農(nóng)殘檢測方法.doc

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1、農(nóng)殘檢測方法1.農(nóng)殘試劑配置緩沖溶液：取一包緩沖劑，加入500ml蒸餾水，溶解攪拌均勻，密閉、避光、陰涼處保存。顯色劑：取顯色劑一瓶，加入15ml緩沖溶液溶解，4℃冰箱中保存。底物：取底物一瓶，加入15ml蒸餾水溶解，4℃冰箱中保存。乙酰膽堿酯酶：取乙酰膽堿酯酶一瓶，用3ml緩沖溶液溶解，4℃冰箱中保存。注：因農(nóng)殘試劑生產(chǎn)廠家眾多，使用時請以試劑說明書為準！2.樣品處理選取有代表性的蔬菜樣品，擦掉樣品表面泥土，剪成1cm見方碎片，取樣品1g，放入燒杯或提取瓶中，加入5ml緩沖溶液，振蕩1min～2min，倒出提取液，靜置3min～5min，待用。注意：樣品不可用水沖洗，應(yīng)擦去表面泥土等雜物后取

2、樣。為了保證取樣具有代表性，葉菜一般取來自不同植株葉片的葉尖部樣本，果菜從不同個體的表皮處取樣。3.對照溶液測試在提取瓶中加入2.5ml緩沖溶液，再加入100ul酶液、100ul顯色劑，搖勻后于37℃放置15分鐘(每批樣品的控制時間必須一致)。15分鐘后再加入100μL底物搖勻,此時檢液開始顯色反應(yīng),應(yīng)立即倒入1cm比色皿，放入儀器比色池中，將儀器調(diào)到測量界面,按操作指示面板按鍵區(qū)的“對照”按鈕，儀器開始做對照。3分鐘后儀器自動對照完成，對照完成后將對照樣取出，保持儀器界面不變。注意：對照測試必須在第一通道進行，對照測試△A應(yīng)＞0.3，若對照測試的結(jié)果小于以上數(shù)值時，儀器會自動提示“對照錯誤”

3、，須重新做對照，以保證測量結(jié)果的準確性。(對照測試△A<0.3的原因：一是酶的活性不夠，二是反應(yīng)溫度太低。)4.樣品溶液測試另取干凈的提取瓶，放入2.5ml樣品提取液，加入100ul酶液、100ul顯色劑，搖勻后于37℃放置15分鐘(放置的時間與對照液放置的時間必須一致)。15分鐘后再加入100μL底物搖勻,此時檢液開始顯色反應(yīng),應(yīng)立即倒入1cm比色皿，放入儀器比色池中，按操作指示面板按鍵區(qū)的“測量”按鈕開始測量，3分鐘后儀器測量完成，顯示測量結(jié)果。結(jié)果以酶被抑制的程度（抑制率）表示，當蔬菜樣品提取液對酶的抑制率≥50%時，表示蔬菜中有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在，樣品為陽性結(jié)果，陽性結(jié)

4、果的樣品需要重復(fù)檢驗2次以上。對陽性結(jié)果的樣品，可用其它方法進一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。5.說明蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時，可采取整株（體）蔬菜浸提。對一些含葉綠素較高的蔬菜，也可采取整株（體）蔬菜浸提的方法，減少色素的干擾。甲醛檢測方法1.試劑配置甲醛試劑（一）甲醛試劑（二）：將甲醛試劑（二）①加少量熱水溶解，再加入甲醛試劑（二）②，冷卻后定容于50ml容量瓶注意：所有試劑均需避光、低溫（冰箱4℃）保存！甲醛試劑（一）有腐蝕性；配制好的甲醛試劑（二）可使用一個月。2.樣品處理準確稱取0.2g樣品放入哈

5、希管中，加入5滴甲醛試劑（一）和10ml蒸餾水，混勻后蓋緊瓶蓋，放入沸水中加熱5min，取出冷卻至室溫，用0.45μm微孔濾膜過濾，以除去懸浮顆粒，此為待測溶液。3.空白取蒸餾水10ml于10ml比色管中，加入甲醛試劑（二）1ml，混合均勻，放入恒溫水浴鍋中50℃加熱15分鐘，取出冷卻至室溫，移入1cm比色皿中，放入儀器相應(yīng)比色池中，按操作指示面板區(qū)的“對照”鍵進行對照，對照完成后，儀器會自動記錄對照結(jié)果，并在顯示屏下方顯示為“對照測量完成”。4.測量移取處理好的樣品溶液5ml于10ml比色管中，加入蒸餾水定容至10ml，然后再加入甲醛試劑（二）1ml，混合均勻，放入恒溫水浴鍋中50℃加熱15

6、分鐘，取出冷卻至室溫，移入1cm比色皿中，放入已經(jīng)做過對照的儀器通道中按操作提示面板區(qū)的“測量”鍵進行測量，測量完成后，儀器自動顯示樣品中甲醛濃度值X（mg/kg）。吊白塊檢測方法1.試劑配置吊白塊試劑（一）吊白塊試劑（二）：將吊白塊試劑（二）①加少量熱水溶解，再加入吊白塊試劑（二）②，冷卻后定容于50ml容量瓶注意：所有試劑均需避光、低溫（冰箱4℃）保存！吊白塊試劑（一）有腐蝕性；配制好的吊白塊試劑（二）可使用一個月。2.樣品處理準確稱取0.2g樣品放入哈希管中，加入5滴吊白塊試劑（一）和10ml蒸餾水，混勻后蓋緊瓶蓋，放入沸水中加熱5min，取出冷卻至室溫，用0.45μm微孔濾膜過濾，以除

7、去懸浮顆粒,此為待測溶液。3.空白取10ml蒸餾水于10ml比色管中，加入吊白塊試劑（二）1ml，混合均勻，放入恒溫水浴鍋中50℃加熱15分鐘，取出冷卻至室溫，移入1cm比色皿中，放入儀器相應(yīng)比色池中，按操作指示面板區(qū)的“對照”鍵進行對照，對照完成后，儀器會自動記錄對照結(jié)果，并在顯示屏下方顯示為“對照測量完成”。4.測量移取處理好的樣品溶液5ml于10ml比色管中，加入蒸餾水定容至10ml，然后再