泡依然完整。400X1000X圖1誘導(dǎo)前改良苯酚品紅染色觀察圖2.2煮沸的細胞觀察結(jié)果細胞壞死,細胞膜破碎，細胞核破裂，內(nèi)容物外溢。400X1000X圖2經(jīng)煮沸處理細胞改良苯酚品紅染色觀察圖2.3誘導(dǎo)2h后的觀察結(jié)果2.3.1去離子水（圖3）：與誘導(dǎo)處理前大致相同，細胞膜完整,細胞核呈球形，染色均勻，細胞質(zhì)均勻透明,從細胞核倚靠邊緣對推斷液泡依然完整。400X1000X圖32h去離子水改良苯酚品紅染色觀察圖2.3.20.1mol

8、/L（圖4）：部分細胞出現(xiàn)輕度質(zhì)壁分離，部分細胞核有輕微皺縮°400X1000X圖42h0.1mol/L改良苯酚品紅染色觀察圖2.3.30.6mol/L（圖5）：質(zhì)樂分離較為明顯，細胞膜皺縮，細胞核內(nèi)出現(xiàn)泡狀結(jié)構(gòu)。400X1000X圖52h0.6mol/L改良苯酚品紅染色觀察圖2.3.2l.lmol/L（圖6）：質(zhì)壁分離明顯，細胞核明顯皺縮，染色質(zhì)與細胞質(zhì)包裹在一起形成較多的凋亡小體400X1000