《生物固氮原理》PPT課件.ppt

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1、生物固氮胡吉利齊永峰呂勝滿董申申大氣中的N2尿素及動(dòng)植物遺體NO3-土壤中的微生物NH3NO3-氮素化肥自然界中的N循環(huán)固氮N2NH3工廠N2NH3閃電等N2NH3固氮微生物工業(yè)固氮:高能固氮:生物固氮:固氮微生物的種類按生物分類學(xué)分按與植物關(guān)系分2、氮單孢菌屬3、拜耶林克氏菌屬4、德克斯氏菌屬自生固氮微生物1、固氮菌屬共生固氮微生物固氮菌的發(fā)現(xiàn)1901年,M.W.拜耶林克首先發(fā)現(xiàn)并描述了這類細(xì)菌,他定名的有2個(gè)種:一是褐色固氮菌,常生存于中性或堿性土壤中;一是活潑固氮菌,常生存于水中。1938年,C.H.維諾格拉茨基將生產(chǎn)孢囊的菌株(以褐色固氮菌為代表)歸屬于固氮菌屬,

2、將不產(chǎn)生孢囊的菌株(以活潑固氮菌為代表)歸屬于氮單孢菌屬。1950年,H.G.德克斯先后提出建立拜耶林克氏菌屬和德克斯氏菌屬。什么是固氮菌細(xì)菌的一科。菌體桿狀、卵圓形或球形,無(wú)內(nèi)生芽孢,革蘭氏染色陰性。嚴(yán)格好氧性,有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型,能固定空氣中的氮素。生物固氮(nitrogenfixation)定義:分子態(tài)氮在生物體內(nèi)還原為氨的過程特點(diǎn):1、生物固氮是固氮微生物的一種特殊的生理功能,具固氮作用的微生物約近50個(gè)屬,它們的生活方式、固氮作用類型有較大區(qū)別,但細(xì)胞內(nèi)都具有固氮酶2、不同固氮微生物的固氮酶均由鉬鐵蛋白和鐵蛋白組成。固氮酶必須在厭氧條件下,即在低的氧化還原條件下才能催化

3、反應(yīng)3、固氮作用過程十分復(fù)雜,目前還不完全清楚。固氮作用的總反應(yīng)可用簡(jiǎn)式表示:e-+H+ATPADP+PiN2NH3乙炔乙烯固氮酶固氮酶??!固氮酶由2種蛋白質(zhì)組成:一種為含有鉬和鐵的鉬鐵蛋白,分子量為200000;另一種為含鐵的鐵蛋白,分子量為65000。鐵蛋白具有很強(qiáng)的還原力,它提供電子給鉬鐵蛋白。鉬鐵蛋白能與氮?dú)夥肿咏j(luò)合,然后使之還原為氨。在這個(gè)過程中,需要腺苷三磷酸(ATP)提供能量和鐵氧還蛋白充當(dāng)強(qiáng)還原劑。一、固氮酶的催化反應(yīng)固氮酶來(lái)源于多種固氮微生物,能催化大氣中的N2還原為NH3,N2+8H++8e-+16MgATP→2NH3+H2+16MgADP+16Pi(

4、無(wú)機(jī)磷酸鹽)除催化N2還原為NH3外,固氮酶還能和許多小分子底物作用,沒有嚴(yán)格的專一性。如:氮酶催化反應(yīng)HCN+6H++6e→CH4+NH3N2O+3H++2e→N2+NH3C2H2+2H++2e→C2H4二、固氮酶的組成和結(jié)構(gòu)固氮酶由各種固氮微生物分離出來(lái),均為由鉬鐵蛋白和鐵蛋白組成。1993年才基本確定功能:鐵蛋白是依賴于ATP供給能量的電子傳遞體,把電子傳遞給鉬鐵蛋白,鉬鐵蛋白結(jié)合底物(N2)分子并催化其還原。三、固氮酶作用機(jī)理研究固氮酶中鐵蛋白的作用是傳遞電子,鉬鐵蛋白與底物結(jié)合并還原N2的催化部位,即N2只有與鉬鐵蛋白結(jié)合、方可被催化還原為NH3。固氮酶的作用機(jī)

5、理包括:電子的傳遞、N2分子的鍵合、催化和還原等。1.電子的傳遞研究表明,在固氮酶催化N2和其他底物的還原反應(yīng)中,電子傳遞順序?yàn)椋海ɑ铙w內(nèi))鐵氧還蛋白或黃素蛋白(活體外)Na2S2O4}鐵蛋白鉬鐵蛋白→底物→MgATP2.底物的結(jié)合和還原MoFeP輔基是底物結(jié)合的部位,從鐵鉬輔基中鐵配位不飽和的事實(shí)出發(fā),一般認(rèn)為,底物是通過與三角形配位的鐵配位而結(jié)合的。但也有其他觀點(diǎn):一種認(rèn)為N2分子通過鐵鉬輔基中存在的Fe—Fe鍵形成Fe—N鍵而與鐵鉬蛋白結(jié)合;也有人認(rèn)為以另一種方式結(jié)合。N2與鐵鉬輔基結(jié)合方式目前仍是一個(gè)未解決的問題。FeNN-FeFeFeNN固氮酶的作用機(jī)理小結(jié):電

6、子的傳遞、N2分子的鍵合、催化和還原等。意義與前景意義:1、彌補(bǔ)土壤中氮素?fù)p失2、進(jìn)行根瘤菌拌種,提高豆科作物產(chǎn)量3、固氮微生物的固氮過程完全是生物和微生物自發(fā)進(jìn)行的,無(wú)須提供任何能源和設(shè)備,因而它減少了能源的消耗。由于全部固氮過程都是生物活動(dòng),無(wú)污染物排放,有利于保護(hù)生態(tài)環(huán)境。同時(shí),由于減少和免除了化學(xué)氮素的投入,使農(nóng)產(chǎn)品中硝酸和亞硝酸物質(zhì)大幅度降低,提高了農(nóng)產(chǎn)品的品質(zhì),減少致癌物質(zhì)對(duì)人類的危害。前景設(shè)想:將固氮基因轉(zhuǎn)移到非豆科作物細(xì)胞內(nèi),使其自行固氮謝謝!

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