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1、......一緒論1.生物化學研究的對象和內容是什么?解答:生物化學主要研究:(1)生物機體的化學組成、生物分子的結構、性質及功能;(2)生物分子分解與合成及反應過程中的能量變化;(3)生物遺傳信息的儲存、傳遞和表達;(4)生物體新陳代謝的調節(jié)與控制。2.你已經(jīng)學過的課程中哪些內容與生物化學有關。提示:生物化學是生命科學的基礎學科,注意從不同的角度,去理解并運用生物化學的知識。3.說明生物分子的元素組成和分子組成有哪些相似的規(guī)侓。解答:生物大分子在元素組成上有相似的規(guī)侓性。碳、氫、氧、氮、磷、硫等6種是解答蛋白質、核酸、糖和脂的主要組成元素。
2、碳原子具有特殊的成鍵性質,即碳原子最外層的4個電子可使碳與自身形成共價單鍵、共價雙鍵和共價三鍵,碳還可與氮、氧和氫原子形成共價鍵。碳與被鍵合原子形成4個共價鍵的性質,使得碳骨架可形成線性、分支以及環(huán)狀的多O種多性的化合物。特殊的成鍵性質適應了生物大分子多樣性的需要。氮、氧、硫、磷元素構成了生物分子碳骨架上的氨基(—NH2)、羥基(—OH)、羰基(C)專業(yè)word可編輯.......、羧基(—COOH)、巰基(—SH)、磷酸基(—PO4)等功能基團。這些功能基團因氮、硫和磷有著可變的氧化數(shù)及氮和氧有著較強的電負性而與生命物質的許多關鍵作用密切相
3、關。生物大分子在結構上也有著共同的規(guī)律性。生物大分子均由相同類型的構件通過一定的共價鍵聚合成鏈狀,其主鏈骨架呈現(xiàn)周期性重復。構成蛋白質的構件是20種基本氨基酸。氨基酸之間通過肽鍵相連。肽鏈具有方向性(N端→C端),蛋白質主鏈骨架呈“肽單位”重復;核酸的構件是核苷酸,核苷酸通過3′,5′-磷酸二酯鍵相連,核酸鏈也具有方向性(5′、→3′),核酸的主鏈骨架呈“磷酸-核糖(或脫氧核糖)”重復;構成脂質的構件是甘油、脂肪酸和膽堿,其非極性烴長鏈也是一種重復結構;構成多糖的構件是單糖,單糖間通過糖苷鍵相連,淀粉、纖維素、糖原的糖鏈骨架均呈葡萄糖基的重復
4、。二蛋白質化學1.用于測定蛋白質多肽鏈N端、C端的常用方法有哪些?基本原理是什么?解答:(1)N-末端測定法:常采用2,4―二硝基氟苯法、Edman降解法、丹磺酰氯法。①2,4―二硝基氟苯(DNFB或FDNB)法:多肽或蛋白質的游離末端氨基與2,4―二硝基氟苯2,4―DNFB)(反應(Sanger反應)生成DNP―專業(yè)word可編輯.......多肽或DNP―蛋白質。,由于DNFB與氨基形成的鍵對酸水解遠比肽鍵穩(wěn)定,因此DNP―多肽經(jīng)酸水解后,只有N―末端氨基酸為黃色DNP―氨基酸衍生物,其余的都是游離氨基酸。②丹磺酰氯(DNS)法:多肽或蛋
5、白質的游離末端氨基與與丹磺酰氯(DNS―Cl)反應生成DNS―多肽或DNS―蛋白質。由于DNS與氨基形成的鍵對酸水解遠比肽鍵穩(wěn)定,因此DNS―多肽經(jīng)酸水解后,只有N―末端氨基酸為強烈的熒光物質DNS―氨基酸,其余的都是游離氨基酸。③苯異硫氰酸脂(PITC或Edman降解)法:多肽或蛋白質的游離末端氨基與異硫氰酸苯酯(PITC)反應(Edman反應),生成苯氨基硫甲酰多肽或蛋白質。在酸性有機溶劑中加熱時,N―末端的PTC―氨基酸發(fā)生環(huán)化,生成苯乙內酰硫脲的衍生物并從肽鏈上掉下來,除去N―末端氨基酸后剩下的肽鏈仍然是完整的。④氨肽酶法:氨肽酶是一
6、類肽鏈外切酶或叫外肽酶,能從多肽鏈的N端逐個地向里切。根據(jù)不同的反應時間測出酶水解釋放的氨基酸種類和數(shù)量,按反應時間和殘基釋放量作動力學曲線,就能知道該蛋白質的N端殘基序列。(2)C―末端測定法:常采用肼解法、還原法、羧肽酶法。肼解法:蛋白質或多肽與無水肼加熱發(fā)生肼解,反應中除C端氨基酸以游離形式存在外,其他氨基酸都轉變?yōu)橄鄳陌被狨k禄铩"谶€原法:肽鏈C專業(yè)word可編輯.......端氨基酸可用硼氫化鋰還原成相應的α―氨基醇。肽鏈完全水解后,代表原來C―末端氨基酸的α―氨基醇,可用層析法加以鑒別。③羧肽酶法:是一類肽鏈外切酶,專一的從
7、肽鏈的C―末端開始逐個降解,釋放出游離的氨基酸。被釋放的氨基酸數(shù)目與種類隨反應時間的而變化。根據(jù)釋放的氨基酸量(摩爾數(shù))與反應時間的關系,便可以知道該肽鏈的C―末端氨基酸序列。2.測得一種血紅蛋白含鐵0.426%,計算其最低相對分子質量。一種純酶按質量計算含亮氨酸1.65%和異亮氨酸2.48%,問其最低相對分子質量是多少?解答:(1)血紅蛋白:(最低相對分子質量=2)酶鐵的相對原子質量55.8×100=×100=13100鐵的百分含量0.426因為亮氨酸和異亮氨酸的相對分子質量相等,所以亮氨酸和異亮氨酸的殘基數(shù)之比為:1.65%:2.48%=
8、2:3,因此,該酶分子中至少含有2個亮氨酸,3個異亮氨酸。2×131.11×100Mr(最低)=≈159001.653×131.11×100Mr(最低)=≈1590