天然藥化蘆丁實驗講義.doc

《天然藥化蘆丁實驗講義.doc》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。

1、蘆丁的提取與鑒定實驗講義一、實驗?zāi)康奶J?。≧utin）廣泛存在于植物界中，尤以槐花米（為植物sophorajaponica的末開放的花蕾）和蕎麥中含量最高，可作為大量提取蘆丁的原料。本實驗采用堿提取一酸沉淀方法從槐花米提取蘆丁，以蘆丁為實例學(xué)習(xí)黃酮類成分的提取分離方法及鑒定方法。圖中紅色數(shù)字表示2′、3′、4′,位蘆丁屬于黃酮類化合物5位羥基和4位羰基形成氫鍵，酸性較弱，7位和3′、4′位存在羥基酸性較強，根據(jù)堿提酸沉的原理提取，蘆丁酸性較強，用弱堿提?。┒嶒炘硖J丁是由槲皮素（Quercetin）3位上的羥基與蕓香糖連結(jié)而成的苷，依據(jù)蘆丁結(jié)構(gòu)中含有酚羥基，能與

2、堿反應(yīng)，生成鹽而溶于水中，向此鹽溶液中加入酸，則蘆丁游離析出。三、材料及設(shè)備槐花米，硼砂，石灰乳，濃鹽酸，紗布，布氏漏斗，搪瓷盤，燒杯，pH試紙，玻璃棒，電爐，無水乙醇，正丁醇，醋酸，氨水，紫外分光光度計，層析濾紙，薄層板，層析展缸四、實驗過程1、蘆丁的提取、及水解取槐花米40g，置于1000ml燒杯中，用冷水快速清洗去泥沙等雜質(zhì)瀝干水，加0.4%硼砂水溶液（弱堿性溶液）400ml，pH6~7左右，在攪拌下以石灰乳調(diào)至pH8，加熱微沸30分鐘，用紗布過濾，重復(fù)操作一次，合并濾液（堿提），用濃鹽酸調(diào)pH至5,（酸沉，酸性不易過強，否則會導(dǎo)致析出的蘆丁1位上的氧在強酸條

3、件下和酸形成钅羊鹽后又溶于水中導(dǎo)致產(chǎn)率降低）放置過夜，抽濾，水洗3～4次，放置空氣中自然干燥得粗蘆丁。2、粗品蘆丁精制取粗蘆丁2g，加乙醇50~60ml加熱溶解（溶解后粗品中的粘性多糖、鞣質(zhì)、粘性物質(zhì)、雜質(zhì)不溶于醇，可過濾除去，醇一般過量，多加機倍醇，邊加醇邊視粗品溶解情況而定，不易猛然過量否則造成浪費），乘熱抽濾（乘熱抽濾是為了防止溶于醇中的部分蘆丁手冷析出導(dǎo)致產(chǎn)率下降，可提前將抽濾瓶和布氏漏斗在烘箱中烘熱，）將濾液濃縮至約20~30ml，放置析出結(jié)晶。（過濾即得蘆丁精制品）4、紙層析鑒定準(zhǔn)備層析濾紙和薄板，配置展開劑（正丁醇-醋酸-水=4:1:1），與標(biāo)準(zhǔn)品對照

4、展開，可見光下觀察，再在紫外光下觀察，經(jīng)氨氣后再觀察。展開劑不能沒過基線，防止將蘆丁溶于展開劑中，展開后烘干或吹干后，薄層板上顯微黃色，在紫外燈線觀察，標(biāo)準(zhǔn)品對照組、交叉點樣組、樣品組三組在同一條直線上，Rf相等，三組展開后，各出現(xiàn)單個顯色點，說明提取得到的蘆丁為純品。