資源描述：
《苧麻atp2基因RNA干擾表達(dá)載體的構(gòu)建及其干擾效果初步研究.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、分類號(hào)密級(jí)公開編號(hào)磧士蚵究嗲依恰夂題目苧麻咖基因干擾表達(dá)裁體的構(gòu)建及其干擾果初步研究學(xué)院（所、中心）生命糾學(xué)學(xué)院專業(yè)名稱植物學(xué)研究生姓名林娜學(xué)號(hào)導(dǎo)師姓名劉飛虎職稱教授年月論文獨(dú)創(chuàng)性聲明及使用授權(quán)本論文是作者在導(dǎo)師指導(dǎo)下取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研宄成果，不存在剽竊或抄襲行為。與作者一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意?，F(xiàn)就論文的使用對(duì)云南大學(xué)授權(quán)如下：學(xué)校有權(quán)保留本論文（含電子版），也可以采用影印、縮印或其
2、他復(fù)制手段保存論文；學(xué)校有權(quán)公布論文的全部或部分內(nèi)容，可以將論文用于查閱或借閱服務(wù)；學(xué)校有權(quán)向有關(guān)機(jī)構(gòu)送交學(xué)位論文用于學(xué)術(shù)規(guī)范審查、社會(huì)監(jiān)督或評(píng)獎(jiǎng)；學(xué)校有權(quán)將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容錄入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)用于檢索服務(wù)。內(nèi)部或保密的論文在解密后應(yīng)遵循此規(guī)定）摘要合成酶在線粒體中作為第復(fù)合體參與電子傳遞鏈，是合成的重要復(fù)合酶，其中部分的亞基，是合成與水解的關(guān)鍵位點(diǎn)，在高等植物中由核基因中基因編碼，在各物種間高度保守。合成酶分布異?；蚬?yīng)不足，常伴隨著雄性不育發(fā)生，但由于植物雄性不育是一個(gè)復(fù)雜的生物學(xué)過(guò)程，其作用機(jī)制目
3、前還不清楚。本研究，通過(guò)克隆苧麻保持系舊乂’的《爐基因片段，構(gòu)建干擾表達(dá)載體，以農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化苧麻及煙草獲得以下研究結(jié)果：通過(guò)引物篩選，克隆到苧麻保持系‘’的基因片段，構(gòu)建苧麻呻基因干擾表達(dá)載體，通過(guò)序列比對(duì)確認(rèn)載體構(gòu)建成功。將構(gòu)建好的干擾表達(dá)載體，通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化苧麻，結(jié)果苧麻葉盤全部褐化死亡未能獲得轉(zhuǎn)基因苧麻植株，苧麻的遺傳轉(zhuǎn)化體系還有待優(yōu)化。將所構(gòu)建的苧麻如基因干擾表達(dá)載體轉(zhuǎn)化普通煙草，獲得轉(zhuǎn)基因煙草株，通過(guò)驗(yàn)證其基因的相對(duì)表達(dá)量均比對(duì)照組煙草低。普通煙草沉默基因之后植株變矮小，葉綠素分布不均，易
4、感病，其花結(jié)構(gòu)與對(duì)照組相比花冠筒較短，雄蕊不能伸出花冠筒喉部，雌性生殖器官無(wú)明顯異常。通過(guò)花粉萌發(fā)實(shí)驗(yàn)，測(cè)得轉(zhuǎn)基因煙草花粉萌發(fā)率較對(duì)照組煙草下降了花粉管長(zhǎng)度下降了，轉(zhuǎn)基因煙草表現(xiàn)出部分雄性不育。檢測(cè)煙草葉片及大花蕾的脯氨酸含量及活性，結(jié)果表明轉(zhuǎn)基因煙草大花蕾中的脯氨酸含量比對(duì)照組低而葉片中的脯氨酸含量相比對(duì)照組高；轉(zhuǎn)基因煙草葉片及大花蕾的活性高于對(duì)照組煙草。轉(zhuǎn)基因煙草自交并收獲部分種子，種子發(fā)芽率較對(duì)照組煙草下降了。本研宄通過(guò)構(gòu)建叫基因干擾表達(dá)載體以農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化苧麻及煙草，終獲得轉(zhuǎn)基因煙草株，在植株形態(tài)
5、、花粉育性、種子萌發(fā)、脯氨酸含量及活性等方面與對(duì)照組表現(xiàn)出顯著差異。關(guān)鍵詞：苧麻，煙草干擾，花粉育性AbstractFiFq-ATPsynthaseisanimportantATP-synthesizingenzymeastheVcomplexinvolvedintheelectrontransportchaininmitochondrion.ThepsubunitofF]isthekeysiteofATPsynthesisandhydrolysisencodedbynucleargenesatp2inh
6、igherplantsandhighlyconservedinallspecies.Usually,deficiencyorabnormaldistributionofATPsynthaseisassociatedwithmalesterility,acomplicatedbiologicalprocesswithunclearmechanisms.WeconstructedRNAiexpressionvectorsusingatp2fragmentclonedfromramiemaintainer‘’】
7、）‘’，lowerthanthecontrol,whileprolinecontentsinleavescomparedtothecontrolincreasedby95.08%,SODactivityintransgenictobaccoleavesandbudswerehigherthanthecontroltobacco.(7)Weharvestedsomeseedsfrominbredtransgenictobaccototestthegerminationratethatwas74.23%low
8、erthanthecontrol.Inthisstudy，，，目錄錄第一章引言叫基因的功能研究合成酶合成酶亞基的研宄進(jìn)展植物雄性不育植物雄性不育的定義合成酶與植物雄性不育干擾在植物雄性不育研宄的應(yīng)用本研究的目的及意義第二章材料與方法實(shí)驗(yàn)材料、試劑和儀器設(shè)備實(shí)驗(yàn)方法苧麻總提取引物設(shè)計(jì)和擴(kuò)增苧麻基因目的基因連接載體并轉(zhuǎn)化大腸桿菌苧麻基因干擾表達(dá)載體的構(gòu)建農(nóng)桿菌介導(dǎo)苧麻基因干擾載體轉(zhuǎn)化苧麻和煙草轉(zhuǎn)基因植株分子鑒定轉(zhuǎn)基因植株生理生化指
