色譜分析中歸一化法、外標(biāo)法、內(nèi)標(biāo)法的區(qū)別.doc

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1、色譜分析中面積歸一化法、外標(biāo)法、內(nèi)標(biāo)法適用范圍及優(yōu)缺點簡介在色譜分析中，即我們常用的高效液相色譜分析（HPLC）和氣相色譜分析（GC）分析中，進行分析時，通常采用三種方法：面積歸一化法、外標(biāo)法、內(nèi)標(biāo)法。這三種方法的適用范圍及各自的優(yōu)缺點是什么呢？在這里簡單做一介紹。1、歸一化法。即在一定分析條件下，樣品經(jīng)過直接溶解，過濾等操作以后,直接進分析儀器檢測，得到色譜圖。通常用于粗略檢查樣品中的各出峰成分含量，用于定性和粗略的定量。優(yōu)點：與進樣量準確度無關(guān)、與儀器和分析條件有關(guān)。缺點：a.在此條件之下，所有有

2、效組分必須出峰，且所有組分必須在一個分析周期內(nèi)流出色譜峰；b.定量計算必須先知道各成分的校正因子，校正因子的求出較麻煩。2、易揮發(fā)性的油脂類化合物和混合性氣體、液體，可用GC歸一化法進行定量檢測。例如食用油里面各成分的含量測定。2、外標(biāo)法。用待測組分的純品作為對照物質(zhì)，以對照物質(zhì)和樣品中待測組分的響應(yīng)信號（即峰面積大?。┫啾容^進行定量的方法。優(yōu)點：簡便；只關(guān)注待測成分出峰，不需要所有成分出峰。缺點：a.必須有被測組分的純品作為標(biāo)準對照物；b.此方法準確性受進樣重復(fù)性和實驗條件穩(wěn)定性的影響。3、內(nèi)標(biāo)法。

3、選擇樣品中不含有的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物加入待測樣品中，以待測組分和內(nèi)標(biāo)物的響應(yīng)信號（即峰面積大?。Ρ龋瑢Υ郎y組分定量的方法。優(yōu)點：a.是一種比較準確的定量方法；b.定量結(jié)果與進樣量重復(fù)性無關(guān)（在色譜柱不超載范圍內(nèi)）；c.只需要內(nèi)標(biāo)物與被測物出峰，達到一定的分離度即可；d.常用于樣品的GC定量檢測以及微量成分含量檢測；缺點：配置較麻煩；內(nèi)標(biāo)物需要跟待測組分在同樣條件下出峰，且分離度較好，所以選擇合適的內(nèi)標(biāo)物比較困難。