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《β淀粉樣蛋白人源性抗體的制備》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、生技術(shù)通訊LETrERSINB10TECHNOLOGYvVo，l．·?21No．·5)一5ep．·，20106811TTHdoi：10．3969~．issn．1009—0002．2010．05．019研究報(bào)告l3淀粉樣蛋白人源性抗體的制備孫超，常紅艷，王雙，林建波，俞煒源，陳燕俠1．軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物_Y-程研究所，北京100071；2．空軍總醫(yī)院高干科，北京100142[摘要]目的：應(yīng)用噬菌體展示及抗體庫(kù)技術(shù)，制備并鑒定13淀粉樣蛋白(AI3)人源性抗體。方法：應(yīng)用固相篩選方法，以人s-合成的A131—15肽為靶標(biāo)分子，在大容量全合成人源性噬菌體抗體庫(kù)中篩選抗AI3人源性抗體，并進(jìn)行特異性
2、鑒定。結(jié)果：經(jīng)過(guò)3輪篩選，單克隆鑒定獲得噬菌體抗體F11，競(jìng)爭(zhēng)性ELISA表明抗體對(duì)A131-42的結(jié)合位點(diǎn)位于115氨基酸殘基內(nèi)，ELISA結(jié)果證實(shí)抗體特異性良好。結(jié)論：以A131—15肽為靶標(biāo)分子獲得了特異性良好的人源性抗體。[關(guān)鍵詞】阿爾茨海默?。籅淀粉樣蛋白；噬菌體抗體篩選；特異性[中圖分類號(hào)]R392．1；Q52【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A[文章編號(hào)]1009—0002(2010)05—068l一05PreparationandIdentificationofHumanAnti-AmyloidBPeptideMonoclonalAntibodiesSUNChao，CHANGHong-Yanl,
3、WANGShuang，，^fJian-Bo，YUWei-Yuanl,CHENYan-Xia21．BeijingInstituteofBiotechnology，Beijing100071；2．CadreWardGeneralHospitalofAirForce，Beijing100142；China[Abstract]Objective：Topreparationanti-amyloidppeptide(A13)antibodiesfromhumanphagedisplayantibodylibrary．Methods：A131-15peptidewasusedforscreeningspe
4、cificantibodiesfromalargefullysynthetichumanantibodylibrarybysolidpanning．TheantigenbindingactivityandspecificityofantibodyweredeterminedbyELISA，Results：After3roundsofpanning，onecandidate(F11)wasobt~ned．TheepitopewaslocatedwithinA131-15，andthespecificityofF11wasshowntobeexcellentbothinphage-antibod
5、ylevelandwholeantibodylevelbyELISA．Conclusion：Humananti-A131-15specificityantibodiescanbeisolatedfromphageantibodyli—brary．[Keywords]Alzheimerdisease；amyloidppeptide；phagedisplayscreening；specificity阿爾茨海默病(AlzheimerSdisease，AD)是一種能夠引起細(xì)胞免疫反應(yīng)，誘發(fā)腦膜炎p卅，因此，目前以記憶減退、認(rèn)知障礙為主要特征的中樞神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)于抗AI3治療性抗體的研究主要集中于包含B細(xì)
6、退行性疾病。其主要的病理學(xué)特征是腦內(nèi)的細(xì)胞外胞表位的A8的N端。我們應(yīng)用噬菌體表面展示及p淀粉樣蛋白(amyloidppeptide，AI3)的沉積導(dǎo)致抗體庫(kù)技術(shù)，對(duì)人工合成的A[31—15肽進(jìn)行了人源的老年斑、神經(jīng)纖維纏結(jié)和神經(jīng)元細(xì)胞的缺失營(yíng)養(yǎng)性抗體的篩選和鑒定工作，期望為研究AD的免疫壞死，因此淀粉樣蛋白在腦中的沉著對(duì)AD的發(fā)病治療奠定基礎(chǔ)。起著關(guān)鍵作用。A13一般由40—42個(gè)氨基酸殘基組成，是p淀粉樣前體蛋白(p—amyloidprecursor1材料與方法protein，APP)的代謝產(chǎn)物，是經(jīng)過(guò)p一和^y一分泌酶(secretase)的共同剪切作用形成的，是一種正常的1．1材料新
7、陳代謝產(chǎn)物。其中Apl一40占Ap總數(shù)的90％左全抗體重鏈表達(dá)載體H293、輕鏈表達(dá)載體右，At31—42約占10％，但目前認(rèn)為AB1—42肽是構(gòu)L293一CL及全合成人源性噬菌體抗體庫(kù)均由本實(shí)驗(yàn)成老年斑的基本成分，是治療AD的有效的靶標(biāo)分子【1-2]。研究表明，制備抗Ap人源性抗體是治療AD[收稿日期]2010—03～25[作者簡(jiǎn)介]孫超(1983一)，男，碩士研究生的有效手段，但Ap的C端被認(rèn)為包含T細(xì)胞
