影響紅細胞溶血的因素一.doc

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1、(由于不知道白蛋白在實驗室是否可用,另附一個實驗,這兩個實驗取材以及對象一樣,只是覺得下面這個實驗操作很簡單,所以沒有作為第一考慮的設計方案)實驗名稱:影響紅細胞溶血的因素一.實驗目的1.了解能夠引起紅細胞溶血的各種理化因素,引起紅細胞溶血的生理生化原理。2.掌握紅細胞溶血的實驗方法。觀察不同濃度的低滲溶液與紅細胞抵抗力之間的關系。以及紅細胞化學溶血的現(xiàn)象3.掌握等滲溶液和等張溶液的區(qū)別二.實驗原理1.正常的紅細胞懸浮于等滲血漿中,若置于低滲溶液內(nèi),則水會進入紅細胞使紅細胞膨脹而變形,如滲透壓持續(xù)下降,紅細胞會持續(xù)破裂而釋放血紅蛋白,即滲透性溶血。有機溶劑,酸,堿可破壞紅細胞膜疏水鍵和膜蛋白上

2、的次級鍵,溶解膜脂質,使膜蛋白變性引起化學性溶血。2.1.9%的尿素是等滲溶液而不是等張溶液,可以自由進入紅細胞內(nèi)部從而導致水大量進入紅細胞,導致紅細胞破裂溶血。三、實驗對象家兔四、實驗器材試管,試管架,滴管,移液管,注射器。五、實驗藥品1%氯化鈉生理鹽水1%肝素0.1mol/LHCL0.1mol/LNaOH乙醚或氯仿1.9%尿素六、實驗步驟1制備紅細胞懸液:取家兔血,加入肝素,可采用自然沉降法,取血后加肝素靜置,使紅細胞自然沉降。2取試管8支,標記排列在試管架上,按下表配制各種濃度氯化鈉:試液123456781%Nacl(ml)1.21.41.61.82.02.22.63.6蒸餾水2.82.

3、62.42.22.01.81.40.4溶液濃(%)0.300.350.400.450.500.550.600.9每支試管放入紅細胞懸液1至2滴,搖勻,靜置,30分鐘后觀察各式管之溶血現(xiàn)象。(1)管內(nèi)液體混濁,上層帶紅色者,稱為不完全溶血。記錄開始不完全溶血濃度。(2)管內(nèi)液體變紅而透明者,稱完全溶血,記錄開始完全溶血濃度。(3)管內(nèi)液體分兩層,上層淺黃色透明,下層紅色不透明者,為不溶血。4另取試管4支,各盛紅細胞懸液2ml,分別加入下列溶液觀察紅細胞溶血現(xiàn)象:(1)0.9%Nacl1ml(2)氯仿或乙醚0.2ml(3)0.1mol/LHCL1ml(4)0.1mol/LNaOH1ml半小時后,觀

4、察各試管的溶血現(xiàn)象。5另取試管2支,各盛紅細胞懸液2ml,分別加入0.9%NaCL和1.9%尿素,靜置,觀察尿素管中的溶血現(xiàn)象。七、注意事項1.紅細胞滲透溶血實驗為定量指標實驗,所以氯化鈉溶液的濃度在配制時,要求準確,(使用移液管)。2.在實驗過程中,要減小機械震動,滴加藥品時要靠近液面,以免沖擊力太大使紅細胞破損,造成人為溶血。3.在加入化學試劑前,可加入少許生理鹽水,使化學試劑所造成溶液滲透壓的改變不至于過大而影響實驗解釋。4.各試管應標明號數(shù),不要混淆。

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