薄層色譜方法總結(jié).ppt

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1、薄層色譜方法總結(jié)1.方法原理A.流動(dòng)相利用毛細(xì)管力帶著樣品穿過固定相。B.樣品與固定相的相互作用是指組份在移行過程中由于偶極-（誘導(dǎo)）-偶極相互作用，氫鍵和范德華力的作用而產(chǎn)生不同程度的延緩、吸附、分散、離子交換和絡(luò)合等分離機(jī)理。2.溶劑使用的溶劑必須是“分析純”或“色譜純”，溶劑組成采用體積量比（如正丁醇-冰乙酸-水=4：1：1，V/V/V），或者絕對(duì)量（如18ml甲苯+2ml甲醇）。其總量應(yīng)足以使TLC/HPTLC板的浸入深度約為5mm。展開劑要求新鮮配制，不要多次反復(fù)使用，如需分層，則按要求放置分層后取需要的一相（上層或下層），備用。一、溶

2、劑選擇規(guī)則考慮分離成分的極性、溶解度、吸附度根據(jù)相似相溶原則，注意，極性相差大的不混溶混合溶劑通常使用一個(gè)高極性和低極性溶劑組成的混合溶劑先加入極性較小的溶劑，若不溶再加入少量極性大的溶劑一般把兩種溶劑混合時(shí)，采用高極性/低極性的體積比為1/3的混合溶劑，如果有分開的跡象，再調(diào)整比例（或者加入第三種溶劑），達(dá)到最佳效果；如果沒有分開的跡象（斑點(diǎn)較“拖”），最好是換溶劑。展開劑的比例要靠嘗試二、展開劑的選擇條件1.對(duì)所需成分有良好的溶解性2.可使成分間分開3.待測(cè)組分的Rf在0.2-0.8之間，定量測(cè)定在0.3-0.5之間4.不與待測(cè)組分或吸附劑發(fā)

3、生化學(xué)反應(yīng)5.沸點(diǎn)適中，黏度較小6.展開后組分斑點(diǎn)圓且集中7.混合溶劑最好用新鮮配制三、溶劑極性參數(shù)表環(huán)已烷:-0.2、石油醚（Ⅰ類，30~60℃）、石油醚（Ⅱ類，60~90℃）、正已烷:0.0、甲苯:2.4、二甲苯:2.5、苯:2.7、二氯甲烷:3.1、異丙醇:3.9、正丁醇:3.9、四氫呋喃:4.0、氯仿:4.1、乙醇:4.3、乙酸乙酯:4.4、甲醇:5.1、丙酮:5.1、乙腈:5.8、乙酸:6.0、水:10.21.一般說，弱極性溶劑體系的基本兩相由正己烷和水組成，再根據(jù)需要加入甲醇、乙醇、乙酸乙酯來調(diào)節(jié)系統(tǒng)的極性，以達(dá)到好的分離效果，適合于

4、生物堿、黃酮和萜類等的分離。2.中等極性的溶劑體系由氯仿和水基本兩相組成，由甲醇、乙醇、乙酸乙酯等來調(diào)節(jié)，適合蒽醌、香豆素，以及一些極性較大的木脂素和萜類的分離。3.強(qiáng)極性溶劑，由正丁醇和水組成，也靠甲醇、乙醇、乙酸乙酯等來調(diào)節(jié)，適合于極性很大的生物堿類化合物的分離。四、展開劑的選擇物質(zhì)分子化學(xué)結(jié)構(gòu)中，通常由較極性部分和非極性部分兩部分。例如下面以苯丙烷為極性小部分，隨著極性基團(tuán)部分的增加，總體的極性就增加，展開劑極性也增加了。1.類極性較小的揮發(fā)性物質(zhì)冰片：石油醚(30～60℃)—醋酸乙酯(17:3)厚樸酚：苯－醋酸乙酯(9:1.5)丹皮酚：環(huán)

5、己烷－醋酸乙酯(3:1)α-香附酮：苯－醋酯乙酯－冰醋酸(92:5:5)結(jié)論：以石油醚、正構(gòu)烷和苯為體積百分?jǐn)?shù)比較大的溶劑，通常起溶解和分離化合物的作用，而用醋酸乙酯為調(diào)節(jié)Rf（比移值）的溶劑。為了減少拖尾之類其他相似相溶原則以外的影響，適當(dāng)加入添加劑，如有機(jī)酸或者有機(jī)堿。2.類極性較小的不揮發(fā)性物質(zhì)β-谷甾醇：環(huán)己烷－醋酸乙酯－甲醇(6:2.5:1)或者環(huán)己烷－丙酮(5:2)、熊果酸：甲苯－醋酸乙酯－冰醋酸(12:4:0.5)、齊墩果酸：氯仿－甲醇(40:1)、豬去氧膽酸：氯仿－乙醚－冰醋酸(2:2:1)、大黃素：苯—醋酸乙酯—甲醇(15:2:

6、0.2)或者苯—乙醇(8:1)、丹參酮ⅡA：苯-醋酸乙酯-甲酸(40:25:4)、穿心蓮內(nèi)酯：氯仿-無水乙醇(9:1)靛玉紅、靛藍(lán)氯仿－乙醇(9:1)或者苯－氯仿－丙酮(5:4:1)結(jié)論：這類物質(zhì)展開劑極性比極性較小的揮發(fā)性物質(zhì)洗脫力強(qiáng)一些，因?yàn)檫@類物質(zhì)極性小的母核大，而極性大的基團(tuán)通?？梢孕纬蓺滏I，比如羧酸、羥基。以上物質(zhì)，母核分子量減小、母核結(jié)構(gòu)中不飽和健的增加（尤其是出現(xiàn)苯環(huán)），極性基團(tuán)的增加，都使極性增加，展開劑極性也增大。。這個(gè)范圍內(nèi)的物質(zhì)很多，一般展開劑大百分?jǐn)?shù)的溶劑可以從環(huán)己烷—〉甲苯—〉二甲苯—〉苯—〉氯仿的順序，按照極性要求選擇

7、。這里注意，異丙醇、正丁醇極性指數(shù)也比較小，在這范圍的化合物很少用，因?yàn)檎承源蟆⒄归_慢，造成斑點(diǎn)擴(kuò)散；另外，羥基的氫鍵作用力也有不利。調(diào)節(jié)Rf值的溶劑，從醋酸乙酯—〉甲醇—〉丙酮—〉乙醇。揮發(fā)性物質(zhì)也有很多帶羰基、羥基的，但從它的揮發(fā)性就可以明白，分子間作用力不強(qiáng)，另外，母核與石油醚、正構(gòu)烷和苯的結(jié)構(gòu)差異小，估計(jì)更容易脫離硅膠吸附，更快進(jìn)入溶劑中，而不需要通過提高展開劑的極性。3.類極性大的小分子有機(jī)酸結(jié)論：這類物質(zhì)多數(shù)是苯乙烯母核的，這個(gè)結(jié)構(gòu)的極性本身比較大，另外有酚羥基和羧酸基團(tuán)，個(gè)別有多羥基配基。皂苷的展開劑差不多，極性大。注意甲酸通常指的

8、是濃度85%左右的，含有水。沒食子酸：氯仿－醋酸乙酯－甲酸(5:4:1)、阿魏酸、咖啡酸、菊苣酸、綠原酸、異綠原酸。例如下面以苯丙烷為極