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《不同PH值PBS配制》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、PBS緩沖液的配制PBS是最普遍不過的實驗室緩沖液,但其配方各異。以下是總結:?母液的配制:?0.2MNa2HPO4:稱取71.6gNa2HPO4-12H2O,溶于1000ml水0.2MNaH2PO4:稱取31.2gNaH2PO4-2H2O,溶于1000ml水各種濃度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2MPB(pH=7.4,100ml):取19ml0.2mol/L的NaH2PO4,81ml0.2mol/L的Na2HPO4,即可。然后只需將0.2MPB(pH=7.4)按相應比例適當稀釋即可,如:0.1MPB(PH=7.4):取500ml0.2MPB,加
2、水稀釋至1000ml即可。0.01MPB(PH=7.4):取50ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml即可。0.02MPB(PH=7.4):取100ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml即可。?若需要NaCl的話,加入NaCl至0.9%(g/100ml)即可。?另:其它各種另PH值的0.2MPB(100ml)配方:pH????0.2MNaH2PO4(ml)??????0.2MNa2HPO4(ml)5.7?????93.5????????????6.55.8?????92?????????????85.9?????90????????????106.
3、0?????87.7???????????12.36.1?????85?????????????156.2?????81.5????????????18.56.3?????77.5????????????22.56.4?????73.5?????????????26.56.5?????68.5?????????????31.56.6?????62.5?????????????37.56.7?????56.5?????????????43.56.8?????51?????????????496.9?????45??????????????557.0???
4、??38?????????????627.1?????33?????????????677.2?????28??????????????727.3?????23??????????????777.4?????19?????????????817.5?????16??????????????847.6?????13??????????????877.7?????10.5?????????????89.57.8?????8.5?????????????91.57.9?????7??????????????938.0?????5.3?????????????
5、94.70.01M磷酸鹽緩沖液(PBS)配制方法稱取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于800ml蒸餾水中,用HCl調節(jié)溶液的pH值至7.4,最后加蒸餾水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高壓下蒸氣滅菌(至少20分鐘),保存存于室溫或4℃冰箱中。需要注意的是,通常所說的濃度0.01M指的是緩沖溶液中所有的磷酸根濃度,而非Na離子或K離子的濃度,Na離子和K離子只是用來調節(jié)滲透壓的。如果是用于免疫組化的話,則需要在配置的時候分別加入100u/ml青霉素和鏈霉素之后再調PH、定容、滅
6、菌消毒。PBS是磷酸緩沖液的簡稱,不僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋,原因就是它具有鹽平衡、可調整的適宜pH緩沖作用,蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結構及生物特性;生理鹽水不具有調整pH的作用,對完整的、具有活性的物質不能保證其在最適條件下參與生物反應,所以使用PBS是首選。PBS也不是萬能的,有的生物活性物質需要的條件比PBS還要高,就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分,維持最佳的條件保證生物活性物質保持其最完整的特性。文獻查得:磷酸緩沖液(PBS):NaCl8.0g,KH2PO40.2g,Na2HPO42.9g
7、,KCl0.2g,重蒸水1000mL,調pH至7.4。