探析大黃靈仙膠囊的藥理功用

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1、探析大黃靈仙膠囊的藥理功用【摘要】n的探討大黃靈仙膠囊對(duì)慢性肝損傷家兔膽結(jié)石形成的干預(yù)作用及其作用機(jī)制。方法將46只家兔隨機(jī)分為正常組、慢性肝損傷組、肝硬化組、人黃靈仙膠囊大劑量組、大黃靈仙膠囊小劑量組。采用皮下注射CC14方法進(jìn)行慢性肝損傷造模，各組同時(shí)進(jìn)行不同處理。最后觀察各組膽囊成石率，肝臟功能生化指標(biāo)，肝組織病理改變、超微結(jié)構(gòu)改變，膽汁成分改變。結(jié)果慢性肝損傷組、肝硬化組膽石形成陽性檢出率較正常對(duì)照組顯著增加(P<0.05或PV0.01)。大黃靈仙膠囊大劑量組、大黃靈仙膠囊小劑量組膽石陽性檢出率較肝硬化組有顯著降低(P<0.01或PV0.05)。各模型組中肝臟

2、超微結(jié)構(gòu)均發(fā)生不同程度異常改變，大黃靈仙膠囊大、小劑量治療組肝臟病理改變、肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變較模型組比較均有改善，大劑量組尤為明顯。大黃靈仙膠囊大、小劑量組血清AST,ALT,y-GT,非結(jié)合膽紅素均明顯低于肝硬化組(P<0.05或P<0?01)；總膽紅素、間接膽紅素、鈣離子大黃靈仙膠囊大、小劑量組較肝硬化組明顯降低(P<0?01),大劑量組較小劑量組明顯降低(P<0.01)。結(jié)論大黃靈仙膠囊對(duì)慢性肝損傷后膽結(jié)石形成具有明顯的預(yù)防效果，其作用機(jī)制主要與抑制CC14所致肝臟損傷的作用有關(guān),同時(shí)與大黃靈仙膠囊在多層次、多途徑調(diào)節(jié)參與結(jié)石形成各因素關(guān)系密切

3、。【關(guān)鍵詞】慢性肝損傷；肝硬化；大黃靈仙膠囊；膽結(jié)石；肝臟超微結(jié)構(gòu)本實(shí)驗(yàn)利用CC14皮下注射誘發(fā)家兔慢性肝損傷，在此基礎(chǔ)上觀察膽囊結(jié)石形成率，并用大黃靈仙膠囊組方煎劑進(jìn)行灌胃，通過觀察結(jié)石形成率,肝臟細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的病理學(xué)改變，測定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝功能及膽汁成分并進(jìn)行膽汁培養(yǎng)，以探討大黃靈仙膠囊對(duì)家兔慢性肝損傷膽結(jié)石模型的干預(yù)治療作用。一、材料與儀器1?1材料、儀器健康家兔，體質(zhì)量2.5~3.Okg,雌雄不拘，普通級(jí)，廣西中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)20060820c各生化試劑盒分別購于上海巾能德賽診斷技術(shù)有限公司和伊利康生物技術(shù)有限公司。奧地利Biocell2010酶

4、標(biāo)儀、日立H-500透射電鏡、BX-50-32001奧林巴斯光學(xué)顯微鏡、HPIAS-1000P病理圖文分析系統(tǒng)等分別由廣西醫(yī)科大學(xué)中心實(shí)驗(yàn)室、廣西中醫(yī)學(xué)院一附院病理實(shí)驗(yàn)室提供。1.2笏品造模用笏：CC14分析純（將CC14與花生油以1：2.5比例混合，37°C加熱使充分溶解，制成40%CC14溶液，）、膽固醇分析純，均為上海國藥集團(tuán)產(chǎn)品。受試用藥：大黃靈仙膠囊（生大黃150g,威靈仙300g,芒硝100g,金錢草300g,枳殼120g,雞內(nèi)金100g,澤蘭150g,柴胡120g,郁金120g,磁石120g,黃罠300g,甘草50g）,以上共計(jì)1930g生藥，由廣西中醫(yī)

5、學(xué)院第一附屈醫(yī)院制劑室提取965ml濃縮夯液，并無菌密封瓶裝（生藥量為2g/ml）o二、方法2.1動(dòng)物分組及處理方法健康家兔46只，體質(zhì)量2.5~3.Okg,雌雄不拘,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為5組，即正常對(duì)照組10只、慢性肝損傷組8只、肝硬化組8只、大黃靈仙膠囊大劑量組10只（用藥量相當(dāng)于成人用量的3倍）、大黃靈仙膠囊小劑量組10只（用藥量相當(dāng)于成人用量）。正常對(duì)照組普食喂養(yǎng)，每日灌服生理鹽水4ml/kg；慢性肝損傷組采用“慢性肝損傷兔動(dòng)物模型”的建立，普食喂養(yǎng)10周后，每日灌服生理鹽水4ml/kg；肝硬化模型組造模方法：家兔稱重后以2ml/kg體質(zhì)量，將40%CC1

6、4溶液頸后皮下注射，每4天1次，以形成皮下丘狀突起為宜。造模后第10周開始每H灌服生理鹽水8ml/kg；大黃靈仙膠囊大、小劑量組笫10周起每口灌服膽通膠囊提取液8ml/kg,4ml/kg0普食喂養(yǎng)。2.2檢測指標(biāo)及方法2.2.1膽囊結(jié)石成石觀察結(jié)石判定標(biāo)準(zhǔn)為正常膽囊膽汁內(nèi)無有形成分。肉眼觀察膽汁內(nèi)有無棕黑色成型顆?；蚰嗌硺映恋恚荤R下觀察有無結(jié)石微?；蚪Y(jié)晶。2.2.2生化指標(biāo)檢測夭門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、丫-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(Y-GT)采用速率法檢測；血清中總膽紅素、直接膽紅素、間接膽紅素、血清總膽固醇、總膽汁酸、膽汁總膽汁酸、總膽固醇采用

7、化學(xué)比色法檢測；鈣離子含量采用乙二胺四乙酸二鈉法檢測；磷脂含量酶顯色法檢測。2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有數(shù)據(jù)采用SPSS14.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以土s表示，兩組間均數(shù)比較用t檢驗(yàn)；兩組間率的比較采用卡方檢驗(yàn)；P<0.05認(rèn)為冇統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。三、結(jié)果3.1家兔膽囊結(jié)石發(fā)生情況。3.2家兔肝臟病理改變光鏡下觀察，慢性肝損傷組(見圖1,2)：纖維組織增生，肝細(xì)胞水腫，局部氣球樣變，膽管增生，少許淋巴細(xì)胞浸潤，匯管纖維間隔稍增寬。肝碩化組(見圖3~4)：見假小葉形成，小葉內(nèi)中央靜脈缺如，細(xì)胞排列紊亂，多數(shù)細(xì)胞水腫，局部氣球樣變，小膽管增生、伴冇淋巴細(xì)胞浸潤。