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《不同品種荔枝葉多糖的提取及含量比較.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、第26卷第1期廣東石油化工學(xué)院學(xué)報(bào)V01．26No．12016年2月JournalofGuangdongUniversityofPetrochemicalTechnologyFebruary2016不同品種荔枝葉多糖的提取及含量比較范芳，翁楚壘(廣東石油化工學(xué)院環(huán)境與生物工程學(xué)院，廣東茂名525000)摘要：利用酶解提取法、Sevag法脫蛋白、乙醇析出法對(duì)茂名地區(qū)三種荔枝(白臘、三月紅、黑葉)的荔枝葉多糖進(jìn)行了初步提取，通過(guò)苯酚一硫酸法對(duì)提取物中的多糖質(zhì)量進(jìn)行了測(cè)定，并對(duì)不同的荔枝葉多糖的質(zhì)量進(jìn)行了比較。結(jié)果表明，這三種
2、荔枝的荔枝葉多糖質(zhì)量由多到少依次為：白臘>三月紅>黑葉。關(guān)鍵詞：荔枝葉；多糖；提取；比較中圖分類號(hào)：TQ281文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：2095—2562(2016)01—0028—03荔枝是亞熱帶果樹(shù)，常綠喬木，盛產(chǎn)于中國(guó)華南和西南等地，尤以廣東和福建南部、臺(tái)灣栽培最盛?，F(xiàn)代研究表明，荔枝具有抗氧化、延緩衰老、降血糖、降血脂、抗腫瘤及調(diào)節(jié)造血功能等生理作用，初步確定活性多糖是荔枝多種生理功能的重要物質(zhì)基礎(chǔ)之一。茂名地區(qū)荔枝產(chǎn)量占全國(guó)60％以上，而荔枝葉目前為止還沒(méi)有被利用起來(lái)，因此，本研究旨在對(duì)不同品種的荔枝葉多糖進(jìn)行提
3、取并比較其含量，為充分利用荔枝葉廢棄物提供理論依據(jù)。1材料與方法1．1材料與設(shè)備從茂名荔枝園采摘白臘、三月紅、黑葉三種荔枝葉；無(wú)水葡萄糖、苯酚、濃硫酸、氯仿、無(wú)水乙醇、正丁醇，均為分析純。可見(jiàn)分光光度計(jì)(V一50000型，上海元析儀器有限公司)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(RE一2000A，上海亞萊生化儀器廠)；循環(huán)水式多用真空泵(SHB—III型，鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司)；數(shù)顯恒溫振蕩器(THZ一82B型，金壇市盛威試驗(yàn)儀器廠)；電動(dòng)離心機(jī)(80—2型，常州奧華儀器有限公司)；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(DHG一9246A型，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備
4、有限公司)；電子天平(FA12084型，上海精密科學(xué)儀器有限公司)；數(shù)顯恒溫水浴鍋(HH一4型，常州奧華儀器有限公司)；冰箱(BCD一231E型，伊萊克斯(中國(guó))電器有限公司)；九陽(yáng)料理機(jī)(JYL—D051型，九陽(yáng)股份有限公司)。1．2試驗(yàn)方法1．2．1荔枝葉多糖的提取1)酶解提取。稱取荔枝葉粉末6og，平均分為三組，各加入0．3g(占荔枝葉粉末質(zhì)量的1．5％)的纖維素酶，然后加入200mL的蒸餾水(料液質(zhì)量比1：10)，放入水浴鍋中在6o溫度下水浴2h。把水浴后得到的樣品用紗布(3至4層)把液體跟固體分開(kāi)。把取得的液體
5、在4℃下靜置24h后，在轉(zhuǎn)速為4000dmin的離心機(jī)上離心20min。取上清液后重復(fù)離心兩至三次L1J。2)Sevag法脫蛋白。按照25：4：1的質(zhì)量比在上述清液中分別加入氯仿和正丁醇，以36℃的溫度在搖床里激烈搖晃30min，然后把搖晃后得到的樣品以4000r／min的轉(zhuǎn)速離心20min，去上清液。再重復(fù)脫蛋收稿13期：2016—01—11；修回日期：2016—01—29基金項(xiàng)目：茂名市科技計(jì)劃項(xiàng)目(0130320)作者簡(jiǎn)介：范芳(1977一)，女，湖南隆回人，碩士，實(shí)驗(yàn)師，主要研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物的提取及活性研究。第
6、1期范芳等：不同品種荔枝葉多糖的提取及含量比較29白的步驟兩至三遍，就可以得到脫蛋白后的糖液l2]。3)濃縮。把經(jīng)過(guò)脫蛋白處理的樣品糖液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在60℃、35r／rain的條件下進(jìn)行濃縮，當(dāng)濃縮液約為樣品糖液體積的1／2時(shí)停止。4)乙醇沉淀(醇沉)。向經(jīng)過(guò)脫蛋白處理且經(jīng)過(guò)濃縮后的糖液中加入4倍體積的乙醇(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為90％)，搖勻后在4℃的溫度下靜置24h。把靜置后的糖液以4000r／min的轉(zhuǎn)速離心20min，除去上清液，洗凈烘干后得到荔枝葉多糖的初步提取物，經(jīng)過(guò)稱量后可得出其質(zhì)量[3]。1．2．2多糖質(zhì)量的測(cè)定1)
7、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。準(zhǔn)確吸取質(zhì)量濃度為O．04mCrnL的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液各0，0．2，0．4，0．6，0．8，1．0，1．2mL至具塞試管中，加蒸餾水至2rIlL，再加1IIlL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5％的苯酚，徹底混勻后加入5mL濃硫酸，再次徹底混勻后在沸水中水浴30min，迅速冷卻至室溫并靜置20rain。以空白試劑作為參比液進(jìn)行對(duì)照，測(cè)定各溶液的吸光度，用紫外分光光度法于490nln處測(cè)定吸光度A值。以葡萄糖質(zhì)量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線l4J。2)多糖質(zhì)量的測(cè)定。準(zhǔn)確稱取三種荔枝葉多糖提取物10Illg，于100mL
8、容量瓶中加蒸餾水定容至刻度，混勻后各吸取1．0mL于具塞試管中，分別加入蒸餾水至2rnL，再加入1mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5％的苯酚，混勻后加入5mL濃硫酸，再次充分混勻，在沸水中水浴30min后，迅速冷卻至室溫并靜置20min。以蒸餾水為空白對(duì)照，用紫外分光光度法于490nnl處測(cè)定粗多糖樣品的吸光度A值，每種荔枝葉多糖提取
