雙酚A脅迫對蠶豆根尖細(xì)胞微核的影響-論文.pdf

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1、江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)2013年第41卷第8期．-——375-——雷忻，盧利梅，王文強(qiáng)，等．雙酚A脅迫對蠶豆根尖細(xì)胞微核的影響[J]．江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41(8)：375—376雙酚A脅迫對蠶豆根尖細(xì)胞微核的影響雷忻，盧利梅，王文強(qiáng)，延志蓮，董臘梅(延安大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，陜西延安716000)摘要：采用蠶豆根尖微核檢測法，研究5種不同濃度(60、80、100、120、140mg／L)雙酚A(bisphenolA，BPA)對蠶豆根尖細(xì)胞微核的誘導(dǎo)作用。結(jié)果顯示，BPA處理豆蟲根尖細(xì)胞出現(xiàn)明顯的微核現(xiàn)象；在較低濃度處理組(60、8O、100ms／L)，根尖細(xì)胞微核率隨BPA處理濃度的增大而逐漸升高

2、，在100mg／LBPA處理時(shí)達(dá)到最高；而在較高濃度處理組(120、140mg／L)，微核率則逐漸下降。說明BPA對蠶豆根尖細(xì)胞具有顯著的遺傳毒性，在一定濃度范圍內(nèi)，毒性隨BPA濃度的增大呈先增強(qiáng)后減弱的變化規(guī)律。關(guān)鍵詞：雙酚A；蠶豆；根尖細(xì)胞；微核中圖分類號：X52文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號：1002—1302(2013)08—0375—02雙酚A(bisphenolA，BPA)作為重要的化工原料，廣泛1．5em，挑選根尖一致的種子，置于培養(yǎng)皿中染毒。用于生產(chǎn)增塑劑、抗氧化劑、農(nóng)藥、染料、涂料等精細(xì)化工產(chǎn)1．2．2毒性試驗(yàn)根據(jù)預(yù)備試驗(yàn)所確定的出現(xiàn)微核最小的品，具有易富集和難降解等特點(diǎn)，毒性可

3、以通過食物鏈傳遞和BPA處理濃度和最大出現(xiàn)濃度，確定對蠶豆根尖進(jìn)行BPA的放大，對動植物體和人類的健康產(chǎn)生影響，是目前環(huán)境中最常敏感濃度范圍，將BPA設(shè)置5個(gè)濃度處理組(6o、80、100、見的酚類環(huán)境內(nèi)分泌干擾物。120、140ms／L)進(jìn)行毒性試驗(yàn)，同時(shí)設(shè)置空白對照組。每個(gè)蠶豆(Viciafaba)隸屬豆目(Fabales)豆科(Leguminosae)處理組設(shè)置2個(gè)平行組，每組放置15粒初生根生長良好、根野豌豆屬(Vicia)E33，系一年生或二年生草本植物，根系較發(fā)長基本一致的蠶豆種子，染毒4—6h。之后棄去BPA，用達(dá)，具有較強(qiáng)的耐寒性，對土壤的適應(yīng)性較廣，是一種較理想蒸餾水沖洗

4、種子3次，再放入蒸餾水內(nèi)修復(fù)培養(yǎng)22h。的試驗(yàn)材料。蠶豆根尖細(xì)胞的染色體體積大而數(shù)目少，對誘1．2．3根尖制片與觀察計(jì)數(shù)切取修復(fù)后的蠶豆種子根尖變因子極為敏感，是一種良好的環(huán)境監(jiān)測物。錢曉薇曾報(bào)1em，用卡諾氏固定液(無水乙醇：冰乙酸=3：1)固定6—道了乙酸銅、重鉻酸鉀對蠶豆根尖細(xì)胞致畸效應(yīng)。對于12h，加入1mol／L的鹽酸，60℃的恒溫水浴，使根尖水解8—BPA毒性作用的研究多見于水生動物，迄今尚未見其對10min。切取1mlTl左右的根尖置于載玻片上，采用改良品紅蠶豆根尖微核影響的報(bào)道。本研究以蠶豆根尖為材料，檢測染色1h，中性樹膠封片。顯微鏡(OLYMPUSBX51TRF)下觀B

5、PA對細(xì)胞微核率的誘導(dǎo)規(guī)律，了解其致突變作用，為環(huán)境察并拍照。每張切片隨機(jī)觀察根尖細(xì)胞數(shù)大于1000個(gè)，統(tǒng)保護(hù)和BPA監(jiān)測工作提供科學(xué)依據(jù)。計(jì)出現(xiàn)微核的細(xì)胞數(shù)目。計(jì)算方法如下：微核細(xì)胞率=具有微核的細(xì)胞總數(shù)／觀察細(xì)胞總1材料與方法數(shù)×1000％c。1．1供試材料與試劑1．2．4數(shù)據(jù)處理所有數(shù)據(jù)均采用SPSS18．0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)蠶豆，購于西安市北郊胡家廟菜市場；雙酚A(bisphenol行單因素方差分析(One—wayANOVA)，用LSD法進(jìn)行多重A，BPA)，分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)。比較，結(jié)果表示為平均值．4-標(biāo)準(zhǔn)差。顯著性差異以P<0．051．2試驗(yàn)方法表示差異顯著；尸<0

6、．01表示差異極顯著。1．2．1蠶豆浸種、催芽選擇生長飽滿的蠶豆，放入盛有溫2結(jié)果與分析水的大燒杯內(nèi)，浸種24h，其間換水1～2次。待種子吸漲后將其放入鋪有薄層濕潤脫脂棉的平皿內(nèi)，于25℃水浴鍋內(nèi)催2．1蠶豆根尖的染毒癥狀芽36～48h，其間換水2～3次，待蠶豆種子初生根長至1一BPA濃度為60～100mg／L時(shí)，蠶豆根顏色無明顯變化，為白色或乳白色；當(dāng)BPA濃度大于100mg／L時(shí)，根的顏色逐漸變深，由白色變?yōu)闇\黃色、黃色、褐色，嚴(yán)重者甚至變?yōu)槭崭錏l期：2013—04—09黑色?；痦?xiàng)目：國家自然科學(xué)基金(編號：31240076)；陜西省自然科學(xué)基2．2BPA誘導(dǎo)蠶豆根尖細(xì)胞微核的顯微

7、觀察礎(chǔ)研究計(jì)劃(編號：2012JM3012)；陜西省高水平大學(xué)建設(shè)專項(xiàng)資由圖1可見，BPA處理后，蠶豆根尖細(xì)胞的主核旁邊出現(xiàn)金(編號：2012SXTS03)；陜西省教育廳科學(xué)研究項(xiàng)目(編號：微核，為主核的1／10—1／5大小，著色與主核相近或稍淺，其2013JK0710)；陜西省延安市科學(xué)技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(編號：2012KS一15)；生態(tài)學(xué)陜西省重點(diǎn)學(xué)科專項(xiàng)。形態(tài)為圓形或橢圓形。作者簡介：雷忻(1972一)，女，陜西延安