擬南芥種植方法.doc

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1、培養(yǎng)基上點(diǎn)種子：1.種子處理1.1種子消毒處理在培養(yǎng)基中點(diǎn)樣前，必須對(duì)種子進(jìn)行消毒，防止感菌，具體方法為：先將種子倒在干凈的紙上，挑去大的雜質(zhì)，再將種子倒入EP管中，加入1mL70%酒精，振蕩10min，將種子放在超凈臺(tái)中吹干。1.2點(diǎn)樣將消毒處理后的種子，可以利用牙簽點(diǎn)到培養(yǎng)基上，每次僅點(diǎn)一粒種子，根據(jù)培養(yǎng)皿的大小，確定一個(gè)里面能夠點(diǎn)多少個(gè)種子，每個(gè)90mm培養(yǎng)皿上大約種30粒種子，防止植株長(zhǎng)大后影響根與子葉的發(fā)育。1.3春化種子點(diǎn)樣完畢后，將培養(yǎng)基密封，置于4℃冰箱里放置72h后，放回溫室。土培法：1.種種子前，要將營(yíng)養(yǎng)土

2、用自來(lái)水混勻后，121℃滅菌30min，待土冷卻后，裝入種植擬南芥的方盒中，再將方盒放入紅色托盤中。2.將要點(diǎn)的種子平鋪在稱量紙上，用牙簽蘸取一粒種子點(diǎn)在營(yíng)養(yǎng)土上,每點(diǎn)一個(gè)小盒時(shí)都用牙簽做標(biāo)記，以免遺種某個(gè)盒子。（每個(gè)小盒子種5粒種子，每個(gè)大方盒子種9粒種子）3.將點(diǎn)了擬南芥種子的托盤置于22℃溫室，并用一個(gè)干凈的托盤蓋在上面，大約兩天后就可以打開(kāi)上面的托盤，待植物長(zhǎng)出4片葉子時(shí)，可以根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需求對(duì)植物的幼苗進(jìn)行取舍。4.植株生長(zhǎng)條件的控制幼苗移植后將花盆置于溫室內(nèi)，保證溫室溫度恒定在22℃，空氣濕度70—80%，光照強(qiáng)

3、度100—150μmol/m2/s，每天澆兩次純凈水，上午9點(diǎn)左右一次，下午5點(diǎn)左右一次；一周澆一次營(yíng)養(yǎng)液（1平匙溶于1L水中），營(yíng)養(yǎng)液要灌在盆底。澆水注意事項(xiàng)：1）水不可以澆的過(guò)多或過(guò)少，用手捏起一些土能擠出水來(lái)說(shuō)明就有點(diǎn)太濕；1）水要澆均勻，托盤四個(gè)角的方向如果噴壺噴不到，可以用擠瓶均勻地噴一些水；2）用噴壺澆水時(shí)，噴壺的水柱不可以太大，以免把植物連根拔起；3）當(dāng)植株出現(xiàn)花芽時(shí)，一定要保證水分的供應(yīng)，促進(jìn)果實(shí)的發(fā)育。當(dāng)植株結(jié)有豆莢時(shí)，可以適當(dāng)?shù)臏p少供水量，每?jī)扇鞚惨淮嗡憧?，以利于種子的成熟。開(kāi)花后的植物不能再用噴壺澆水

4、，要從盆底灌水，但不可以一次性灌太多水；4）在盆底灌水后，待植物吸收完水后，可以將盆底多余的水分倒出來(lái)；5）擬南芥受到脅迫判斷標(biāo)準(zhǔn)：葉柄發(fā)紫，葉片發(fā)黃，開(kāi)花期提前等；6）如果做生理實(shí)驗(yàn)，植物一旦受到脅迫，需要把植物丟棄，重新種植，以免實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確。注：溫室202光照時(shí)間：9:00—19:00為短日照，有利于營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)溫室203光照時(shí)間：6:00—22:00為長(zhǎng)日照，有利于生殖生長(zhǎng)5.種子的收集和保存擬南芥種子處在長(zhǎng)角果中，當(dāng)逐漸成熟時(shí)，長(zhǎng)角果由綠變黃，最后成褐色。當(dāng)長(zhǎng)角果變黃時(shí)，可以開(kāi)始單個(gè)采集長(zhǎng)角果，但此時(shí)種子中含有較多的生

5、長(zhǎng)抑制劑。因而，當(dāng)長(zhǎng)角果變褐時(shí)及時(shí)采集，可得到成熟又易發(fā)芽的種子。收獲的種子應(yīng)立即脫粒、清潔、干燥。種子的收集：在桌面上鋪幾張干凈的紙，戴上手套，將要收種的植物的花序用手將種子搓揉到紙上，再將紙上的大的雜質(zhì)挑去后，將種子裝到信封中，密封后將裝有種子的信封置于干燥環(huán)境下，在室溫條件下放置2-3周便可進(jìn)行儲(chǔ)藏。種子的貯存可根據(jù)貯存的目的不同，分為短期、中期、長(zhǎng)期貯藏。一般短、中期貯藏是將種子貯存在4℃，而長(zhǎng)期貯藏是保持在-20℃溫度下。當(dāng)取用長(zhǎng)期貯藏的種子前，先將貯存種子的容器預(yù)熱到室溫，或者將其置于37℃水浴10min，以盡量使

6、冰害降至最低。