資源描述：
《bdnf對aβ致傷大鼠海馬神經元突觸功能修復的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、HEILONG~ANGMEDICINEANDPHARMACYDec．2013，Vo1．36No．6·7·BDNF對Ap致傷大鼠海馬神經元突觸功能修復的影響馮旭．黃昕艷．江清林．趙錦程(佳未斯大學神經科學研究所，黑龍江佳未斯154oo7)旦璧凳竺犁塑至孝。．塑專壁的期大窒磐倒置相差顯微鏡下觀察，培養(yǎng)至第5天神經元胞體進一擎突壁暨疃皇。AB窶箜步增大，突起繼續(xù)粗增，l萊分明孟苫菱至．．窒二套觸堡墨墊里孽三在神經．覆損傷修墨t乙塑妻摹零展粵童三佳第第79天天神粹經經元元生發(fā)長育旺成盛氨，，胞亙體菌大，綦
2、突起：萇不，分枝蓬囊末連,I)2A[31-42聚擎算體夕爹均，神經元個體難以分出。NSE免煮細益。，觸蛋：白翌神壅經攫凰磐蓬，搴．，BDNF對．A．B致傷筆霆窒鴦及突經元胞漿內可覓棕簧色陽性顆冕(Neuo，g：。、，塑烹(．疫反應；經陽性并藪，芫純N?9o％?~2~～o～一?．modulin,治?療～提?供～N實m驗警依據(jù)影響。為阿爾海默茨病突觸損傷機制及2．2不同濃度1-?42箍神磊生存率、凋亡率的。髟晌’。?。一’一一?’1．1實驗材料大，突起長，軸突遠端生長錐染色明顯。與正常對照組相比，新生
3、24h內sD大鼠，由佳木斯大學實驗動物中心提供21．tmol／LAl31—42、5Ixmol／LAIM一42組著色細胞無明顯減(動物質量合格證號：黑動字第99102001)。AIM一42(Sigma少，軸突生長錐染色少；1Opmol／LAIM一42組著色細胞減少，公司)；Caspase一3免疫組化試劑盒(武漢博士德公司)；山羊被染色的細胞多為胞體較小，突起較短；20pmol／LA[31—42抗小鼠IgG(trite)、山羊抗兔Igcl：兀TC)(santaCruz公司)。組細胞明顯減少，殘存細胞胞
4、體小，突起斷裂、消失。隨著1．2方法AIM一42濃度的增加，神經細胞生存率逐漸降低，1O、取2Ah內新生sD大鼠，暴露大腦半球雙側海馬，用鑷子201~mol／L，Apl一42孵育24h的神經細胞生存率明顯降低夾取海馬放入預冷的DMEM／FI2一倍液中漂洗2—3次。胰(P<0。05、P<0．01)。凋亡神經元胞體明顯縮小，折光性酶消化，將消化后的組織液用2o0目篩網(wǎng)過濾去除腦膜及纖下降或消失，突起開始回縮，分枝連接出現(xiàn)大面積回縮斷裂，維組織。離心棄上清，加入DMEM／FI2完全培養(yǎng)液制成單細胞周圍光
5、暈消失，細胞呈點狀散在分布。隨著AI31—42濃細胞懸液，接種于24孔板中置37℃、5％的CO：培養(yǎng)箱中培度的增加，神經細胞凋亡率逐漸上升，凋亡神經元胞體明顯養(yǎng)，每3天半量換液一次，每7—8天傳代一次，每天連續(xù)觀縮小，折光性下降或消失，突起開始回縮，分枝連接出現(xiàn)大面察細胞生長情況及細胞形態(tài)。并拍照觀察細胞生長情況。海積回縮斷裂。細胞周圍光暈消失，細胞呈點狀散在分布，1O、馬神經元細胞鑒定。將培養(yǎng)7d的海馬神經細胞分為5組，20t~mol／LA[31—42孵育24h的神經細胞凋亡率明顯升高加入AB1
6、—42，使其終濃度分別為：A組(對照組)0t~nol／L；(P<0．05、P<0．01)。見表1，圖1—3。B組2ttmol／L；C組5ttmol／L；D組10~mol／L；E組20~aol／L，繼續(xù)培養(yǎng)，制備Apl-42誘導原代海馬神經細胞建立阿爾茨海默病細胞模型。MTr法測細胞存活率，TUNEL法測定細胞凋亡率。正常海馬神經細胞作為正常對照組，lOpmol／LAIM一42致傷海馬神經細胞作為模型組。模型組分為BDNF低、中、高劑量組和空白對照組，每組分別加入BDNF至5ng／mL、20ng／m
7、L、lOOn~／mL、0n~／mL終濃度。分別以Ng、Nm為一抗，行免疫熒光細胞化學染色，激光共聚焦顯微鏡下，采集圖像，測定神經元樹突Ng和軸突Nm的平均熒光強度值。1．3統(tǒng)計學處理采用SPSS13．0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析，各組數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差(±s)表示，P<0．05表示差異有統(tǒng)圖l大鼠海馬神經細胞原代培養(yǎng)7dNSE鑒定計學意義。(免疫細胞化學，DAB顯色，×100)·lO·黑龍江醫(yī)藥科學2013年12月第36卷第6期28(19)：2859—2860[9]AntonE，Marchion
8、niM，IceK，et丑1．RoleofGGF／neuregulinsigns-￡6]VanDamEJ，RuiterB，x∞l8lA，eta1．N—methy一1D—aspaxtate—lingininteractionsbetWeenmigratingneu_vor~andradial_minthein—ducedIonS—tenndepressionisassociatedwithadecreaseindevelopingcerebralc0懈[J]．Development，1
