順鉑增加人Hela細(xì)胞放療敏感性涉及細(xì)胞周期的研究.pdf

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1、·820·江蘇醫(yī)藥雜志2002年11月第28卷第11期JiangsuedJ,November2002,o28,No.11·實驗研究·順鉑增加人ea細(xì)胞放療敏感性涉及細(xì)胞周期的研究劉穎劉永彪施奕【摘要】目的探討小劑量順鉑增加人ea細(xì)胞對電離輻射敏感性涉及細(xì)胞周期動力學(xué)的機理。方法將ea細(xì)胞分為空白對照組、單純放療組、單純化療組和放療加化療組,用流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞周期變化,采用P免疫組化法檢測ea細(xì)胞受作用后5基因蛋白表達情況。結(jié)果單純放療、單純化療均可誘導(dǎo)ea細(xì)胞凋亡,而放療加化療組細(xì)胞凋亡率明顯增加,經(jīng)順鉑作用后,ea細(xì)胞周期發(fā)生明顯變化,表現(xiàn)為期減少、期和/期增加

2、,突變型5表達減弱。12結(jié)論小劑量順鉑可通過改變培養(yǎng)的人ea細(xì)胞周期,誘導(dǎo)細(xì)胞/期延遲從而提高放療敏感2性,可能與其內(nèi)在的5基因表達改變有關(guān)?!娟P(guān)鍵詞】順鉑放療敏感性細(xì)胞周期免疫組織化學(xué)Studyoncisplatin*seffectsontheenhancementofthesensitivityofradiotherapyofhumanhelacelllinesthroughcell-cyclekineticsLIUYing,LIUYongbiao,S~IYi.DePartmentofObstetricsandGyne-cology,Affiliated~osPitalof

3、Xuzhoumedicalcollege,Xuzhou221002【Abstract】ObjectiveToinvestigateoWdosecisatinintheenhanceinoutofthesensitivityofra-diotherayofhumaneaceinesthrouthadjustingce-cycekinetics.MethodsTheeacesWeredi-videdintofourgrous(controgrou,radiationony,chemotherayony,radiationandchemotheray),foW-cytometryWa

4、sintroducedinthestudyofthececycesandaotosisofeaces,andimmunohistoche-mistryof5rotein.ResultsRadiationandchemotheraybothcoudinduceeacesaotosis,cisatincoudobviousyenhanceeacesaotosisinducedbyradiation,andcisatincoudchangece-cyceofeaceines,1hasecesdecreaseand2/hasecesincrease.ConclusionLoWdosec

5、isatincanenhancethesensitivityofradiotheraythroughchangececyceofeaceines.【Keywords】CisatinRadiosensitivityCe-cyceImmunohistochemistry放療是宮頸癌治療的重要方法之一。近年來關(guān)二、ea細(xì)胞體外處理:取對數(shù)生長期細(xì)胞進于藥物加放射治療對腫瘤治療起到增敏、增效作用行分組實驗,每個實驗組設(shè)6個平行對照(1)空白對的研究越來越多,以期獲得理想的增加放療敏感性照組:細(xì)胞不進行處理直接收集待測。(2)單純放療而又不增加毒副作用的臨床用藥。本研究利用流式組:分別給

6、予2、4、6、8、10y的X線照射,采用進口細(xì)胞儀和免疫組化法對培養(yǎng)的人ea細(xì)胞經(jīng)小劑西門子直線加速器單次照射。()單純化療組:在培量順鉑作用后,從其細(xì)胞周期動力學(xué)的變化及調(diào)節(jié)養(yǎng)基中加入順鉑使其終濃度為0/m。(4)放!mo蛋白探討其放療增敏效應(yīng)的機理。療加化療組:放療前12小時給予0/m的順!mo資料與方法鉑,再進行不同劑量的照射。一、細(xì)胞培養(yǎng):宮頸鱗狀上皮細(xì)胞癌ea細(xì)胞三、流式細(xì)胞儀檢測:流式細(xì)胞儀為美國BD公株由中國科學(xué)院上海細(xì)胞生物研究所提供。培養(yǎng)基司生產(chǎn)的FACcaibur型,用含0.25%胰酶和為RPI1640(美國IBICo公司),配制成含10%0.02%EDTA

7、的消化液消化細(xì)胞后以1000轉(zhuǎn)/分速胎牛血清、100IU/m青霉素和0.1mg/m鏈霉素,度離心,再用PB洗2遍,用1m預(yù)冷的70%乙醇在7C、5%CO2孵箱中培養(yǎng),用0.25%胰酶和固定置4C冰箱過夜,次日取固定后106個細(xì)胞,0.02%EDTA消化傳代,實驗期間不斷凍存。PB漂洗2遍,1mPB混勻細(xì)胞,加入RNA酶至終濃度為50/m,7C水浴1小時后放入冰浴中,!g作者單位:221002徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院(劉穎);徐州醫(yī)學(xué)院腫再加入PI至終濃度為50!g/m,4C避光染色半小瘤研究所(劉

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