山東省西瓜細(xì)菌性果斑病的病原菌鑒定

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1、山東省西瓜細(xì)菌性果斑病的病原菌鑒定山東省西瓜細(xì)菌性果斑病的病原菌鑒定摘耍：近年來(lái)，在山東省臨沐縣、昌樂(lè)縣、章丘縣等地西瓜育苗基地的西瓜苗上發(fā)現(xiàn)了一種新病害一一西瓜細(xì)菌性果斑病。從病果和病葉片上分離到15個(gè)細(xì)菌菌株，選取8個(gè)菌株進(jìn)行致病性測(cè)定，結(jié)果表明，該8個(gè)菌株均能侵染西瓜，發(fā)病癥狀和自然發(fā)病癥狀完全一致；從接種發(fā)病的病果上可重新分離到相同的細(xì)菌。對(duì)該8個(gè)菌株菌體形態(tài)、染色反應(yīng)、培養(yǎng)性狀及其生理生化特性等項(xiàng)目進(jìn)行觀察測(cè)定，確認(rèn)供試菌株為燕麥?zhǔn)乘峋鞴蟻喎N(Acidovoraxavenaesubsp.

2、citrulliWillemsetal.,1992)。關(guān)鍵詞：西瓜；細(xì)菌性果斑??；病原鑒定中圖分類號(hào)：S432.4+2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A文章編號(hào)：1001-4942(2014)03-0083-03AbstractInrecentyears,watermelonhadbeenattackedbyanewbacterialdiseasecalledbacterialfruitblotch(BFB)insomeplantingareasofShandongProvince,includingLinshu,Ch

3、angleandZhangqiu.Fifteenstrainswereisolatedfromdiseasedfruitsandleavesofwatermelon.Theinoculationtestswereconductedwith8strains,whichproducedthesamesymptomsasnaturallyinfecteclplants.Andthesamestrainswereisolatedfrominoculatedwatermelon?Basedonthemycel

4、ialmorphology,stainingreaction,culturalcharacteristicsandaseriesofphysiologicalandbiochemicalproperties,thepathogenswereidentifiedasAcidovoraxavenaesubsp.citrulliWillemsetal.,1992.KeywordsWatermelon；Bacterialfruitblotch；Pathogenidentification自2009年始，山東

5、省臨沐縣、昌樂(lè)縣、章丘市等西瓜育苗基地西瓜普遍發(fā)綸一種細(xì)菌性病害，發(fā)病程度輕重不等，如臨沐縣西瓜育苗基地所育26萬(wàn)株西瓜苗全部封埋銷毀，造成極大損失o2010-2013年筆者在章丘西瓜育苗基地抽檢的西瓜苗上同樣分離到該種細(xì)菌，根據(jù)病害癥狀推測(cè)是Acidovoraxavenaesubsp.citrulliWillems,Goor,Thieiemans,G訂lis,Kersters&Ley。因此，有必要對(duì)該細(xì)菌性病害的病原菌進(jìn)行系統(tǒng)鑒定來(lái)加以確認(rèn)，為該病害的防治提供理論依據(jù)。1材料與方法1.1試驗(yàn)材料1

6、.1.1供試材料2009年從山東省臨沐縣大棚采集的雙星、京欣、極品京欣西瓜病果。對(duì)照菌株為燕麥?zhǔn)乘峋鞴蟻喎N(Acidovoraxavenaesubsp?citrulliWillemsetal.,1992),由山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植保學(xué)院植物病理學(xué)系提供。1.1.2培養(yǎng)基NA培養(yǎng)基為分離培養(yǎng)基，KB培養(yǎng)基用于觀察熒光反應(yīng)⑶。1.2試驗(yàn)方法1.2.1病原菌分離、純化取病組織，用滅菌剖解刀切取病健交界處組織，75%酒精消毒2s,移至0.1%升汞液消毒1?2min,經(jīng)滅菌水沖洗后置于小瓷皿中研磨，加無(wú)菌水浸20m

7、in,然后用移菌環(huán)蘸取組織液在NA培養(yǎng)基劃線，28°C培養(yǎng)48h,長(zhǎng)出單菌落后在NA培養(yǎng)基再劃線，使細(xì)菌純化。純化后的各菌株編號(hào)保存冰箱中備用。1.2.2馬鈴薯軟腐將馬鈴薯洗凈用75%酒精表面消毒，切成5mm厚的薯片，在無(wú)菌操作下放在無(wú)菌培養(yǎng)皿中。將在NA培養(yǎng)基上培養(yǎng)24h的供試菌株用移菌環(huán)接在塊莖上，28°C條件下培養(yǎng)48h后，觀察馬鈴薯軟腐情況。1.2.3病原菌的致病測(cè)定8個(gè)菌株與對(duì)照菌株在28°C條件下培養(yǎng)24h,配成3X108個(gè)/ml菌懸液，噴霧和刺傷接種于健康西瓜幼苗4?6葉和果實(shí)，同時(shí)以

8、接清水為對(duì)照(CK)O在28°C下保濕48h,之后白天光照，晚上保濕，每天注意觀察發(fā)病情況。1.2.4細(xì)菌學(xué)性狀細(xì)菌的格蘭氏染色、形態(tài)特征、培養(yǎng)性狀、生理生化測(cè)定等，主要參照《植病研究方法》［3］、《一般細(xì)菌常用鑒定方法》［7］、《常見(jiàn)細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊(cè)》［2］等方法進(jìn)行。2結(jié)果與分析2.1病害癥狀西瓜果斑病田間可危害西瓜幼苗子葉、定植后的西瓜葉片（子葉及真葉）和果實(shí)（幼果和成熟果）。定植前幼苗發(fā)病，葉尖或葉緣出現(xiàn)水漬狀小斑點(diǎn)，逐漸向子葉基部擴(kuò)展為條形或不規(guī)則形暗綠色水