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《大蒜組織培養(yǎng)快繁技術(shù)的研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、大蒜組織培養(yǎng)快繁技術(shù)的研究摘要:以貴州務(wù)川紫皮大蒜莖尖為試驗材料,將其接種在附加不同NAA和6-BA的MS分化培養(yǎng)基中,比較組織誘導(dǎo)、分化和生根效果。試驗結(jié)果表明,以MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L培養(yǎng)基誘導(dǎo)愈傷組織效果最好;以MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L培養(yǎng)基誘導(dǎo)不定芽增殖的效果較好,增殖倍數(shù)達(dá)5倍;以MS+NAA0.4mg/L培養(yǎng)基的生根效果最佳。關(guān)鍵詞:大蒜;莖尖;組織培養(yǎng);快繁大蒜(AlliumsativumL.)為百合科蔥屬植物,以鱗莖(蒜頭)、蒜薑和幼株供食,還可生產(chǎn)青蒜和蒜黃,因其具有殺菌、防癌之功效,成為群眾喜愛的主要蔬菜之一,且
2、蒜薑為高檔蔬菜,頗受國內(nèi)外市場歡迎[1]。人蒜生產(chǎn)中主耍用鱗莖作繁殖材料,不僅繁殖系數(shù)低,而且生產(chǎn)成本高。同時,在長期的無性繁殖過程中,鱗莖易感染多種病毒,造成大蒜種性退化,使大蒜的產(chǎn)量和商品質(zhì)量降低。而利用組織培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖大蒜,不僅可提純復(fù)壯,還可解決連年種植導(dǎo)致的種性退化等問題[2,3]o遵義務(wù)川紫皮大蒜為貴州優(yōu)質(zhì)大蒜甜種,但其在長期栽培過程屮也存在種性退化的問題,嚴(yán)重影響當(dāng)?shù)卮笏猱a(chǎn)業(yè)的發(fā)展。因此,木試驗旨在通過研究不同植物激素配比對大蒜愈傷組織的誘導(dǎo)、不定芽分化及生根的影響,加快大蒜繁殖速度、提高繁殖率、增加繁殖倍數(shù),為進(jìn)一步快繁務(wù)川大蒜提供依據(jù)。1材料與方法1.1試驗材料貴
3、州務(wù)川紫皮大蒜。1.2試驗方法%1外植體的選取和消毒選取完好的蒜瓣,用蒸憾水沖洗數(shù)次后,小心切開,將其內(nèi)的莖尖取出,先用75%的酒精消毒30s,再用0.1%的升汞消毒10min,用無菌水沖洗5次,小心切取0.2~0?5cm的莖尖待用。%1愈傷組織的誘導(dǎo)將大蒜莖尖接種在附加不同濃度的6-BA(0.2,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.Omg/L)和NAA(0.2,0.5mg/L)組合(共14個處理)的MS培養(yǎng)基中,每瓶接種3個莖尖,每個處理10瓶,接種30d后統(tǒng)計愈傷組織的誘導(dǎo)率。%1不定芽的誘導(dǎo)將產(chǎn)生的愈傷組織切成1cmXlcm的小塊,并接種于附加不同濃度的6-BA(0.2,
4、0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mg/L)和NAA(0.1,0.5mg/L)組合(共14個處理)的MS培養(yǎng)基中,進(jìn)行不定芽的誘導(dǎo)。每瓶接種1塊,每個處理10瓶,接種30d后統(tǒng)計誘導(dǎo)率。%1根的誘導(dǎo)選取生長旺盛的再牛芽,從其基部與愈傷組織切離,分別接種于附加不同濃度NAA(0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mg/L)(6個處理)的MS培養(yǎng)基中生根。每瓶接種1個芽,每個處理10瓶,30d后統(tǒng)計生根情況。%1培養(yǎng)條件將培養(yǎng)材料放在培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)。培養(yǎng)室溫度24?26°C,光照強(qiáng)度2000?3000lx,每天光照14~16h,相對濕度為60%以上。2結(jié)果與分析1.1不同濃度
5、6-BA和NAA組合對大蒜愈傷組織誘導(dǎo)率的影響由表1可知,不同濃度的NAA和6-BA配比對人蒜莖尖愈傷組織的誘導(dǎo)效果不同。當(dāng)6-BA濃度為2.0?3.0mg/L時,添加0.5mg/LNAA的培養(yǎng)基比添加0.2mg/LNAA的培養(yǎng)基更有利于大蒜愈傷組織的誘導(dǎo)。而口,當(dāng)NAA濃度不變時,愈傷組織的誘導(dǎo)率隨著6-BA濃度的增加呈先升后降的趨勢,其中,以附加6-BA3.0mg/L和NAA0.5mg/L的MS培養(yǎng)基上的大淼愈傷組織長勢最好,為淡黃色,誘導(dǎo)率最高,達(dá)到76.7%,是試驗中最適合誘導(dǎo)大蒜愈傷組織的培養(yǎng)基。2.2不同濃度6-BA和NAA對大蒜不定芽誘導(dǎo)的影響從表2可以看出,各處理培養(yǎng)基
6、內(nèi)的愈傷組織均能分化出不定芽。當(dāng)NAA濃度不變時,大蒜愈傷組織分化出的芽數(shù)隨著6-BA濃度的增加呈先增后降的趨勢,且低濃度的NAA(0.1mg/L)對芽的誘導(dǎo)效果好于高濃度的NAA(0.5mg/L)o表明6-BA與NAA間的濃度比值較大時,有利于芽的分化,而其比值較小時不定芽分化受到抑制。其中附加6-BA2.0mg/L和NAA0.1mg/L的MS培養(yǎng)基的處理效果最好,英增殖倍數(shù)達(dá)5倍,不定芽苗的長勢最好,且較節(jié)約成本。試驗發(fā)現(xiàn),6-BA濃度過高時會抑制不定芽的分化,個別處理出現(xiàn)玻璃苗,這與前人的研究結(jié)果一致[4]。2.3不同濃度NAA對大蒜不定芽苗生根的影響由表3可知,在不添加NAA的
7、MS培養(yǎng)基上,大蒜不定芽誘導(dǎo)出根的概率較低,且不定芽苗表現(xiàn)出根少、細(xì)弱、上部芽尖黃化等特征。而附加0.2~o?8mg/LNAA的MS培養(yǎng)基對大蒜不定芽苗的生根有不同程度的促進(jìn)作用,英中添加0.4mg/LNAA的MS培養(yǎng)基上的不定芽苗的生根率達(dá)到83.3%,且根數(shù)多、較長、粗壯,但隨著NAA濃度的增加,生根率下降,可認(rèn)為較高濃度的NAA對根的分化和生長有抑制作用,當(dāng)NAA濃度達(dá)1.Omg/L時,大蒜不定芽苗的生根率最低,且低于不添加NAA的。3結(jié)