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《實(shí)驗(yàn)1-植物組織中自由水和束縛水含量的測定.ppt》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在PPT專區(qū)-天天文庫。
1、實(shí)驗(yàn)1植物組織中自由水和束縛水含量的測定一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、了解和掌握自由水和束縛水測定的原理和意義及測定的方法2、熟悉阿貝折射儀的使用二、實(shí)驗(yàn)原理自由水—未被細(xì)胞原生質(zhì)膠體顆粒吸附而可以自由移動(dòng)、蒸發(fā)和結(jié)冰,也可以作為溶劑。束縛水—被細(xì)胞原生質(zhì)膠體顆粒吸附而不易移動(dòng),因而不易被奪取,也不能作為溶劑。依據(jù)水勢差而移動(dòng)的原理,將植物組織浸入高濃度(低水勢)的糖溶液中一定時(shí)間后,自由水可全部擴(kuò)散到糖液中,組織中便留下束縛水。自由水?dāng)U散到糖液后(相當(dāng)于增加了溶液中溶劑)便增加了糖液的重量,同時(shí)降低了糖液的濃度。測定此降低了的糖液的濃度,再根據(jù)原先已知的高濃度糖液的濃度及重量,可求出濃度降低了的
2、糖液的重量。用濃度降低了的糖液的重量減去原來高濃度糖液的重量即為植物組織中的自由水的量(即擴(kuò)散到高濃度糖液中的水的量)。最后,用同樣的植物組織的總含水量減去此自由水的含量即是植物組織中束縛水的含量。三、實(shí)驗(yàn)器材1、材料:新鮮的植物葉片(陰生、陽生)2、儀器:阿貝折射儀;烘箱。3、試劑:重量百分濃度為60%的蔗糖溶液;用托盤天平稱取蔗糖60~65g,置燒杯中,加蒸餾水40~35g,使溶液總重量為100g,溶解后備用。四、實(shí)驗(yàn)步驟1.植物組織中總含水量的測定(1)取稱量瓶1只,準(zhǔn)確稱重。(2)在田間選取生長一致的待測的植物數(shù)株,各選部位、長勢、葉齡一致的有代表性葉子數(shù)片。用打孔器鉆取小
3、圓片150片(注意避開粗大的葉脈),立即裝到上述稱量瓶中(每瓶隨機(jī)裝入50片),蓋緊瓶蓋并精確稱重。(3)將稱量瓶連同小圓片置烘箱中105℃下烘15min以殺死植物組織細(xì)胞,再于80~90℃下烘至恒重(稱重時(shí)須置干燥器中,待冷卻后稱)。設(shè)稱量瓶重量為W1,稱量瓶與小圓片的重量為W2,稱量瓶與烘干的小圓片的重量為W3(以上重量單位均設(shè)為g,下同)。則植物組織的總含水量(%)可按下式計(jì)算植物組織的總含水量(%)=(W2-W3)/(W2-W1)×100根據(jù)上式可求出組織總含水量的值。2.植物組織中自由水含量的測定(1)另取稱量瓶1只,準(zhǔn)確稱重。(2)用打孔器打取小葉圓片30片(植物材料的
4、選取同上),立即隨機(jī)裝入稱量瓶中蓋緊瓶蓋并立即稱重。(3)稱量瓶中各加入60%的蔗糖溶液5ml左右,再準(zhǔn)確稱重。(4)各瓶于暗處置4~6h(經(jīng)減壓處理后,只需在暗處置1h),其間不時(shí)輕輕搖動(dòng)。到預(yù)定的時(shí)間后,充分搖動(dòng)溶液。用阿貝折射儀(見附注)測定瓶中糖液濃度,同時(shí)測定原來的糖液濃度。設(shè)稱量瓶重量為W1,稱量瓶與小圓片的重量為W2,稱量瓶與小圓片及糖液的重量為W4,糖液原來的濃度為C1,浸過植物組織后的糖液的濃度為C2。則植物組織中自由水的含量(%)可由下式算出:植物組織中自由水的含量(%)=(W4-W2)×(C1-C2)/[(W2-W1)×C2]×100根據(jù)上式同樣可求出三個(gè)不同
5、的測定值并進(jìn)一步求出其平均值。3.植物組織中束縛水含量的計(jì)算植物組織中束縛水的含量(%)=組織總含水量(%)-組織中自由水含量(%)(二)稱重法1、取稱量瓶2只,編號(hào)2、取完整葉片避開主脈,用打孔器取30片,立即稱重后放入稱量瓶。3、每個(gè)稱量瓶加入植物組織質(zhì)量6倍的65%的蔗糖溶液4、各稱量瓶置于暗處4-6小時(shí),期間不斷搖動(dòng)。5、將葉片取出,用濕紗布或?yàn)V紙吸去表面糖液,立即稱重植物組織中的自由水含量(%)=((浸泡前葉片質(zhì)量—浸泡后葉片質(zhì)量)/浸泡前葉片質(zhì)量)*100植物組織中束縛水的含量(%)=組織總含水量(%)-組織中自由水含量(%)五實(shí)驗(yàn)作業(yè)1、束縛水含量為什么與植物的抗性有
6、關(guān)?2、討論同一植物在不同外界環(huán)境條件下的相對(duì)含水量有何特點(diǎn)?