豬病-豬偽狂犬病.ppt

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1、偽狂犬?。≒seudorabies,PR)(Aujeszky’sdisease）一、概述偽狂犬病是由PRV引起的家畜和多種野生動物的急性傳染病。牛、羊、貓、犬、許多野生動物、肉食動物及野生嚙齒類等動物發(fā)病后通常具有發(fā)熱、奇癢及腦脊髓炎等典型癥狀，均為致死性感染，但呈散發(fā)形式。豬是PRV的貯存宿主和傳染源。人對PRV無易感性。二、病原體PRV屬于皰疹病毒科α皰疹病毒亞科豬皰疹病毒I型。無囊膜的病毒顆粒直徑約為110-150nm，帶囊膜的成熟病毒粒子的直徑約180nm。衣殼殼粒的長度約12nm，寬9nm。其空心部份的直徑約4nm。囊膜表面有呈放射狀排列的纖突。偽狂犬病病毒粒子形態(tài)三、發(fā)病機(jī)理多種

2、因素：豬的年齡、病毒毒株、感染劑量和途徑扁桃體、咽粘膜增殖，然后經(jīng)嗅神經(jīng)、三叉神經(jīng)和吞咽神經(jīng)的神經(jīng)鞘淋巴達(dá)到脊髓和腦中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥四、流行病學(xué)特點(diǎn)1．易感宿主：豬是貯存宿主，其他動物如牛、羊、貓、犬、兔、小鼠也可感染。2．傳播途徑：（1）水平傳播：病毒主要通過已感染豬排毒而傳給健康豬，病毒污染的人員和器具。通過鼻分泌物、乳汁和精液空氣傳播擴(kuò)散。（2）垂直傳播：懷孕母豬能發(fā)生垂直傳播。（1）流產(chǎn)胎兒、陰道分泌物和胎盤是病毒的主要傳染源。（2）野毒感染豬、弱毒疫苗免疫豬都會導(dǎo)致潛伏感染。在特定的自然條件的刺激或環(huán)境壓力下，如販運(yùn)、分娩等可導(dǎo)致潛伏狀態(tài)的病毒復(fù)活、擴(kuò)散。4、流行季節(jié)：具有一定的季

3、節(jié)性，多發(fā)生在寒冷的季節(jié)，但其它季節(jié)也有發(fā)生。3、傳染源五、癥狀及病型1.妊娠母豬：流產(chǎn)、產(chǎn)死胎、木乃伊胎，其中以產(chǎn)死胎為主。寒冷季節(jié)即冬末初春多發(fā)生。母豬則表現(xiàn)為返情、屢配不孕。2.新生仔豬：表現(xiàn)高熱、食欲廢絕、呼吸困難、嘔吐腹瀉、抑郁震顫、神經(jīng)癥狀，昏迷以至衰竭死亡，15日齡以內(nèi)仔豬死亡率高達(dá)100%。剖檢主要是腎臟布滿針尖樣出血點(diǎn)、有時見到肺水腫、腦膜表面充血、出血。3.斷奶仔豬發(fā)病率20%-40%，死亡率10%-20%左右，主要表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀、拉稀、嘔吐等。4.種豬不育癥。公豬感染偽狂犬病病毒后，公豬發(fā)生睪丸腫脹、萎縮等種用性能降低或喪失；5.成年豬僅表現(xiàn)增重減慢等輕微溫和癥狀。1．病

4、毒分離鑒定：豬、牛、兔、犬、貓、猴、駒和雪貂的腎細(xì)胞牛的睪丸細(xì)胞，雞胚成纖維細(xì)胞、PK-15、IBRS-2細(xì)胞,Vero細(xì)胞，倉鼠的BHK-21細(xì)胞。六、診斷2．ELISA3．乳膠凝集試驗(yàn)（LAT）4．PCR5．中和試驗(yàn)法(SNT)6．間接血凝集試驗(yàn)（IHA）12345678920001000圖1PRVDNAPCR擴(kuò)增產(chǎn)物的凝膠電泳（N=3）1.TakaraDL-2000Marker；2.扁挑體；3.胸腺；4.頸部淋巴結(jié)；5.腹股溝淋巴結(jié)；6.大腦；7.小腦；8.嗅球；9.脊髓100250鑒別診斷偽狂犬病的鑒別診斷是在使用偽狂犬病的基因標(biāo)志疫苗的前提下應(yīng)用的一種診斷方法。偽狂犬病的基因標(biāo)志疫苗

5、—是在TK基因缺失的基礎(chǔ)上，將病毒的非必需糖蛋白基因（gE和gG）進(jìn)行缺失，得到的突變株就不能產(chǎn)生被缺失的糖蛋白，但又不影響病毒在細(xì)胞上的增殖與免疫原性。將這種基因標(biāo)志疫苗注射動物后，動物不能產(chǎn)生抗缺失蛋白的抗體。因此，可通過血清學(xué)方法將自然感染野毒的血清學(xué)陽性豬與注苗豬區(qū)分開來。gG-ELISA鑒別診斷{全病毒抗原{gG蛋白抗原陽性血清(全病毒)陽性血清(全病毒)陽性血清(gG缺失)陰性血清陽性血清(gG缺失)陰性血清1280640320160804020101偽狂犬病毒gG基因的克隆與表達(dá)2偽狂犬病gG-乳膠凝集試驗(yàn)（gG-LAT）鑒別診斷方法的建立3偽狂犬病gG-酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（gG-

6、ELISA）鑒別診斷方法的建立gG在E.coli中的表達(dá)1234PrVEa株gG、gE的體外表達(dá)gE在酵母中的表達(dá)gE在E.coli中的表達(dá)偽狂犬病鑒別診斷試劑盒偽狂犬病毒gG、gE-LAT鑒別診斷試劑盒偽狂犬病gG、gE-ELISA鑒別診斷試劑盒4種鑒別診斷試劑盒均已申報(bào)國家新獸藥證書，進(jìn)入最后的復(fù)核階段。七、綜合防制1、疫苗的免疫預(yù)防(1)滅活疫苗免疫程序：種豬第一次注射后，間隔4-6周后加強(qiáng)免疫一次，以后每6個月注射一次，產(chǎn)前一個月加強(qiáng)免疫一次。留作種用的斷奶仔豬在斷奶時注射一次，間隔4-6周后，加強(qiáng)免疫一次，以后按種豬免疫程序進(jìn)行。育肥用的斷奶仔豬在斷奶時注射一次，直到出欄。（2）基因

7、缺失疫苗仔豬、乳豬及育肥豬首免日齡根據(jù)母源抗體水平而定，可1日齡滴鼻免疫或斷奶時免疫或70~80日齡免疫，一個月后加強(qiáng)免疫一次；種豬則根據(jù)當(dāng)?shù)匾咔楹蛯?shí)際情況每年免疫2~4次。免疫程序：偽狂犬病TK-/gG-基因缺失弱毒疫苗偽狂犬病TK-/gE-基因缺失弱毒疫苗TK-/gG-/LacZ+雙基因缺失疫苗生產(chǎn)按常規(guī)方法制備雞胚成纖維單層細(xì)胞，將TK-/gG-/LacZ+雙基因缺失突變株按所加培養(yǎng)液1：1