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《臨床醫(yī)學(xué)論文-補腎固齒丸對人牙周膜成纖維細(xì)胞分泌TGF-β1的影響.doc》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、臨床醫(yī)學(xué)論文?補腎固齒丸對人牙周膜成纖維細(xì)胞分泌TGF-B1的影響作者:董偉姜茵吳亞菲張靜儀【摘要】H的研究補腎固齒丸水提液對人牙周膜成纖維細(xì)胞(PDLCs)TGF-01分泌水平的影響,以及在內(nèi)毒素存在的條件下其分泌水平的改變。方法原代培養(yǎng)人分周膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)液屮加入內(nèi)毒素和不同濃度的固齒丸水提液,在0、2、4、6天不同時間點用ELISA試劑盒檢測培養(yǎng)上清液中的TGF-P1水平。結(jié)果最高和較高劑量藥物組TGF—01的分泌水平明顯高于其它組(PvO.05),在含有內(nèi)毒素組屮,最高藥物劑量組的TGF-P1水平高于對照組,結(jié)果差異具有顯著性(Pv
2、O.Ol)。結(jié)論補腎固齒丸能在一定程度上改變PDLCs分泌TGF?B1的水平,內(nèi)毒素存影響藥物對PDLC的作用。【關(guān)鍵詞】補腎固齒丸TGF-31內(nèi)毒索ELISA[Abstract1ObjectiveTostudythesecretioneffectleveloftransforminggrowthfactorP1(TGF?01)inducedbyadministrationofextractsfromGuchiwan,atraditionalChinesemedication,onhumanperiodontalfibroblastinvit
3、rowithendotoxin.MethodsCulturedPDLCsfromhumanteethwerestimulatedwithLPSanddifferentconcentrationsGuchiwanextracts?ELISAkitwasusedtodetectTGF-P1levelofdifferenttestgroupsatdifferenttimc.RcsultsAhigherlevelofTGF?3lwasobservedatthetwohighestconcentrationgroupsofGuchiwan(P<0.05
4、).Inaddition,therewasasignificantdifferenceintheTGF?P1levelsbetweenthrhighestconcentrationgroupandtheothermedicationgroupsorthecontaolgroup(PvO.Ol)intheexistenceofLPS.ConclusionThisstudyindicatesthatGuchiwancaninfluencethesecretionlevelofTGF?01fromPDLC,whichmaybelessdistinc
5、tintheexistenceofLPS.[Keywords!bushenguchipi11;TGF?01;cndotoxin;ELISA牙周病是在致病菌和宿主免疫反應(yīng)失衡的情況下發(fā)牛的感染性疾病。多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子參與了牙周病的發(fā)生發(fā)展過程。TGF—卩是一種多肽生長因子,TGF-P1是其重要的亞型之一。TGF-P1能調(diào)節(jié)牙周組織的免疫應(yīng)答;促進(jìn)牙周組織的損傷修復(fù),對牙周膜細(xì)胞的增殖和牙周軟硬組織的再牛起著重要的調(diào)節(jié)作用,促進(jìn)牙周膜細(xì)胞的增殖及DNA的合成,增加成纖維細(xì)胞合成膠原及纖維粘連素,減少基質(zhì)金屬蛋白酶和纖溶酶激活劑的合成和結(jié)締紐
6、織的破壞;TGF-P1還能通過對牙胚細(xì)胞的調(diào)控影響牙體牙周組織的早期發(fā)育。牙周組織周圍的TGF—B1可來源于血小板,也可來自于牙周膜成纖維細(xì)胞自身[1]。補腎固齒丸是依照屮醫(yī)牙周病病因“腎虛齒豁”學(xué)說指導(dǎo),根據(jù)補腎固齒的原則,在六味地黃丸的基礎(chǔ)上增加了骨碎補、青鹽、黃芷等藥而制成的治療方劑。經(jīng)臨床研究和動物實驗證實該藥具有良好的治療效果,能改善全身及牙周組織狀況,增加牙槽骨致密度,減輕牙周組織炎癥和破壞[2]。但迄今為止同齒丸治療牙周病的確切機制尚不十分清楚,已有學(xué)者曾經(jīng)從細(xì)菌學(xué)組織學(xué)酶組織化學(xué)等不同角度對其治療機制進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)固齒丸能增強
7、健康菌叢的穩(wěn)定性,維護(hù)正常炎細(xì)胞功能等多種作用[3?5]。本研究采用體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法觀測補腎固齒丸水提液對人牙周膜成纖維細(xì)胞分泌TGF-P1的影響,探討補腎固齒丸的作用機制,以期為更好地利用天然藥物治療牙周病提供理論依據(jù)。1材料與方法1.1主要藥品與試劑高糖DMED培養(yǎng)基(Gibco,美國);類標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清(蘭州民海生物);胰酶(Gibco美國);二甲基亞硯(上海藥品制劑公司);青霉素100u/ml;鏈霉素100u/ml:TGF~P1雙抗夾心ELISA試劑盒(RB分裝);內(nèi)毒素E.coli,055:B5(Sigma,德國);補腎固齒丸水提液
8、(九芝堂金鼎藥業(yè)有限公司)1.2儀器相差倒置顯微鏡(Olympus,日本);C02恒溫孵箱(Forma,美國);4°C低溫離心機(Jouqt,美國);細(xì)胞計數(shù)儀(B