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《抗體效價的Elisa測定.ppt》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、實驗五酶聯(lián)免疫吸附測定BSA抗體效價1.目的要求(1)學(xué)習(xí)酶聯(lián)免疫吸附測定的基本原理。(2)掌握酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)，抗體的效價測定及酶聯(lián)免疫測定儀的使用。Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.2.基本原理免疫酶技術(shù):酶標(biāo)Ab/Ag,酶結(jié)合物的酶在免疫反應(yīng)后，作用于厎物后顯色，根據(jù)顏色的有無和深淺，定量測定Ab/Ag。免疫反應(yīng)：一次或數(shù)次具Ag,Ab特異的免
2、疫學(xué)反應(yīng)酶促反應(yīng)：只進(jìn)行一次顯示出生物放大作用，靈敏度ng,pgEvaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.60年代初期，Averameas&Ram等建立了免疫酶技術(shù)(immunoenzymatictechniques)利用特殊的交聯(lián)劑研制出辣根過氧化物酶---人血清白蛋白及酸性磷酸酯酶---抗體，統(tǒng)稱為酶標(biāo)記物或酶結(jié)合物，用于抗原或抗體的示蹤、定位或定量測定Ev
3、aluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.酶聯(lián)免疫吸附測定(enzyme-linkedimmunosorbentassay簡稱為Elisa)-----是在免疫酶技術(shù)(immunoenzymatictechniques)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術(shù)。本法兼有靈敏度高和特異性強兩方面的優(yōu)點。Evaluationonly.CreatedwithAspose.S
4、lidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.1974年Voller等用聚苯乙烯微量反應(yīng)板作為免疫吸附劑吸附抗體(抗原)，再與相應(yīng)的酶標(biāo)記物結(jié)合操作更方便，易重復(fù)靈敏度可高達(dá)ng（10-9g）至pg(10-12g)，Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.(Enzyme-L
5、inkedImmunosorbentAssay)Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.免疫標(biāo)記技術(shù)Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.應(yīng)用各種液相和固相免疫分析方法，對體液中的半抗原、抗原或抗體
6、進(jìn)行定性和定量測定標(biāo)記抗體或抗原熒光素、放射性同位素、酶、鐵蛋白、膠體金及化學(xué)(或生物)發(fā)光劑鏡檢觀察或進(jìn)行自動化測定熒光顯微鏡，射線測量儀，酶標(biāo)檢測儀，電子顯微鏡和發(fā)光免疫測定儀等直接在細(xì)胞、亞細(xì)胞、超微結(jié)構(gòu)及分子水平上,對抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行定性和定位研究Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.酶------性能穩(wěn)定、經(jīng)濟易得、底物無色、產(chǎn)物顯色，便于檢測常用
7、的酶:堿性磷酸酯酶、辣根過氧化物酶(horseradperoxidase簡稱HRP)、葡萄糖氧化酶、半乳糖苷酶等。酶標(biāo)技術(shù)Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.戊二醛法，過碘酸氧化法將酶與Ab交聯(lián)在一起Ag-Ab-抗Ab-HRPTMB+H2O2產(chǎn)物（黃色，OD450)+H2OEvaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor
8、.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.圖一 直接型ElisaEvaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposeP
