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《產(chǎn)堿性纖維素酶菌株的篩選及酶學(xué)性質(zhì)研究.doc》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、產(chǎn)堿性纖維素酶菌株的篩選及酶學(xué)性質(zhì)研究摘要：從采集的造紙廠土樣中，篩選出1株產(chǎn)堿性纖維素酶酶活力較高的菌株H—1,經(jīng)鑒定，該菌株為革蘭氏陽性芽抱桿菌屬。發(fā)酵產(chǎn)酶條件和酶學(xué)性質(zhì)研究表明H—1菌株的適宜發(fā)酵條件為：接種量為6%,PH9.0,溫度為37°C,此條件下的酶活力可達(dá)8.69U/mL，是初始酶活力的3倍。該酶最適反應(yīng)溫度為40°C,最適反應(yīng)pH9.0。在25?55°C,pH7.0~ll.0仍能保持60%以上的酶活力，能較好地滿足日常洗滌的環(huán)境要求。關(guān)鍵詞：堿性纖維素酶；菌株篩選；發(fā)酵條件；酶學(xué)性質(zhì)中圖
2、分類號(hào)：Q939.96文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：0439-811421-4364-04ScreeningofAlkaline—Ce11u1oseProducingStrainandStudyonItsEnzymaicCharacterizationLUJin—zhenl,RENJun1,YANGWen—chaol,XIONGHan—guo2Abstract：Fromsoilsamp1escol1ectedfrompapermil1s,onestraincalledH—1capab1eofdegradingc
3、el1u1osewasscreenedandidentifiedasGram—positiveBaci11us.Theoptimumenzyme—producingconditionswereasfo1lows,inoculumamount6%,pH9.0,temperature37°C?Theenzymeactivitywasupto8.69U/mL,whichwas3timeshigherthantheinitialenzymeactivity.Theoptimalconditionsfortheen
4、zymaticreactionwereabout40°CandpH9.0.Theenzymeactivitycou1dbemaintainedabove60%attemperature25?55°CandpH7.0?11.0,whichmeettheenvironmenta1requirementsofthedailywashing.Keywords：a1ka1ine—ce11uloseenzyme；strainscreening；fermentationconditions；characteristic
5、sofenzyme纖維素酶的研究一般都以有效利用纖維素資源為主，酶作用的pH多為酸性，當(dāng)添加到洗滌劑中，由于所處環(huán)境為堿性而失去活力，不能發(fā)揮作用［1］。近年來堿性纖維素酶的發(fā)現(xiàn)使其在洗滌工業(yè)中得到成功應(yīng)用。堿性纖維素酶是纖維素酶系的一個(gè)組分，即竣甲基纖維素酶，它不含有纖維素酶系的其他兩個(gè)組分，能作用于底物CMC。CMC屬大分子多糖衍生物，它被降解后生成多種相對(duì)分子質(zhì)量不等的低聚糖。堿性纖維素酶在對(duì)天然纖維素作用的過程中不能發(fā)生酶組分間的協(xié)同效應(yīng)，不會(huì)使棉纖維受到較多的分解破壞［2,31它主要對(duì)棉纖維中占
6、10%左右非結(jié)晶區(qū)的纖維素分子起作用，對(duì)結(jié)晶區(qū)纖維素水解活力很低，因此不會(huì)明顯降低棉纖維的牢固度，并能去除侵入衣物內(nèi)部的塵泥皮脂，顯著提高洗滌效果，節(jié)約洗滌活性物用量，減少環(huán)境污染，是目前世界洗滌工業(yè)發(fā)展的趨勢(shì)［4］。因此研究和開發(fā)堿性纖維素酶產(chǎn)品具有重要的現(xiàn)實(shí)意義和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。本試驗(yàn)從堿性土壤中篩選出1株產(chǎn)堿性纖維素酶的野生菌株，并對(duì)其搖瓶發(fā)酵產(chǎn)酶條件和酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了研究，以期為工業(yè)化生產(chǎn)提供一定的理論參考。1材料與方法1.1材料1.1.1土樣來源取自湖北省武漢市陽邏、黃陂等地造紙廠的堿性土壤。1.1.2
7、培養(yǎng)基斜面保藏培養(yǎng)基配方為：竣甲基纖維素鈉10g,酵母膏4g,牛肉膏5g,蛋白腺5g,NaC15g,KH2P041g,瓊脂粉15g,0.2mo1/L氫氧化鈉調(diào)至pH9.0o分離培養(yǎng)基A：蛋白腺10g,酵母膏10g,竣甲基纖維素鈉10g,NaC15g,KH2P041g,瓊脂粉15g,0.2mo1/L氫氧化鈉調(diào)至pH9.0o分離培養(yǎng)基B：KH2PO42g,2SO41.4g,MgSO40.3g,CaC120.3g,FeSO40.005g,MnSO40.0016g,ZnC120.0017g,CoC120.002g
8、,CMC2g,瓊脂粉15g,0.2mo1/L氫氧化鈉調(diào)至pH9?0。種子培養(yǎng)基：可溶性淀粉15g,酵母膏10g,CMC5g,KN031g,MgS040.5g,K2HP040.5g,FeS040.01g,0.2mo1/L氫氧化鈉調(diào)至pH9.0o發(fā)酵產(chǎn)酶培養(yǎng)基：可溶性淀粉1og,酵母膏10「CMC10g,KN031g,MgSO40.5g,K2HP040.5g,FeS040.01g,0.2mo1/L氫氧化鈉調(diào)至pH9.0o1?2方法
